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Re: expression of actin in E.coli?
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Re: expression of actin in E.coli?# Biology - 生物学
m*e
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我觉得有一下几个原因不用E。COLI
1。 一般的E。COLI细菌用的CODON PREFERENCE可能与MAMALIAN CELL不同,所以你用普通
的BL21的话可能蛋白根本不表达,但是这点可以克服,你可以用那种加入了RARE CODON的
CELL LINE,比如ROSETTA GEMI系列。
2。有一些MAMALIAN PROTEIN是需要表达后修饰才有活性的,而E。COLI可能无法提供这种
环境。
3。但是也有很多人用E。COLI表达真和生物蛋白,有时也能成功,但YEAST其实是一种挺
好的表达环境,比在FLY,或者作细胞培养方便多了。
所以建议你试一下用E。COLI,不行的话想办法提高YEAST中的产量。至少我知道不同培养
液对E。COLI表达量影响很大,可能你也可以换其他培养夜养YEAST。
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