转染效率上不去？看文答题赢大礼

2023-03-31 09:03

转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。《分子克隆实验指南》将转染（Transfection）定义为：“将外源基因导入哺乳动物细胞的一系列技术的统称”，实践中细胞转染是指将外源分子如DNA、RNA、蛋白等生物活性分子导入真核细胞的技术。

（本图内容经龙沙参考相关文献资料整理）

按照原理来分类

细胞转染的方式可以分为3类：化学法、物理法和生物介导方法。电转染作为具有代表性的物理方法转染，出现于1982年，作为通用、易用的细胞转染方法，具有其他方法无法比拟的优势，如重复性好、适用范围广等特点，在一定条件下兼得电转效率和细胞活率，尤其对目前对原代细胞和一般认为难转染的细胞有较好的转染效率。

▲ 各转染方法优缺点整理，参考文献：Kim, T.K., Eberwine, J.H. Mammalian cell transfection: the present and the future. Anal Bioanal Chem 397, 3173–3178 (2010). https://doi.org/10.1007/s00216-010-3821-6IF: 4.478 Q2 B2

1998年，Nucleofector™技术由Amaxa公司开发（该公司于2008年被Lonza收购），并于2001年成为广大科研人员可以使用的技术（Nucleofector™ I/II/IIb）。该技术基于电脉冲在细胞膜上瞬间产生小孔，综合Lonza独创的转染体系（即细微差别的电脉冲条件和细胞特异性试剂的组合），使核酸底物可以直接进入细胞核，让细胞的最高转染效率可以达到99%，细胞转染不依赖于细胞的增殖分裂。随后，Lonza在2010年推出新一代电转染系列4D Nucleofector™，并且在2021年推出第二代4D Nucleofector™核转染平台。

随着系统生物学与交叉学科方法的应用，要求细胞和系统模型越来越接近体内细胞的功能。Nucleofector™技术就是为了尝试从根本上解决细胞转染效率与成活率问题，无论是原代细胞（干细胞、神经细胞、免疫细胞等），还是细胞系，每次都可重复出很高的转染效率。最近在Google Scholar用“Nucleofector”来检索，已经有37,000+篇文献提及Nucleofector™技术。检索Nucleofector+“CRISPR”，一共有7,200+篇。化学顶级综述杂志Chemical Reviews文章对Nucleofection™技术的评价是：“Nucleofection™技术是有史以来最流行的电转系统之一，于21世纪初问世，作为一种有效的细胞内递送方法迅速获得普及”。

Lonza 4D Nucleofector™平台从实际需求出发，开发了从低通量到高通量，小体积到大体积的电转染，研发到生产规模的设备型号，保证从小体系筛选到大规模电转的可行性和放大工艺可转移。包括如下功能模块并匹配对应应用方向。

Nucleofection™ 核转--5步简单的操作方案，实现轻松电转

4D-Nucleofector™ 核转系统，除了电转仪设备之外，还配套不同细胞专属的电转试剂，可以实现高效、同时维持细胞功能的转染结果。该系统改进了传统金属电极材质的电极杯，通过专利高分子导电聚合物稳定电脉冲发生的过程，避免金属离子释放对细胞带来的毒性。在Lonza Bioscience官网Knowledge Center里面呈现了超过650种即用型protocol（包括细胞培养、传代、电转准备、电转方案、孵育方法以及优化方案）及海量的资料和应用FAQ（且一直在实际各地技术团队的协作下不断更新）。让大家在电转系统的使用中轻松上手，实验操作无忧。

目前Nucleofector™技术可广泛应用在基于各种不同的基因编辑技术(ZFN/TALEN/CRISPR/ABE/ PE等)以对各类细胞进行基因改造/修正^[1-9]、疾病靶点筛选^[10-11]、诱导多功能干细胞^[12-13]、蛋白表达^[14-15]、DC疫苗^[16]、外泌体研究^[17]、寄生虫转染研究^[18]、类器官研究^[19]、细菌转化^[20]等领域。

看到这，你是否对Nucleofector™技术有了一定的兴趣和想要进一步了解？不如赶紧来测试一下你的掌握程度吧！3月29日-4月14日，参与Lonza细胞转染知识竞赛，最先全部答对的100名用户将获得Lonza定制保温杯，活动结束后还将额外抽取200名参与者获得Lonza定制马卡龙套装笔！

除此之外，已经是Lonza Nucleofector™使用者的你，还可参与“与你的仪器合影”与“免费领取电转百科指南”活动，好礼多多，全年精彩不停！

[参考文献]

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来源: qq

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