问knockin或转基因# Biology - 生物学
n*g
1 楼
去realtor看了一些心仪的房子，但是都没有列出HOA fee。想大概估计一下。
是不是condo的hoa fee相对低一些? 大家的都是多少?
有些房子看着又便宜又好，但是在realtor上都好久了，是不是HOA fee较高吓退的买家
啊。
是不是condo的hoa fee相对低一些? 大家的都是多少?
有些房子看着又便宜又好，但是在realtor上都好久了，是不是HOA fee较高吓退的买家
啊。
f*f
2 楼
我希望将一个內源蛋白加个tag。
1）假如knockin的话，直接在genomic sequence加tag本身会不会导致alternative
splicing?表达就全乱了。小tag也许没问题，大tag如gfp就基本不行吧。
2）那一般knockin是把外源promoter+cDNA+tag一起knock-in么？这样的话蛋白表达量
可能跟内源有可能差很远？
3）针对2），knockin 到染色体具体哪个区域有讲究么？转基因就随机插入了。
谢谢。
1）假如knockin的话，直接在genomic sequence加tag本身会不会导致alternative
splicing?表达就全乱了。小tag也许没问题，大tag如gfp就基本不行吧。
2）那一般knockin是把外源promoter+cDNA+tag一起knock-in么？这样的话蛋白表达量
可能跟内源有可能差很远？
3）针对2），knockin 到染色体具体哪个区域有讲究么？转基因就随机插入了。
谢谢。
s*d
3 楼
100-500 in bay area
【在 n******g 的大作中提到】
: 去realtor看了一些心仪的房子，但是都没有列出HOA fee。想大概估计一下。
: 是不是condo的hoa fee相对低一些? 大家的都是多少?
: 有些房子看着又便宜又好，但是在realtor上都好久了，是不是HOA fee较高吓退的买家
: 啊。
【在 n******g 的大作中提到】
: 去realtor看了一些心仪的房子，但是都没有列出HOA fee。想大概估计一下。
: 是不是condo的hoa fee相对低一些? 大家的都是多少?
: 有些房子看着又便宜又好，但是在realtor上都好久了，是不是HOA fee较高吓退的买家
: 啊。
s*r
4 楼
一般是在你目的基因下游紧挨着放ires-gfp,加tag的话就不用ires
n*g
5 楼
额。。。区间好大啊。。。
【在 s*****d 的大作中提到】
: 100-500 in bay area
【在 s*****d 的大作中提到】
: 100-500 in bay area
f*f
6 楼
谢谢。有个疑问，直接放ires-gfp或gfp，基因组序列一下增加了几百bp，不会导致可
变剪切吗？
【在 s********r 的大作中提到】
: 一般是在你目的基因下游紧挨着放ires-gfp,加tag的话就不用ires
变剪切吗？
【在 s********r 的大作中提到】
: 一般是在你目的基因下游紧挨着放ires-gfp,加tag的话就不用ires
C*d
7 楼
condo的hoa fee相对一般高很多。
l*e
8 楼
如果你放splicing acceptor site的话，的确会 ...
【在 f*****f 的大作中提到】
: 谢谢。有个疑问，直接放ires-gfp或gfp，基因组序列一下增加了几百bp，不会导致可
: 变剪切吗？
【在 f*****f 的大作中提到】
: 谢谢。有个疑问，直接放ires-gfp或gfp，基因组序列一下增加了几百bp，不会导致可
: 变剪切吗？
n*g
9 楼
HOA fee和 property value正相关么？
r*z
10 楼
这个IRES-EGFP是加在最后一个外显子的终止密码子后面吧，last exon -ires-eGFP-
ployA.
ployA.
e*3
11 楼
No.
【在 n******g 的大作中提到】
: HOA fee和 property value正相关么？
【在 n******g 的大作中提到】
: HOA fee和 property value正相关么？
l*y
12 楼
用2A吧，效率会比ires高，需要detele掉gene本来的stop codon【 在 rexhz (
rexhuang) 的大作中提到: 】
rexhuang) 的大作中提到: 】
K*n
13 楼
condo才有HOA，好处是包括了房子外壳的火险、有专人打理绿化带和小区
SFH不交这个，所有这些都要自己管了
洛杉矶地区的HOA一般在100~500之间。据说HOA过高的房子不好卖
SFH不交这个，所有这些都要自己管了
洛杉矶地区的HOA一般在100~500之间。据说HOA过高的房子不好卖
r*z
14 楼
如果我只是想加个 gfp 便于我观察这个基因是否表达，这样做行不行。 promoter ---
--- ATG+eGFP+first exon----
【在 r***z 的大作中提到】
: 这个IRES-EGFP是加在最后一个外显子的终止密码子后面吧，last exon -ires-eGFP-
: ployA.
--- ATG+eGFP+first exon----
【在 r***z 的大作中提到】
: 这个IRES-EGFP是加在最后一个外显子的终止密码子后面吧，last exon -ires-eGFP-
: ployA.
s*d
15 楼
现在有的SFH也有HOA了，负责社区的草坪、公共活动区域之类的
【在 K****n 的大作中提到】
: condo才有HOA，好处是包括了房子外壳的火险、有专人打理绿化带和小区
: SFH不交这个，所有这些都要自己管了
: 洛杉矶地区的HOA一般在100~500之间。据说HOA过高的房子不好卖
【在 K****n 的大作中提到】
: condo才有HOA，好处是包括了房子外壳的火险、有专人打理绿化带和小区
: SFH不交这个，所有这些都要自己管了
: 洛杉矶地区的HOA一般在100~500之间。据说HOA过高的房子不好卖
w*r
16 楼
1)老鼠出来肯定得validate一下，Western看看，不用定位的话用2A-GFP试试？
2)这种一般叫transgenic吧，不叫knockin
【在 f*****f 的大作中提到】
: 我希望将一个內源蛋白加个tag。
: 1）假如knockin的话，直接在genomic sequence加tag本身会不会导致alternative
: splicing?表达就全乱了。小tag也许没问题，大tag如gfp就基本不行吧。
: 2）那一般knockin是把外源promoter+cDNA+tag一起knock-in么？这样的话蛋白表达量
: 可能跟内源有可能差很远？
: 3）针对2），knockin 到染色体具体哪个区域有讲究么？转基因就随机插入了。
: 谢谢。
2)这种一般叫transgenic吧，不叫knockin
【在 f*****f 的大作中提到】
: 我希望将一个內源蛋白加个tag。
: 1）假如knockin的话，直接在genomic sequence加tag本身会不会导致alternative
: splicing?表达就全乱了。小tag也许没问题，大tag如gfp就基本不行吧。
: 2）那一般knockin是把外源promoter+cDNA+tag一起knock-in么？这样的话蛋白表达量
: 可能跟内源有可能差很远？
: 3）针对2），knockin 到染色体具体哪个区域有讲究么？转基因就随机插入了。
: 谢谢。
a*s
17 楼
是的，包括detached condo。
【在 s*****d 的大作中提到】
: 现在有的SFH也有HOA了，负责社区的草坪、公共活动区域之类的
【在 s*****d 的大作中提到】
: 现在有的SFH也有HOA了，负责社区的草坪、公共活动区域之类的
f*f
18 楼
谢谢。假如我希望表达fusion protein，不是用2A-GFP或ires，比如如上所面帖子，
ATG-GFP-exon1-...即把gfp插入到第一个exon之前可行么？另外，可以把GFP序列插入
到最后一个exon之后。在体外瞬时转染，gfp放在N或C端有时会影响蛋白自身，一般做
knockin的话，该如何选择？为规避这种，还是knockin一般用小tag的多？比如flag，
v5等等。
【在 w*****r 的大作中提到】
: 1)老鼠出来肯定得validate一下，Western看看，不用定位的话用2A-GFP试试？
: 2)这种一般叫transgenic吧，不叫knockin
ATG-GFP-exon1-...即把gfp插入到第一个exon之前可行么？另外，可以把GFP序列插入
到最后一个exon之后。在体外瞬时转染，gfp放在N或C端有时会影响蛋白自身，一般做
knockin的话，该如何选择？为规避这种，还是knockin一般用小tag的多？比如flag，
v5等等。
【在 w*****r 的大作中提到】
: 1)老鼠出来肯定得validate一下，Western看看，不用定位的话用2A-GFP试试？
: 2)这种一般叫transgenic吧，不叫knockin
y*g
19 楼
我们这儿SFH大部分看上去有那么一点规划的都有HOA费，我们家小区一年300，看过贵
的一年450，便宜的120，每个小区都不一样的价格，不过都是在100-500区间。
的一年450，便宜的120，每个小区都不一样的价格，不过都是在100-500区间。
s*x
20 楼
插gfp当然没问题，这个我们领域做的多了。
可变剪切从来没听说过，就算有也很少。
需要注意的事gfp会不会影响蛋白功能。
可变剪切从来没听说过，就算有也很少。
需要注意的事gfp会不会影响蛋白功能。
x*g
21 楼
一年？我们家130+每月呀。
【在 y*******g 的大作中提到】
: 我们这儿SFH大部分看上去有那么一点规划的都有HOA费，我们家小区一年300，看过贵
: 的一年450，便宜的120，每个小区都不一样的价格，不过都是在100-500区间。
【在 y*******g 的大作中提到】
: 我们这儿SFH大部分看上去有那么一点规划的都有HOA费，我们家小区一年300，看过贵
: 的一年450，便宜的120，每个小区都不一样的价格，不过都是在100-500区间。
s*x
22 楼
关键还是你的knockin可以完全替代endogenous/wt gene。
这是gold rule
这是gold rule
s*y
23 楼
没列出HOA的就是没有HOA费吧
我们家280一年，SFH，HOA是小区里几个房主volunteer的。。。
我们家280一年，SFH，HOA是小区里几个房主volunteer的。。。
f*f
24 楼
谢谢。
【在 s********x 的大作中提到】
: 关键还是你的knockin可以完全替代endogenous/wt gene。
: 这是gold rule
【在 s********x 的大作中提到】
: 关键还是你的knockin可以完全替代endogenous/wt gene。
: 这是gold rule
n*g
25 楼
realtor上我看的没有一个列出的。。。
要么就是我没找到，要么就是realtor根本不列。不会这么巧合我看的好几十个都没有
HOA吧
【在 s******y 的大作中提到】
: 没列出HOA的就是没有HOA费吧
: 我们家280一年，SFH，HOA是小区里几个房主volunteer的。。。
要么就是我没找到，要么就是realtor根本不列。不会这么巧合我看的好几十个都没有
HOA吧
【在 s******y 的大作中提到】
: 没列出HOA的就是没有HOA费吧
: 我们家280一年，SFH，HOA是小区里几个房主volunteer的。。。
n*g
26 楼
一个月上百是一般水平吧。
一年才只要4、5百的真是太爽了。。。
一年才只要4、5百的真是太爽了。。。
Z*I
27 楼
我们这儿500/y左右的小区里一般有个公共游泳池。7，800的有court house （游泳池
，网球场，GYM）.500一下的基本啥都没有。
，网球场，GYM）.500一下的基本啥都没有。
n*g
28 楼
我这里有个condo,12万左右,但是一个月的HOA就要210。agent都跟我说那个地方别考虑
，买下来也卖不出去。。。
那个condo有电子门禁，不过还是太贵了！
如果大部分都是500左右yearly,那还是比我想象的便宜多了。绝对可以负担啊。
【在 Z*********I 的大作中提到】
: 我们这儿500/y左右的小区里一般有个公共游泳池。7，800的有court house （游泳池
: ，网球场，GYM）.500一下的基本啥都没有。
，买下来也卖不出去。。。
那个condo有电子门禁，不过还是太贵了！
如果大部分都是500左右yearly,那还是比我想象的便宜多了。绝对可以负担啊。
【在 Z*********I 的大作中提到】
: 我们这儿500/y左右的小区里一般有个公共游泳池。7，800的有court house （游泳池
: ，网球场，GYM）.500一下的基本啥都没有。
b*d
29 楼
Condo的HOA肯定比SFH高。
【在 n******g 的大作中提到】
: 去realtor看了一些心仪的房子，但是都没有列出HOA fee。想大概估计一下。
: 是不是condo的hoa fee相对低一些? 大家的都是多少?
: 有些房子看着又便宜又好，但是在realtor上都好久了，是不是HOA fee较高吓退的买家
: 啊。
【在 n******g 的大作中提到】
: 去realtor看了一些心仪的房子，但是都没有列出HOA fee。想大概估计一下。
: 是不是condo的hoa fee相对低一些? 大家的都是多少?
: 有些房子看着又便宜又好，但是在realtor上都好久了，是不是HOA fee较高吓退的买家
: 啊。
i*c
30 楼
我的SFH， 每月60，但是不用交水费。呵呵
I*M
31 楼
Ours is $25/year. Yes, it is per year. :)
n*6
32 楼
我们这里一个20-30年的老房子没有，看过的一个小区啥都没有的只要200，现在买的这
个有泳池600，都是sfh
个有泳池600，都是sfh
O*o
33 楼
realtor.com吗？那里更新不是很块。我觉得redfin.com比较快，几乎和MSL同步（我有
access to MLS). redfin上面HOA是列出来的。没写就是没有。
condo的HOA会高。SFH的HOA depends on小区。越新，越fancy的SFH小区HOA就越高。
【在 n******g 的大作中提到】
: 去realtor看了一些心仪的房子，但是都没有列出HOA fee。想大概估计一下。
: 是不是condo的hoa fee相对低一些? 大家的都是多少?
: 有些房子看着又便宜又好，但是在realtor上都好久了，是不是HOA fee较高吓退的买家
: 啊。
access to MLS). redfin上面HOA是列出来的。没写就是没有。
condo的HOA会高。SFH的HOA depends on小区。越新，越fancy的SFH小区HOA就越高。
【在 n******g 的大作中提到】
: 去realtor看了一些心仪的房子，但是都没有列出HOA fee。想大概估计一下。
: 是不是condo的hoa fee相对低一些? 大家的都是多少?
: 有些房子看着又便宜又好，但是在realtor上都好久了，是不是HOA fee较高吓退的买家
: 啊。
n*g
34 楼
刚看了一眼redfin，没有我的州。。。
【在 O**o 的大作中提到】
: realtor.com吗？那里更新不是很块。我觉得redfin.com比较快，几乎和MSL同步（我有
: access to MLS). redfin上面HOA是列出来的。没写就是没有。
: condo的HOA会高。SFH的HOA depends on小区。越新，越fancy的SFH小区HOA就越高。
【在 O**o 的大作中提到】
: realtor.com吗？那里更新不是很块。我觉得redfin.com比较快，几乎和MSL同步（我有
: access to MLS). redfin上面HOA是列出来的。没写就是没有。
: condo的HOA会高。SFH的HOA depends on小区。越新，越fancy的SFH小区HOA就越高。
k*a
35 楼
210 还贵？ 我们这是便宜的地方， CONDO HOA 极少低于200的。
【在 n******g 的大作中提到】
: 我这里有个condo,12万左右,但是一个月的HOA就要210。agent都跟我说那个地方别考虑
: ，买下来也卖不出去。。。
: 那个condo有电子门禁，不过还是太贵了！
: 如果大部分都是500左右yearly,那还是比我想象的便宜多了。绝对可以负担啊。
【在 n******g 的大作中提到】
: 我这里有个condo,12万左右,但是一个月的HOA就要210。agent都跟我说那个地方别考虑
: ，买下来也卖不出去。。。
: 那个condo有电子门禁，不过还是太贵了！
: 如果大部分都是500左右yearly,那还是比我想象的便宜多了。绝对可以负担啊。
s*i
36 楼
HOA费可以区间很大的，我原本在中西部的好区的房子，一年才$125；现在到佛州，看
过的房子一个月HOA就要一两百的。据说Condo的会更贵。
过的房子一个月HOA就要一两百的。据说Condo的会更贵。
c*r
37 楼
Up here around NYC/NJ, $200/month will be a steal.
【在 s****i 的大作中提到】
: HOA费可以区间很大的，我原本在中西部的好区的房子，一年才$125；现在到佛州，看
: 过的房子一个月HOA就要一两百的。据说Condo的会更贵。
【在 s****i 的大作中提到】
: HOA费可以区间很大的，我原本在中西部的好区的房子，一年才$125；现在到佛州，看
: 过的房子一个月HOA就要一两百的。据说Condo的会更贵。
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