g*n
2 楼
我的目标蛋白在C-term加了两个tag，其中的myc-tag放在倒数第二个，最后一个tag有
45个氨基酸，有的人说myc-tag必须在两端才能被识别，请问我这种情况做WB的话能被
抗体识别吗（比如9E10）?
谢谢！
45个氨基酸，有的人说myc-tag必须在两端才能被识别，请问我这种情况做WB的话能被
抗体识别吗（比如9E10）?
谢谢！
o*1
3 楼
wow, the 1st, who is she ?
【在 k**n 的大作中提到】
: 图两幅
【在 k**n 的大作中提到】
: 图两幅
m*o
4 楼
“有的人说myc-tag必须在两端才能被识别”
这个有实验根据？
楼主可以亲自试一下，然后来给大家汇报以下
这个有实验根据？
楼主可以亲自试一下，然后来给大家汇报以下
m*d
5 楼
http://nabshots.blogspot.com/2011/11/li-ying-zhi.html
【在 o******1 的大作中提到】
: wow, the 1st, who is she ?
【在 o******1 的大作中提到】
: wow, the 1st, who is she ?
m*u
6 楼
你们问这种问题，真是学生物的？
w*n
7 楼
像假的的。。。。
m*u
8 楼
只要能暴露在表面，为什么不能被抗体识别？融合蛋白放在头上（两端），蛋白本身能
折叠成自身结构，那么tag就很可能会被暴露在外表。但这也不是一定的，tag影响蛋白
折叠，融合蛋白不能自然折叠，没有活性，tag不能被抗体识别也有报道。
最后，tag放在目的蛋白内部的例子也有，而且还能保留蛋白自身活性。这种成功例子
不能保证你的蛋白能够成功。
我这里回答，是觉得你这个问题问得不对。
折叠成自身结构，那么tag就很可能会被暴露在外表。但这也不是一定的，tag影响蛋白
折叠，融合蛋白不能自然折叠，没有活性，tag不能被抗体识别也有报道。
最后，tag放在目的蛋白内部的例子也有，而且还能保留蛋白自身活性。这种成功例子
不能保证你的蛋白能够成功。
我这里回答，是觉得你这个问题问得不对。
b*e
9 楼
doable yah
【在 m**d 的大作中提到】
: http://nabshots.blogspot.com/2011/11/li-ying-zhi.html
【在 m**d 的大作中提到】
: http://nabshots.blogspot.com/2011/11/li-ying-zhi.html
N*e
10 楼
myc-tag放在中间可以被识别。
前提是你对你的蛋白质上的domain和功能有很好的了解。不要插在其中，myc-tag尽量
能够暴露在外。
放在两端也可能会破坏蛋白质功能，比如N端信号肽。又比如KASH protein，myc放在C
端一定不行。
最简单的是BLAST一下，看看那个地方不保守就放哪里。
前提是你对你的蛋白质上的domain和功能有很好的了解。不要插在其中，myc-tag尽量
能够暴露在外。
放在两端也可能会破坏蛋白质功能，比如N端信号肽。又比如KASH protein，myc放在C
端一定不行。
最简单的是BLAST一下，看看那个地方不保守就放哪里。
H*7
11 楼
horrible voice
【在 m**d 的大作中提到】
: http://nabshots.blogspot.com/2011/11/li-ying-zhi.html
【在 m**d 的大作中提到】
: http://nabshots.blogspot.com/2011/11/li-ying-zhi.html
g*n
12 楼
谢谢大家的回复
H*7
13 楼
又是拉长的
【在 k**n 的大作中提到】
: 图两幅
【在 k**n 的大作中提到】
: 图两幅
j*n
14 楼
他是western，不存在表面不表面的问题，早都变性、暴露了
【在 m******u 的大作中提到】
: 只要能暴露在表面，为什么不能被抗体识别？融合蛋白放在头上（两端），蛋白本身能
: 折叠成自身结构，那么tag就很可能会被暴露在外表。但这也不是一定的，tag影响蛋白
: 折叠，融合蛋白不能自然折叠，没有活性，tag不能被抗体识别也有报道。
: 最后，tag放在目的蛋白内部的例子也有，而且还能保留蛋白自身活性。这种成功例子
: 不能保证你的蛋白能够成功。
: 我这里回答，是觉得你这个问题问得不对。
【在 m******u 的大作中提到】
: 只要能暴露在表面，为什么不能被抗体识别？融合蛋白放在头上（两端），蛋白本身能
: 折叠成自身结构，那么tag就很可能会被暴露在外表。但这也不是一定的，tag影响蛋白
: 折叠，融合蛋白不能自然折叠，没有活性，tag不能被抗体识别也有报道。
: 最后，tag放在目的蛋白内部的例子也有，而且还能保留蛋白自身活性。这种成功例子
: 不能保证你的蛋白能够成功。
: 我这里回答，是觉得你这个问题问得不对。
p*g
15 楼
呵呵
【在 w**********n 的大作中提到】
: 像假的的。。。。
【在 w**********n 的大作中提到】
: 像假的的。。。。
r*e
16 楼
女的想上playboy,男的想上times?
【在 k**n 的大作中提到】
: 图两幅
【在 k**n 的大作中提到】
: 图两幅
s*h
17 楼
跳的一般，无力，不够诱惑。
【在 m**d 的大作中提到】
: http://nabshots.blogspot.com/2011/11/li-ying-zhi.html
【在 m**d 的大作中提到】
: http://nabshots.blogspot.com/2011/11/li-ying-zhi.html
J*n
18 楼
一个是天生丽质，一个是天生励志。
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