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急！求助蛋白提取的问题！
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急！求助蛋白提取的问题！# Biology - 生物学
H*3
1 楼
研究对象是原核生物cyanobacteria，通过标记一个蛋白GFP，看细胞内定位改变。野生
型里，破碎细胞后15000g离心GFP蛋白在上清。突变一个基因后，GFP蛋白定位变了，可
是破碎细胞后即使300g离心，GFP蛋白也在pellet里。现在需要做SDS和native gel分析
GFP蛋白的表达量和大聚合体分子量。可是问题是，如果做total protein loading不离
心，完全跑不进去空。我怀疑，这个基因突变以后，细胞代谢紊乱，产生了很多不知道
什么东西（多糖？），导致GFP蛋白被包裹，一般的detergent，boiling都除不掉。不
知道大家有没有建议？怎么除多糖？或starch？如果跟cytoskeleton结合紧密，怎么除
比较好？多谢
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n*w
2 楼
在inclusion body里吧，你从网上找找如何从inclusion body里提纯蛋白，有很多
protocols。
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H*3
3 楼
应该不是。从GFP体内的信号分布可以看出来不是。

【在 n***w 的大作中提到】
: 在inclusion body里吧，你从网上找找如何从inclusion body里提纯蛋白，有很多
: protocols。
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