c*r
2 楼
☆─────────────────────────────────────☆
seahouse (NuNu) 于 (Mon Nov 14 19:47:40 2011, 美东) 提到:
USCIS 花了三个月，终于查到绿卡寄到老地址。可是，已没有可能找到了。被告知要再
等六个月寄新卡。可是我急用，请问有没有相似经历的朋友，给些建议。多谢！！
☆─────────────────────────────────────☆
iq350 (iq350) 于 (Mon Nov 14 19:51:23 2011, 美东) 提到:
去local uscis 打一个章子
☆─────────────────────────────────────☆
babytous (nono) 于 (Mon Nov 14 19:53:30 2011, 美东) 提到:
Do an Infopass and get the I-551 Temporary Stamp on your passport which is
equivalent to an actural green card
☆─────────────────────────────────────☆
seahouse (NuNu) 于 (Mon Nov 14 20:32:30 2011, 美东) 提到:
多谢回复。
请问能讲的细一些，如何Do an Infopass and get the I-551 Temporary Stamp？
☆─────────────────────────────────────☆
babytous (nono) 于 (Mon Nov 14 22:58:21 2011, 美东) 提到:
go to uscis website to schedule an Infopass. Bring your passport and the 485
approval notice with you. You can get the stamp immediately on your
infopass day.
☆─────────────────────────────────────☆
seahouse (NuNu) 于 (Tue Nov 15 08:49:51 2011, 美东) 提到:
Many Thanks.
seahouse (NuNu) 于 (Mon Nov 14 19:47:40 2011, 美东) 提到:
USCIS 花了三个月，终于查到绿卡寄到老地址。可是，已没有可能找到了。被告知要再
等六个月寄新卡。可是我急用，请问有没有相似经历的朋友，给些建议。多谢！！
☆─────────────────────────────────────☆
iq350 (iq350) 于 (Mon Nov 14 19:51:23 2011, 美东) 提到:
去local uscis 打一个章子
☆─────────────────────────────────────☆
babytous (nono) 于 (Mon Nov 14 19:53:30 2011, 美东) 提到:
Do an Infopass and get the I-551 Temporary Stamp on your passport which is
equivalent to an actural green card
☆─────────────────────────────────────☆
seahouse (NuNu) 于 (Mon Nov 14 20:32:30 2011, 美东) 提到:
多谢回复。
请问能讲的细一些，如何Do an Infopass and get the I-551 Temporary Stamp？
☆─────────────────────────────────────☆
babytous (nono) 于 (Mon Nov 14 22:58:21 2011, 美东) 提到:
go to uscis website to schedule an Infopass. Bring your passport and the 485
approval notice with you. You can get the stamp immediately on your
infopass day.
☆─────────────────────────────────────☆
seahouse (NuNu) 于 (Tue Nov 15 08:49:51 2011, 美东) 提到:
Many Thanks.
s*h
3 楼
大概90年代的美国片子。
在一个类似兵营的地方，人们一个一个的消失，或者变得举止异常。直到主人公的父母
也变了，才明白是异形控制了这个地方。后来主人公保护着自己心爱的人开着飞机离开
了，但是降落机场的跑道人员，也出现了异形的举止……
这个异形是像蚯蚓、或者面条似的，沾到谁谁就变成异形，永远回不来了。
在一个类似兵营的地方，人们一个一个的消失，或者变得举止异常。直到主人公的父母
也变了，才明白是异形控制了这个地方。后来主人公保护着自己心爱的人开着飞机离开
了，但是降落机场的跑道人员，也出现了异形的举止……
这个异形是像蚯蚓、或者面条似的，沾到谁谁就变成异形，永远回不来了。
d*0
4 楼
我看到一篇文献，有几个转基因小鼠出现在文章中，该基因为A
1) A +/GFP
2) A GFP/-
3) A GFP/RA
4) A +/-
请问：
1）上述4个动物分别代表什么意思?
2）A-EGFP BAC转基因的小鼠，请问此类小鼠与一般的A-EGFP转基因小鼠，有何区别？
1) A +/GFP
2) A GFP/-
3) A GFP/RA
4) A +/-
请问：
1）上述4个动物分别代表什么意思?
2）A-EGFP BAC转基因的小鼠，请问此类小鼠与一般的A-EGFP转基因小鼠，有何区别？
d*g
5 楼
no
【在 n***e 的大作中提到】
: thanks
【在 n***e 的大作中提到】
: thanks
r*z
6 楼
文献的命名不规范。
BAC转基因的小鼠由于片断长，理论上表达忠实性高
？
【在 d********0 的大作中提到】
: 我看到一篇文献，有几个转基因小鼠出现在文章中，该基因为A
: 1) A +/GFP
: 2) A GFP/-
: 3) A GFP/RA
: 4) A +/-
: 请问：
: 1）上述4个动物分别代表什么意思?
: 2）A-EGFP BAC转基因的小鼠，请问此类小鼠与一般的A-EGFP转基因小鼠，有何区别？
BAC转基因的小鼠由于片断长，理论上表达忠实性高
？
【在 d********0 的大作中提到】
: 我看到一篇文献，有几个转基因小鼠出现在文章中，该基因为A
: 1) A +/GFP
: 2) A GFP/-
: 3) A GFP/RA
: 4) A +/-
: 请问：
: 1）上述4个动物分别代表什么意思?
: 2）A-EGFP BAC转基因的小鼠，请问此类小鼠与一般的A-EGFP转基因小鼠，有何区别？
n*e
7 楼
thank you
【在 d*********g 的大作中提到】
: no
【在 d*********g 的大作中提到】
: no
d*0
8 楼
谢谢楼上的，可否多解析一下？
A*L
9 楼
真有创造力
【在 n***e 的大作中提到】
: thanks
【在 n***e 的大作中提到】
: thanks
j*g
10 楼
一个基因的正确表达要靠很多regulatory elements，其中很多我们都不知道在哪里，
可能距离基因本身差了十万八千里。而BAC的好处就在于大片段，可能覆盖尽量多的
elements而取得正确的表达。但是事实上有个很大的BAC的database就是我们老板做的
，每个基因也要做很多条mouse line来比较看哪一个最靠谱。
但是也有缺点，片断越大带进的杂物就越多，谁也不知道会不会有不好的影响。
另外因为片断大，可能更容易丢失吧，我听到不只一个人说过会越传越弱，但是在我手
上不明显。
【在 d********0 的大作中提到】
: 谢谢楼上的，可否多解析一下？
可能距离基因本身差了十万八千里。而BAC的好处就在于大片段，可能覆盖尽量多的
elements而取得正确的表达。但是事实上有个很大的BAC的database就是我们老板做的
，每个基因也要做很多条mouse line来比较看哪一个最靠谱。
但是也有缺点，片断越大带进的杂物就越多，谁也不知道会不会有不好的影响。
另外因为片断大，可能更容易丢失吧，我听到不只一个人说过会越传越弱，但是在我手
上不明显。
【在 d********0 的大作中提到】
: 谢谢楼上的，可否多解析一下？
D*a
11 楼
啊？在基因组里还会越来越弱？
【在 j****g 的大作中提到】
: 一个基因的正确表达要靠很多regulatory elements，其中很多我们都不知道在哪里，
: 可能距离基因本身差了十万八千里。而BAC的好处就在于大片段，可能覆盖尽量多的
: elements而取得正确的表达。但是事实上有个很大的BAC的database就是我们老板做的
: ，每个基因也要做很多条mouse line来比较看哪一个最靠谱。
: 但是也有缺点，片断越大带进的杂物就越多，谁也不知道会不会有不好的影响。
: 另外因为片断大，可能更容易丢失吧，我听到不只一个人说过会越传越弱，但是在我手
: 上不明显。
【在 j****g 的大作中提到】
: 一个基因的正确表达要靠很多regulatory elements，其中很多我们都不知道在哪里，
: 可能距离基因本身差了十万八千里。而BAC的好处就在于大片段，可能覆盖尽量多的
: elements而取得正确的表达。但是事实上有个很大的BAC的database就是我们老板做的
: ，每个基因也要做很多条mouse line来比较看哪一个最靠谱。
: 但是也有缺点，片断越大带进的杂物就越多，谁也不知道会不会有不好的影响。
: 另外因为片断大，可能更容易丢失吧，我听到不只一个人说过会越传越弱，但是在我手
: 上不明显。
j*g
12 楼
因为进了genome的片断会丢失吧，我猜。一般来说不会只进去一个copy number,多的话
可以达到十几个，但是当然蛋白不一定会有十几倍了。
那个database是用GFP做reporter，直接看到的就是GFP signal越来越弱。我不知道是
不是有人用southern confirm copy number过。
但是只是听说过，不知道会发生的可能性有多大。
【在 D*a 的大作中提到】
: 啊？在基因组里还会越来越弱？
可以达到十几个，但是当然蛋白不一定会有十几倍了。
那个database是用GFP做reporter，直接看到的就是GFP signal越来越弱。我不知道是
不是有人用southern confirm copy number过。
但是只是听说过，不知道会发生的可能性有多大。
【在 D*a 的大作中提到】
: 啊？在基因组里还会越来越弱？
j*g
13 楼
托楼主的福银元进账，谢谢斑竹。
s*s
14 楼
会不会是epigenetically repress了
【在 j****g 的大作中提到】
: 因为进了genome的片断会丢失吧，我猜。一般来说不会只进去一个copy number,多的话
: 可以达到十几个，但是当然蛋白不一定会有十几倍了。
: 那个database是用GFP做reporter，直接看到的就是GFP signal越来越弱。我不知道是
: 不是有人用southern confirm copy number过。
: 但是只是听说过，不知道会发生的可能性有多大。
【在 j****g 的大作中提到】
: 因为进了genome的片断会丢失吧，我猜。一般来说不会只进去一个copy number,多的话
: 可以达到十几个，但是当然蛋白不一定会有十几倍了。
: 那个database是用GFP做reporter，直接看到的就是GFP signal越来越弱。我不知道是
: 不是有人用southern confirm copy number过。
: 但是只是听说过，不知道会发生的可能性有多大。
D*a
15 楼
听老板说过一个很悲催的案例
千辛万苦做了一个flox的老鼠，测序什么的都没问题，跟cre交配，死活不KO，折腾了
好半天，终于发现loxP被甲基化了。。。。。。
【在 s******s 的大作中提到】
: 会不会是epigenetically repress了
千辛万苦做了一个flox的老鼠，测序什么的都没问题，跟cre交配，死活不KO，折腾了
好半天，终于发现loxP被甲基化了。。。。。。
【在 s******s 的大作中提到】
: 会不会是epigenetically repress了
r*z
16 楼
怎么确定loxP被甲基化了，这个几率太小了吧。
最可能是loxP太远，或cre效率太低吧
【在 D*a 的大作中提到】
: 听老板说过一个很悲催的案例
: 千辛万苦做了一个flox的老鼠，测序什么的都没问题，跟cre交配，死活不KO，折腾了
: 好半天，终于发现loxP被甲基化了。。。。。。
最可能是loxP太远，或cre效率太低吧
【在 D*a 的大作中提到】
: 听老板说过一个很悲催的案例
: 千辛万苦做了一个flox的老鼠，测序什么的都没问题，跟cre交配，死活不KO，折腾了
: 好半天，终于发现loxP被甲基化了。。。。。。
r*z
17 楼
多点多拷贝容易传丢，单点多拷贝不会丢吧。
【在 j****g 的大作中提到】
: 因为进了genome的片断会丢失吧，我猜。一般来说不会只进去一个copy number,多的话
: 可以达到十几个，但是当然蛋白不一定会有十几倍了。
: 那个database是用GFP做reporter，直接看到的就是GFP signal越来越弱。我不知道是
: 不是有人用southern confirm copy number过。
: 但是只是听说过，不知道会发生的可能性有多大。
【在 j****g 的大作中提到】
: 因为进了genome的片断会丢失吧，我猜。一般来说不会只进去一个copy number,多的话
: 可以达到十几个，但是当然蛋白不一定会有十几倍了。
: 那个database是用GFP做reporter，直接看到的就是GFP signal越来越弱。我不知道是
: 不是有人用southern confirm copy number过。
: 但是只是听说过，不知道会发生的可能性有多大。
o*4
18 楼
还有这种事啊，第一次听说
【在 D*a 的大作中提到】
: 听老板说过一个很悲催的案例
: 千辛万苦做了一个flox的老鼠，测序什么的都没问题，跟cre交配，死活不KO，折腾了
: 好半天，终于发现loxP被甲基化了。。。。。。
【在 D*a 的大作中提到】
: 听老板说过一个很悲催的案例
: 千辛万苦做了一个flox的老鼠，测序什么的都没问题，跟cre交配，死活不KO，折腾了
: 好半天，终于发现loxP被甲基化了。。。。。。
r*z
19 楼
试着说一下，不一定对
+/GFP：野生型/GFP-KI（KO）
GFP/-：不规范，理论上是 GFP-KI（KO）/KO
GFP/RA 不明白RA 是什么？
转基因的ＧＦＰ应该标为Tg(GFP)或Ts(GFP)
【在 d********0 的大作中提到】
: 谢谢楼上的，可否多解析一下？
+/GFP：野生型/GFP-KI（KO）
GFP/-：不规范，理论上是 GFP-KI（KO）/KO
GFP/RA 不明白RA 是什么？
转基因的ＧＦＰ应该标为Tg(GFP)或Ts(GFP)
【在 d********0 的大作中提到】
: 谢谢楼上的，可否多解析一下？
D*a
20 楼
不知道，可能我描述也不准确，总之就是被modifier了，但不是从dna序列上。。。
【在 r**z 的大作中提到】
: 怎么确定loxP被甲基化了，这个几率太小了吧。
: 最可能是loxP太远，或cre效率太低吧
【在 r**z 的大作中提到】
: 怎么确定loxP被甲基化了，这个几率太小了吧。
: 最可能是loxP太远，或cre效率太低吧
D*a
21 楼
对了，我说的那个好像是传了几代突然就不KO了。。。然后就悲催了。。。
o*4
22 楼
还不是DNA序列上的，
太耸人听闻了
【在 D*a 的大作中提到】
: 不知道，可能我描述也不准确，总之就是被modifier了，但不是从dna序列上。。。
太耸人听闻了
【在 D*a 的大作中提到】
: 不知道，可能我描述也不准确，总之就是被modifier了，但不是从dna序列上。。。
O*e
23 楼
按说这个DNA methylation应该是可逆的吧，说不定再传几代，LoxP sites又给
复原了，呵呵
【在 D*a 的大作中提到】
: 对了，我说的那个好像是传了几代突然就不KO了。。。然后就悲催了。。。
复原了，呵呵
【在 D*a 的大作中提到】
: 对了，我说的那个好像是传了几代突然就不KO了。。。然后就悲催了。。。
s*s
24 楼
我说这个就是因为听人提起来好像有篇文章说是转gfp进去，然后发现细胞
对GFP无爱，加了很多methylation上去，直接抑制表达了
【在 D*a 的大作中提到】
: 听老板说过一个很悲催的案例
: 千辛万苦做了一个flox的老鼠，测序什么的都没问题，跟cre交配，死活不KO，折腾了
: 好半天，终于发现loxP被甲基化了。。。。。。
对GFP无爱，加了很多methylation上去，直接抑制表达了
【在 D*a 的大作中提到】
: 听老板说过一个很悲催的案例
: 千辛万苦做了一个flox的老鼠，测序什么的都没问题，跟cre交配，死活不KO，折腾了
: 好半天，终于发现loxP被甲基化了。。。。。。
c*l
25 楼
是说GENESAT吧，看来是Nathaniel Heintz的弟子啊，NB
【在 j****g 的大作中提到】
: 因为进了genome的片断会丢失吧，我猜。一般来说不会只进去一个copy number,多的话
: 可以达到十几个，但是当然蛋白不一定会有十几倍了。
: 那个database是用GFP做reporter，直接看到的就是GFP signal越来越弱。我不知道是
: 不是有人用southern confirm copy number过。
: 但是只是听说过，不知道会发生的可能性有多大。
【在 j****g 的大作中提到】
: 因为进了genome的片断会丢失吧，我猜。一般来说不会只进去一个copy number,多的话
: 可以达到十几个，但是当然蛋白不一定会有十几倍了。
: 那个database是用GFP做reporter，直接看到的就是GFP signal越来越弱。我不知道是
: 不是有人用southern confirm copy number过。
: 但是只是听说过，不知道会发生的可能性有多大。
Z*g
26 楼
LoxP sites的methylation很可能是组织特异的吧,就是有些组织能被cre knockout掉,
而有些不能?
【在 O******e 的大作中提到】
: 按说这个DNA methylation应该是可逆的吧，说不定再传几代，LoxP sites又给
: 复原了，呵呵
而有些不能?
【在 O******e 的大作中提到】
: 按说这个DNA methylation应该是可逆的吧，说不定再传几代，LoxP sites又给
: 复原了，呵呵
b*r
27 楼
反了吧，是cre被甲基化了吧
loxp那么小的东西，有CpG island吗，能被甲基化吗？就是有几个C被甲基化了也没啥
大不了的
吧，难道就不能被切出来了？
cre这种大片段带promoter的东西被silent我倒是一点都不奇怪，其实基因组里大部分
东西都是有
潜在被表达的能力的，只是大部分被somehow抑制了而已
【在 D*a 的大作中提到】
: 听老板说过一个很悲催的案例
: 千辛万苦做了一个flox的老鼠，测序什么的都没问题，跟cre交配，死活不KO，折腾了
: 好半天，终于发现loxP被甲基化了。。。。。。
loxp那么小的东西，有CpG island吗，能被甲基化吗？就是有几个C被甲基化了也没啥
大不了的
吧，难道就不能被切出来了？
cre这种大片段带promoter的东西被silent我倒是一点都不奇怪，其实基因组里大部分
东西都是有
潜在被表达的能力的，只是大部分被somehow抑制了而已
【在 D*a 的大作中提到】
: 听老板说过一个很悲催的案例
: 千辛万苦做了一个flox的老鼠，测序什么的都没问题，跟cre交配，死活不KO，折腾了
: 好半天，终于发现loxP被甲基化了。。。。。。
O*e
28 楼
要是cre被甲基化，就不是问题了吧
换个cre line就得了
【在 b****r 的大作中提到】
: 反了吧，是cre被甲基化了吧
: loxp那么小的东西，有CpG island吗，能被甲基化吗？就是有几个C被甲基化了也没啥
: 大不了的
: 吧，难道就不能被切出来了？
: cre这种大片段带promoter的东西被silent我倒是一点都不奇怪，其实基因组里大部分
: 东西都是有
: 潜在被表达的能力的，只是大部分被somehow抑制了而已
换个cre line就得了
【在 b****r 的大作中提到】
: 反了吧，是cre被甲基化了吧
: loxp那么小的东西，有CpG island吗，能被甲基化吗？就是有几个C被甲基化了也没啥
: 大不了的
: 吧，难道就不能被切出来了？
: cre这种大片段带promoter的东西被silent我倒是一点都不奇怪，其实基因组里大部分
: 东西都是有
: 潜在被表达的能力的，只是大部分被somehow抑制了而已
D*a
29 楼
也许他插入的那里本来就是个甲基化位点也说不定，也不是我的老鼠，我就当听故事，
谁还深究啊
cre一般都有reporter gene，像lacz什么的验证的吧。cre管用不管用应该还是比较好
分别
【在 O******e 的大作中提到】
: 要是cre被甲基化，就不是问题了吧
: 换个cre line就得了
谁还深究啊
cre一般都有reporter gene，像lacz什么的验证的吧。cre管用不管用应该还是比较好
分别
【在 O******e 的大作中提到】
: 要是cre被甲基化，就不是问题了吧
: 换个cre line就得了
y*o
30 楼
是不是cre和你的gene of interest在同一个chromosome上？
【在 D*a 的大作中提到】
: 也许他插入的那里本来就是个甲基化位点也说不定，也不是我的老鼠，我就当听故事，
: 谁还深究啊
: cre一般都有reporter gene，像lacz什么的验证的吧。cre管用不管用应该还是比较好
: 分别
【在 D*a 的大作中提到】
: 也许他插入的那里本来就是个甲基化位点也说不定，也不是我的老鼠，我就当听故事，
: 谁还深究啊
: cre一般都有reporter gene，像lacz什么的验证的吧。cre管用不管用应该还是比较好
: 分别
d*0
31 楼
不错
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