Flow Cytometry到底有多复杂？# Biology - 生物学
h*n
1 楼
据说这个东西致癌？我炒菜做饭比较喜欢用大火，来美国以后在沃尔玛买了两口炒锅，
各用了半年涂层都开始掉了很多了。后果会不会很严重。。？
各用了半年涂层都开始掉了很多了。后果会不会很严重。。？
h*g
2 楼
因为master 就毕业了，对于new grad 不找自己的advisor 正常吗？会引起对方公司怀
疑在隐瞒什么吗？再说，要是三番五次地去让她做我的reference 估计她也会很烦的，
感觉她一天超忙，有时电话接一下就挂断。。。
可以找自己的本科同学（刚毕业，在一家硅谷软件公司工作），和master的同学吗？（
我相信他们都能说好话）？
还有 在cssa学生会工作过，可以找cssa的学生会主席吗？（但他现在还是学生呀）
苦恼中~~~~~~ 大家给你点意见，特别是对于new grad你们都找的谁呀？
疑在隐瞒什么吗？再说，要是三番五次地去让她做我的reference 估计她也会很烦的，
感觉她一天超忙，有时电话接一下就挂断。。。
可以找自己的本科同学（刚毕业，在一家硅谷软件公司工作），和master的同学吗？（
我相信他们都能说好话）？
还有 在cssa学生会工作过，可以找cssa的学生会主席吗？（但他现在还是学生呀）
苦恼中~~~~~~ 大家给你点意见，特别是对于new grad你们都找的谁呀？
p*w
3 楼
超级小学生zz
老师问：「你怎么了？」
学生回答说：「我太聪明了，一年级对我来说太简单了。我比我姐姐都聪明，可是
她却在3 年级。我觉得我也应该上三年级！」
老师已经受够他了。於是她把学生带到了校长办公室。
她向校长解释了一下学生的情况.
校长建议应该给学生一个测试，如果他答错了任何一个问题，他就应该呆在一年级
里. 老师同意了。
学生被叫进了办公室，老师向他说明了校长的意思，学生也同意了。
校长：「3 乘3 等於几？」
学生：「9 」
校长：「6 乘6 等於几？」
学生：「36」
就这样，校长问了很多3 年级的问题，学生都回答正确.
於是校长对学生的老师说：「我想他可以到3 年级上课了。」
学生的老师说：「让我问他几个问题吧。」
校长和学生都同意了。
老师：「什么东东牛有4 个而我只有2 个？」
学生：「腿。」
老师：「什么东东你裤子里有而我的裤子里没有？」（校长对学生老师问的问题感
到很奇怪，她为什么要问这些问题，校长想。）
学生：「口袋。」
老师：「什么东东以C 开头，T 结尾，上面有很多毛，椭圆型，含有令人陶醉的，
乳白色的液体？」校长的眼睛睁着大大的，想阻止老师继续问下去，学生回答说：「椰
子（Coconut ）。」
老师：「什么东东进去的时候是即红又硬，而出来的时候是软的、有黏液的 ？」
学生：「泡泡糖。」
老师：「什么事情男人要站着做，女人坐着做，狗用三条腿做？」
学生：「握手。」
老师想了一想说：「现在我将问你几个“ 你猜我是什么“ 的问题，可以吗？」
学生：「好的！」
老师：「你用棍橕在我的里面，把我顶上，再把我支起来。而我在这之前就变湿了
。」
学生：「帐篷。」
老师：「手指会进入我。当你烦躁的时候你会玩弄我。最好的男人一直会有我。」
学生：「结婚戒指。」
老师：「进入过我的东东有大有小。当我不舒服的时候，我就会滴下水滴。
当你吹我的时候，你会感到很舒服。」
学生：「鼻子。」
老师：「我有一个坚硬的杆。我的头可以插入到别的东东. 随后，那东东就会全身
颤抖。」
学生：「箭。」
老师：「什么单词以F 开头，K 结尾，并且有让人兴奋的意思。」
学生：「救火车（Firetruck ）。」
老师的问题终於问完了，校长松了一口气，擦了擦额头上的汗说：「让学生到五年
级吧，刚刚你问的那十道题我都全答错了。」……
老师问：「你怎么了？」
学生回答说：「我太聪明了，一年级对我来说太简单了。我比我姐姐都聪明，可是
她却在3 年级。我觉得我也应该上三年级！」
老师已经受够他了。於是她把学生带到了校长办公室。
她向校长解释了一下学生的情况.
校长建议应该给学生一个测试，如果他答错了任何一个问题，他就应该呆在一年级
里. 老师同意了。
学生被叫进了办公室，老师向他说明了校长的意思，学生也同意了。
校长：「3 乘3 等於几？」
学生：「9 」
校长：「6 乘6 等於几？」
学生：「36」
就这样，校长问了很多3 年级的问题，学生都回答正确.
於是校长对学生的老师说：「我想他可以到3 年级上课了。」
学生的老师说：「让我问他几个问题吧。」
校长和学生都同意了。
老师：「什么东东牛有4 个而我只有2 个？」
学生：「腿。」
老师：「什么东东你裤子里有而我的裤子里没有？」（校长对学生老师问的问题感
到很奇怪，她为什么要问这些问题，校长想。）
学生：「口袋。」
老师：「什么东东以C 开头，T 结尾，上面有很多毛，椭圆型，含有令人陶醉的，
乳白色的液体？」校长的眼睛睁着大大的，想阻止老师继续问下去，学生回答说：「椰
子（Coconut ）。」
老师：「什么东东进去的时候是即红又硬，而出来的时候是软的、有黏液的 ？」
学生：「泡泡糖。」
老师：「什么事情男人要站着做，女人坐着做，狗用三条腿做？」
学生：「握手。」
老师想了一想说：「现在我将问你几个“ 你猜我是什么“ 的问题，可以吗？」
学生：「好的！」
老师：「你用棍橕在我的里面，把我顶上，再把我支起来。而我在这之前就变湿了
。」
学生：「帐篷。」
老师：「手指会进入我。当你烦躁的时候你会玩弄我。最好的男人一直会有我。」
学生：「结婚戒指。」
老师：「进入过我的东东有大有小。当我不舒服的时候，我就会滴下水滴。
当你吹我的时候，你会感到很舒服。」
学生：「鼻子。」
老师：「我有一个坚硬的杆。我的头可以插入到别的东东. 随后，那东东就会全身
颤抖。」
学生：「箭。」
老师：「什么单词以F 开头，K 结尾，并且有让人兴奋的意思。」
学生：「救火车（Firetruck ）。」
老师的问题终於问完了，校长松了一口气，擦了擦额头上的汗说：「让学生到五年
级吧，刚刚你问的那十道题我都全答错了。」……
D*e
4 楼
本来我想这就是个小实验，检测细胞的吞噬作用。实验设想是，我用一种荧光颗粒，孵
育细胞不同时间和经过不同处理后，看哪种条件下细胞吞进去的多。细胞是贴壁生长的
，荧光孵育后我用Trypsin处理，冲洗多次，以确保没有会影响结果的荧光颗粒残留，
再去上Flow Cytometry。
以前没接触过Flow Cytometry。今天去了core facility，结果对方直接否定了我的方
案，说不够精确，要用更复杂的，又要染细胞膜，又要染细胞核，还要用indicator区
分到底是胞内还是胞外的，还要一个一个titration试。
我深深钦佩对方工作认真负责的态度，今天我也长了很多知识，理解到Flow Cytometry
是一门博大可深刻挖掘的技术。但无奈老板push，要求我这篇文章在一个月内投出去，
实在不行就去掉Flow Cytometry的部分。但我觉得有了还是加分的。
想听听大家的看法？
育细胞不同时间和经过不同处理后，看哪种条件下细胞吞进去的多。细胞是贴壁生长的
，荧光孵育后我用Trypsin处理，冲洗多次，以确保没有会影响结果的荧光颗粒残留，
再去上Flow Cytometry。
以前没接触过Flow Cytometry。今天去了core facility，结果对方直接否定了我的方
案，说不够精确，要用更复杂的，又要染细胞膜，又要染细胞核，还要用indicator区
分到底是胞内还是胞外的，还要一个一个titration试。
我深深钦佩对方工作认真负责的态度，今天我也长了很多知识，理解到Flow Cytometry
是一门博大可深刻挖掘的技术。但无奈老板push，要求我这篇文章在一个月内投出去，
实在不行就去掉Flow Cytometry的部分。但我觉得有了还是加分的。
想听听大家的看法？
o*m
5 楼
天哪，致癌！ 有人推荐煎饼，煎蛋的小平锅吗？。。。几乎每天早上都用。。。不要
涂层的。
涂层的。
k*a
6 楼
你决定take 那个offer了，再做reference啊。她只要被烦一次的。
【在 h*****g 的大作中提到】
: 因为master 就毕业了，对于new grad 不找自己的advisor 正常吗？会引起对方公司怀
: 疑在隐瞒什么吗？再说，要是三番五次地去让她做我的reference 估计她也会很烦的，
: 感觉她一天超忙，有时电话接一下就挂断。。。
: 可以找自己的本科同学（刚毕业，在一家硅谷软件公司工作），和master的同学吗？（
: 我相信他们都能说好话）？
: 还有 在cssa学生会工作过，可以找cssa的学生会主席吗？（但他现在还是学生呀）
: 苦恼中~~~~~~ 大家给你点意见，特别是对于new grad你们都找的谁呀？
【在 h*****g 的大作中提到】
: 因为master 就毕业了，对于new grad 不找自己的advisor 正常吗？会引起对方公司怀
: 疑在隐瞒什么吗？再说，要是三番五次地去让她做我的reference 估计她也会很烦的，
: 感觉她一天超忙，有时电话接一下就挂断。。。
: 可以找自己的本科同学（刚毕业，在一家硅谷软件公司工作），和master的同学吗？（
: 我相信他们都能说好话）？
: 还有 在cssa学生会工作过，可以找cssa的学生会主席吗？（但他现在还是学生呀）
: 苦恼中~~~~~~ 大家给你点意见，特别是对于new grad你们都找的谁呀？
d*s
7 楼
你这是要用ImageStream吗？普通flow cytometry染核干嘛呀
z*i
8 楼
据说有害，但致不致癌，看人品了。
【在 h**********n 的大作中提到】
: 据说这个东西致癌？我炒菜做饭比较喜欢用大火，来美国以后在沃尔玛买了两口炒锅，
: 各用了半年涂层都开始掉了很多了。后果会不会很严重。。？
【在 h**********n 的大作中提到】
: 据说这个东西致癌？我炒菜做饭比较喜欢用大火，来美国以后在沃尔玛买了两口炒锅，
: 各用了半年涂层都开始掉了很多了。后果会不会很严重。。？
D*e
9 楼
是的，对方推荐用ImageStream。我开始只要求用一个简单的，结果对方说不reliable
之类的。我也搞不清了，像我这种实验目的有必要上个这么高端的吗？
【在 d***s 的大作中提到】
: 你这是要用ImageStream吗？普通flow cytometry染核干嘛呀
之类的。我也搞不清了，像我这种实验目的有必要上个这么高端的吗？
【在 d***s 的大作中提到】
: 你这是要用ImageStream吗？普通flow cytometry染核干嘛呀
d*e
10 楼
换锅吧，找个铸铁的 起码放心一些
【在 h**********n 的大作中提到】
: 据说这个东西致癌？我炒菜做饭比较喜欢用大火，来美国以后在沃尔玛买了两口炒锅，
: 各用了半年涂层都开始掉了很多了。后果会不会很严重。。？
【在 h**********n 的大作中提到】
: 据说这个东西致癌？我炒菜做饭比较喜欢用大火，来美国以后在沃尔玛买了两口炒锅，
: 各用了半年涂层都开始掉了很多了。后果会不会很严重。。？
m*5
11 楼
真是有人星夜赶考，有人天明辞官。
有imagestream为啥不用……我这里想用都没得用
有imagestream为啥不用……我这里想用都没得用
l*o
12 楼
Just throw it away when you see the layer starts to fall off.
【在 h**********n 的大作中提到】
: 据说这个东西致癌？我炒菜做饭比较喜欢用大火，来美国以后在沃尔玛买了两口炒锅，
: 各用了半年涂层都开始掉了很多了。后果会不会很严重。。？
【在 h**********n 的大作中提到】
: 据说这个东西致癌？我炒菜做饭比较喜欢用大火，来美国以后在沃尔玛买了两口炒锅，
: 各用了半年涂层都开始掉了很多了。后果会不会很严重。。？
D*e
13 楼
我想用啊……关键是时间不允许了……
【在 m******5 的大作中提到】
: 真是有人星夜赶考，有人天明辞官。
: 有imagestream为啥不用……我这里想用都没得用
【在 m******5 的大作中提到】
: 真是有人星夜赶考，有人天明辞官。
: 有imagestream为啥不用……我这里想用都没得用
s*s
14 楼
这玩意儿只要不干烧就没事。比较热的爆锅，或者干煎鱼之类的最好不要做。
不过walmart的锅看着质量不行，推荐去amazon买那种绿颜色的不粘锅，不是
特氟龙的，虽然也拍高热。
【在 o*****m 的大作中提到】
: 天哪，致癌！ 有人推荐煎饼，煎蛋的小平锅吗？。。。几乎每天早上都用。。。不要
: 涂层的。
不过walmart的锅看着质量不行，推荐去amazon买那种绿颜色的不粘锅，不是
特氟龙的，虽然也拍高热。
【在 o*****m 的大作中提到】
: 天哪，致癌！ 有人推荐煎饼，煎蛋的小平锅吗？。。。几乎每天早上都用。。。不要
: 涂层的。
x*e
15 楼
他可能给你更多的选择，我以前已用flow做过胞吞。我是消化下来，荧光标记的蛋白和
细部一起37度30-60min,用酸性的buffer洗掉表面接合的荧光标记蛋白，然后用flow定
量一下荧光强度。不过我同时结合confocal检测的胞吞后的亚细部定位。
Cytometry
【在 D***e 的大作中提到】
: 本来我想这就是个小实验，检测细胞的吞噬作用。实验设想是，我用一种荧光颗粒，孵
: 育细胞不同时间和经过不同处理后，看哪种条件下细胞吞进去的多。细胞是贴壁生长的
: ，荧光孵育后我用Trypsin处理，冲洗多次，以确保没有会影响结果的荧光颗粒残留，
: 再去上Flow Cytometry。
: 以前没接触过Flow Cytometry。今天去了core facility，结果对方直接否定了我的方
: 案，说不够精确，要用更复杂的，又要染细胞膜，又要染细胞核，还要用indicator区
: 分到底是胞内还是胞外的，还要一个一个titration试。
: 我深深钦佩对方工作认真负责的态度，今天我也长了很多知识，理解到Flow Cytometry
: 是一门博大可深刻挖掘的技术。但无奈老板push，要求我这篇文章在一个月内投出去，
: 实在不行就去掉Flow Cytometry的部分。但我觉得有了还是加分的。
细部一起37度30-60min,用酸性的buffer洗掉表面接合的荧光标记蛋白，然后用flow定
量一下荧光强度。不过我同时结合confocal检测的胞吞后的亚细部定位。
Cytometry
【在 D***e 的大作中提到】
: 本来我想这就是个小实验，检测细胞的吞噬作用。实验设想是，我用一种荧光颗粒，孵
: 育细胞不同时间和经过不同处理后，看哪种条件下细胞吞进去的多。细胞是贴壁生长的
: ，荧光孵育后我用Trypsin处理，冲洗多次，以确保没有会影响结果的荧光颗粒残留，
: 再去上Flow Cytometry。
: 以前没接触过Flow Cytometry。今天去了core facility，结果对方直接否定了我的方
: 案，说不够精确，要用更复杂的，又要染细胞膜，又要染细胞核，还要用indicator区
: 分到底是胞内还是胞外的，还要一个一个titration试。
: 我深深钦佩对方工作认真负责的态度，今天我也长了很多知识，理解到Flow Cytometry
: 是一门博大可深刻挖掘的技术。但无奈老板push，要求我这篇文章在一个月内投出去，
: 实在不行就去掉Flow Cytometry的部分。但我觉得有了还是加分的。
f*y
16 楼
推荐不锈钢锅。
买了一套macy的，另买了一个从target的，比较大。 没有涂层，粘锅了以后热水一泡
就下来了。
做蛋也可以做到不粘，大火烧到锅很热，放油热起来转小火，再放鸡蛋。一点也不粘。
炒菜也是多放油热锅，然后转中火就不容易粘锅。
买了一套macy的，另买了一个从target的，比较大。 没有涂层，粘锅了以后热水一泡
就下来了。
做蛋也可以做到不粘，大火烧到锅很热，放油热起来转小火，再放鸡蛋。一点也不粘。
炒菜也是多放油热锅，然后转中火就不容易粘锅。
d*s
17 楼
也不怎么高端，数据分析很简单，一步一步软件都会引导你的。花的时间和flow
cytometry的时间差不多。
reliable
【在 D***e 的大作中提到】
: 是的，对方推荐用ImageStream。我开始只要求用一个简单的，结果对方说不reliable
: 之类的。我也搞不清了，像我这种实验目的有必要上个这么高端的吗？
cytometry的时间差不多。
reliable
【在 D***e 的大作中提到】
: 是的，对方推荐用ImageStream。我开始只要求用一个简单的，结果对方说不reliable
: 之类的。我也搞不清了，像我这种实验目的有必要上个这么高端的吗？
y*e
18 楼
同推荐不锈钢，AMAZON上有，30刀搞定，使用寿命超过三年。
不用担心特富龙
掌握好火候就不粘，比如楼上的经验之谈
不用担心特富龙
掌握好火候就不粘，比如楼上的经验之谈
D*e
19 楼
谢谢！我不怕数据分析，但听core facility的人说起来，前面的预实验和titration貌
似很花时间，怕来不及了。真的有那么复杂吗？比如说染核，还要求我进行好多的
Serial Dilutions
【在 d***s 的大作中提到】
: 也不怎么高端，数据分析很简单，一步一步软件都会引导你的。花的时间和flow
: cytometry的时间差不多。
:
: reliable
似很花时间，怕来不及了。真的有那么复杂吗？比如说染核，还要求我进行好多的
Serial Dilutions
【在 d***s 的大作中提到】
: 也不怎么高端，数据分析很简单，一步一步软件都会引导你的。花的时间和flow
: cytometry的时间差不多。
:
: reliable
H*J
20 楼
推荐ceramic不粘锅，AMAZON上有，30刀左右，贵的有80,100的，很好用。煎鱼，粘一
点的蛋炒饭都行，用油少，就是不能干烧，锅里要有油或水
Ceramic不粘好象己经是第三代技术了
点的蛋炒饭都行，用油少，就是不能干烧，锅里要有油或水
Ceramic不粘好象己经是第三代技术了
l*1
21 楼
>比如说染核，还要求我进行好多的
of course,
pls refer,
http://www.mitbbs.com/article_t/Biology/31849061.html
of course,
pls refer,
http://www.mitbbs.com/article_t/Biology/31849061.html
g*9
22 楼
小实验就小做，做个样品，找个朋友小run一下。有阳性数据了，再考虑高端大气上档
次。
Cytometry
【在 D***e 的大作中提到】
: 本来我想这就是个小实验，检测细胞的吞噬作用。实验设想是，我用一种荧光颗粒，孵
: 育细胞不同时间和经过不同处理后，看哪种条件下细胞吞进去的多。细胞是贴壁生长的
: ，荧光孵育后我用Trypsin处理，冲洗多次，以确保没有会影响结果的荧光颗粒残留，
: 再去上Flow Cytometry。
: 以前没接触过Flow Cytometry。今天去了core facility，结果对方直接否定了我的方
: 案，说不够精确，要用更复杂的，又要染细胞膜，又要染细胞核，还要用indicator区
: 分到底是胞内还是胞外的，还要一个一个titration试。
: 我深深钦佩对方工作认真负责的态度，今天我也长了很多知识，理解到Flow Cytometry
: 是一门博大可深刻挖掘的技术。但无奈老板push，要求我这篇文章在一个月内投出去，
: 实在不行就去掉Flow Cytometry的部分。但我觉得有了还是加分的。
次。
Cytometry
【在 D***e 的大作中提到】
: 本来我想这就是个小实验，检测细胞的吞噬作用。实验设想是，我用一种荧光颗粒，孵
: 育细胞不同时间和经过不同处理后，看哪种条件下细胞吞进去的多。细胞是贴壁生长的
: ，荧光孵育后我用Trypsin处理，冲洗多次，以确保没有会影响结果的荧光颗粒残留，
: 再去上Flow Cytometry。
: 以前没接触过Flow Cytometry。今天去了core facility，结果对方直接否定了我的方
: 案，说不够精确，要用更复杂的，又要染细胞膜，又要染细胞核，还要用indicator区
: 分到底是胞内还是胞外的，还要一个一个titration试。
: 我深深钦佩对方工作认真负责的态度，今天我也长了很多知识，理解到Flow Cytometry
: 是一门博大可深刻挖掘的技术。但无奈老板push，要求我这篇文章在一个月内投出去，
: 实在不行就去掉Flow Cytometry的部分。但我觉得有了还是加分的。
D*e
23 楼
谢谢啦
【在 g*********9 的大作中提到】
: 小实验就小做，做个样品，找个朋友小run一下。有阳性数据了，再考虑高端大气上档
: 次。
:
: Cytometry
【在 g*********9 的大作中提到】
: 小实验就小做，做个样品，找个朋友小run一下。有阳性数据了，再考虑高端大气上档
: 次。
:
: Cytometry
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