z*n
2 楼
【 以下文字转载自 GunsAndGears 讨论区 】
发信人: jawcn (HKholic), 信区: GunsAndGears
标 题: Re: 参加national guard咋样?
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Aug 10 16:49:33 2011, 美东)
就像我公司里的老头,越战的时候参加了coast guard,以为就在加州guard guard。但
是还是被派去越南。他反驳上司:"i join the coast guard, why you send me to Nam
?!"上司说:"we forgot to tell you which coast you will guard, sorry~~~"
发信人: jawcn (HKholic), 信区: GunsAndGears
标 题: Re: 参加national guard咋样?
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Aug 10 16:49:33 2011, 美东)
就像我公司里的老头,越战的时候参加了coast guard,以为就在加州guard guard。但
是还是被派去越南。他反驳上司:"i join the coast guard, why you send me to Nam
?!"上司说:"we forgot to tell you which coast you will guard, sorry~~~"
s*1
3 楼
计划验证几条human sgRNA,请问用293T 细胞系可以吗?
还是要用正常的细胞
谢谢
还是要用正常的细胞
谢谢
R*a
5 楼
到了越南不去内陆也成啊
Nam
【在 z**n 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 GunsAndGears 讨论区 】
: 发信人: jawcn (HKholic), 信区: GunsAndGears
: 标 题: Re: 参加national guard咋样?
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Aug 10 16:49:33 2011, 美东)
: 就像我公司里的老头,越战的时候参加了coast guard,以为就在加州guard guard。但
: 是还是被派去越南。他反驳上司:"i join the coast guard, why you send me to Nam
: ?!"上司说:"we forgot to tell you which coast you will guard, sorry~~~"
Nam
【在 z**n 的大作中提到】
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: 标 题: Re: 参加national guard咋样?
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Aug 10 16:49:33 2011, 美东)
: 就像我公司里的老头,越战的时候参加了coast guard,以为就在加州guard guard。但
: 是还是被派去越南。他反驳上司:"i join the coast guard, why you send me to Nam
: ?!"上司说:"we forgot to tell you which coast you will guard, sorry~~~"
s*1
6 楼
ding
t*i
7 楼
what ? are you seriously going on that run ?
r*e
8 楼
This is a good one!!
Nam
【在 z**n 的大作中提到】
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: 标 题: Re: 参加national guard咋样?
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Aug 10 16:49:33 2011, 美东)
: 就像我公司里的老头,越战的时候参加了coast guard,以为就在加州guard guard。但
: 是还是被派去越南。他反驳上司:"i join the coast guard, why you send me to Nam
: ?!"上司说:"we forgot to tell you which coast you will guard, sorry~~~"
Nam
【在 z**n 的大作中提到】
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: 标 题: Re: 参加national guard咋样?
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Aug 10 16:49:33 2011, 美东)
: 就像我公司里的老头,越战的时候参加了coast guard,以为就在加州guard guard。但
: 是还是被派去越南。他反驳上司:"i join the coast guard, why you send me to Nam
: ?!"上司说:"we forgot to tell you which coast you will guard, sorry~~~"
m*D
9 楼
我设计的时候没验证,主要是赶时间。
验证么,就是找一个transfection效率比较高的细胞,这个293显然合适。如果你的细
胞有很高的transfection efficiency,应该更好。理由是不同的细胞系之间会有SNP,
如果运气不好,正好在你的guide sequence之内,那在293验证的结果可能就不完全反
应你的细胞系的效率。
上面是我的理解。这里CRISPR expert多,清指正。我一般设计好guide sequence后,
会PCR一小段我准备用的细胞的genomic cDNA,测序保证没有SNP.上次测了一个2。5KB
片断,有三个SNP,但都不在我的guide sequences之内。
【在 s*******1 的大作中提到】
: 计划验证几条human sgRNA,请问用293T 细胞系可以吗?
: 还是要用正常的细胞
: 谢谢
验证么,就是找一个transfection效率比较高的细胞,这个293显然合适。如果你的细
胞有很高的transfection efficiency,应该更好。理由是不同的细胞系之间会有SNP,
如果运气不好,正好在你的guide sequence之内,那在293验证的结果可能就不完全反
应你的细胞系的效率。
上面是我的理解。这里CRISPR expert多,清指正。我一般设计好guide sequence后,
会PCR一小段我准备用的细胞的genomic cDNA,测序保证没有SNP.上次测了一个2。5KB
片断,有三个SNP,但都不在我的guide sequences之内。
【在 s*******1 的大作中提到】
: 计划验证几条human sgRNA,请问用293T 细胞系可以吗?
: 还是要用正常的细胞
: 谢谢
c*m
13 楼
should be able to buy online now. get those one-day pass will be good. $13.
40. I am not sure if the annual one needs the ocean enhance stamp, I guess
it's required.
40. I am not sure if the annual one needs the ocean enhance stamp, I guess
it's required.
s*1
14 楼
在大规模实验前,sgRNA能否抑制target Gene应该要确认下吧。
5KB
【在 m*********D 的大作中提到】
: 我设计的时候没验证,主要是赶时间。
: 验证么,就是找一个transfection效率比较高的细胞,这个293显然合适。如果你的细
: 胞有很高的transfection efficiency,应该更好。理由是不同的细胞系之间会有SNP,
: 如果运气不好,正好在你的guide sequence之内,那在293验证的结果可能就不完全反
: 应你的细胞系的效率。
: 上面是我的理解。这里CRISPR expert多,清指正。我一般设计好guide sequence后,
: 会PCR一小段我准备用的细胞的genomic cDNA,测序保证没有SNP.上次测了一个2。5KB
: 片断,有三个SNP,但都不在我的guide sequences之内。
5KB
【在 m*********D 的大作中提到】
: 我设计的时候没验证,主要是赶时间。
: 验证么,就是找一个transfection效率比较高的细胞,这个293显然合适。如果你的细
: 胞有很高的transfection efficiency,应该更好。理由是不同的细胞系之间会有SNP,
: 如果运气不好,正好在你的guide sequence之内,那在293验证的结果可能就不完全反
: 应你的细胞系的效率。
: 上面是我的理解。这里CRISPR expert多,清指正。我一般设计好guide sequence后,
: 会PCR一小段我准备用的细胞的genomic cDNA,测序保证没有SNP.上次测了一个2。5KB
: 片断,有三个SNP,但都不在我的guide sequences之内。
r*t
18 楼
有个高人给我一个 link:
https://www.calicensetofish.com/
【在 s**c 的大作中提到】
: Walmart,Big 5这些有卖吗?
: 是不是一般的就行了,有没有特殊要求?
: 3x
https://www.calicensetofish.com/
【在 s**c 的大作中提到】
: Walmart,Big 5这些有卖吗?
: 是不是一般的就行了,有没有特殊要求?
: 3x
m*n
21 楼
问一下哪里有抓银鱼?
D*n
22 楼
都没人管的,不用证了。我之前去就是小猫两三只
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