KO小鼠得不到纯合子,求解!# Biology - 生物学
m*8
1 楼
各位大侠好,我去年从KOMP购买了某个基因的targeting vector,让我们的transgenic
core做了knock out小鼠,得到heterozygous小鼠后,鉴定了半年,超过200多个pups
,仍没有纯合子小鼠。该基因是睾丸特异表达的,敲除理论上是不会致死的。更奇怪的
是后代基因型比例也不对,完全不符合孟德尔遗传定律,heterozygous的后代偏多。此
外,我还从体内取了一细胞胚胎,体外发育到囊胚,做了囊胚的genotyping,也得不到
-/-,囊胚之前的胚胎发育很正常。我用了多套引物进行过genetyping,扩出来的片段
,包括野生型和杂合子片段都经过测序验证。我很困惑,请给位大侠多多给小弟提出宝
贵意见,不胜感激。
ps:附件中是我鉴定的电泳图谱,两条带说明是杂合子,只有下面的条带说明是
野生型,只有上面的条带说明是纯合子。 最后一孔为阴性对照。
core做了knock out小鼠,得到heterozygous小鼠后,鉴定了半年,超过200多个pups
,仍没有纯合子小鼠。该基因是睾丸特异表达的,敲除理论上是不会致死的。更奇怪的
是后代基因型比例也不对,完全不符合孟德尔遗传定律,heterozygous的后代偏多。此
外,我还从体内取了一细胞胚胎,体外发育到囊胚,做了囊胚的genotyping,也得不到
-/-,囊胚之前的胚胎发育很正常。我用了多套引物进行过genetyping,扩出来的片段
,包括野生型和杂合子片段都经过测序验证。我很困惑,请给位大侠多多给小弟提出宝
贵意见,不胜感激。
ps:附件中是我鉴定的电泳图谱,两条带说明是杂合子,只有下面的条带说明是
野生型,只有上面的条带说明是纯合子。 最后一孔为阴性对照。