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寻大牛,细胞大规模培养相关
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寻大牛,细胞大规模培养相关# Biology - 生物学
b*y
1
是否有any level or high level clearance
yes or no?
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j*n
3
实验室想今后大规模的用哺乳动物细胞表达一些蛋白,因此让我寻找哺乳动物细胞发酵
罐的资料。本人对细胞大规模培养一窍不通,看了很多文献,发现太专业,太细致了,
很难理得出头绪。请问版上哪位大牛对此比较熟悉,能否提点一下?
主要问题是:
哪个公司的发酵罐性价比最好?至少能达到10L吧
扩培的时候使用几毫升细胞开始进入发酵罐?以CHO细胞为例。
培养基有没有特殊要求?还是用一般的培养基就行?
灭菌如何保证?
多谢多谢!!
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a*a
4
k不掉,fx8350勉强可以
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j*n
5
……好冷清
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n*r
6
如果只用于并行计算,不考虑桌面应用游戏什么的,比i5稍强
综合来说i5强
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b*o
7
试试搜索 wavebag
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d*0
8
3570K据说可以K掉AMD所有8核
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h*0
9
你这个要找工业界的人问问了。
发酵罐培养的话如果对产出的质量要求不高(非临床应用),难度不大;如果是临床用
的话,要按照cGMP的要求,而且当中的水很深。
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m*p
11
大家不是不回答你,是你问的问题,没法回答。可以写本书的。
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b*n
12
我打的游戏都是大叔级的,比如星际,是个电脑就成。

【在 n******r 的大作中提到】
: 如果只用于并行计算,不考虑桌面应用游戏什么的,比i5稍强
: 综合来说i5强

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s*y
13
专业的发酵罐非常贵,一般实验室是买不起的。
我的建议是用Hela cell悬浮培养。对培养基要求不严。

【在 j*******n 的大作中提到】
: 实验室想今后大规模的用哺乳动物细胞表达一些蛋白,因此让我寻找哺乳动物细胞发酵
: 罐的资料。本人对细胞大规模培养一窍不通,看了很多文献,发现太专业,太细致了,
: 很难理得出头绪。请问版上哪位大牛对此比较熟悉,能否提点一下?
: 主要问题是:
: 哪个公司的发酵罐性价比最好?至少能达到10L吧
: 扩培的时候使用几毫升细胞开始进入发酵罐?以CHO细胞为例。
: 培养基有没有特殊要求?还是用一般的培养基就行?
: 灭菌如何保证?
: 多谢多谢!!

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b*n
14
靠,那还是intel吧。amd的8000系列还要配显卡。

【在 d*****0 的大作中提到】
: 3570K据说可以K掉AMD所有8核
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j*n
15
谢谢,这个查了下,和其它的常规发酵罐比有什么优势吗?

【在 b*****o 的大作中提到】
: 试试搜索 wavebag
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j*n
16
实验室现在有几十万刀的经费可以买这个仪器,所以经费不是问题。我们有悬浮的滚瓶
培养箱,表达量不够,而且很麻烦。因为发酵罐细胞的密度可以很高,因此考虑更新细
胞培养体系。

【在 s******y 的大作中提到】
: 专业的发酵罐非常贵,一般实验室是买不起的。
: 我的建议是用Hela cell悬浮培养。对培养基要求不严。

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j*n
17
不是临床用,质量要求不高,但是量要求比较高,希望纯化的蛋白能够满足很多试验用。
现在做的蛋白表达量都太低了,稳定转染株1L细胞下来也拿不了多少蛋白,根本不够试
验用的。

【在 h********0 的大作中提到】
: 你这个要找工业界的人问问了。
: 发酵罐培养的话如果对产出的质量要求不高(非临床应用),难度不大;如果是临床用
: 的话,要按照cGMP的要求,而且当中的水很深。

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m*n
18

Satorius性能最好,价格也最贵;
Applikon性能稍差,价格要低一些;
NBS性能一般,价格更低;
GE Wave性能稍差,主要是不容易控制,价格最便宜。
这个取决于你的起始体积,一般建议接种密度5E5每毫升
取决于细胞株,可以先尝试一般的CHO培养基。

【在 j*******n 的大作中提到】
: 实验室想今后大规模的用哺乳动物细胞表达一些蛋白,因此让我寻找哺乳动物细胞发酵
: 罐的资料。本人对细胞大规模培养一窍不通,看了很多文献,发现太专业,太细致了,
: 很难理得出头绪。请问版上哪位大牛对此比较熟悉,能否提点一下?
: 主要问题是:
: 哪个公司的发酵罐性价比最好?至少能达到10L吧
: 扩培的时候使用几毫升细胞开始进入发酵罐?以CHO细胞为例。
: 培养基有没有特殊要求?还是用一般的培养基就行?
: 灭菌如何保证?
: 多谢多谢!!

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j*n
19
多谢!!

【在 m*****n 的大作中提到】
:
: Satorius性能最好,价格也最贵;
: Applikon性能稍差,价格要低一些;
: NBS性能一般,价格更低;
: GE Wave性能稍差,主要是不容易控制,价格最便宜。
: 这个取决于你的起始体积,一般建议接种密度5E5每毫升
: 取决于细胞株,可以先尝试一般的CHO培养基。

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f*s
20
搜搜Celline bioreactor, 高浓度细胞培养
给lab scale用的
如果不够的话,养10L不常养就用shaker flask或者spinner bottle. 买个wavebag
system 就用一次是吃饱了撑的
到了10L要考虑过滤细胞,titer多高,跑多大柱子还是batch, 有没有FPLC...如果能提
高titer会事半功倍,试试不同cell line, 培养液...

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 7.3

【在 j*******n 的大作中提到】
: 实验室想今后大规模的用哺乳动物细胞表达一些蛋白,因此让我寻找哺乳动物细胞发酵
: 罐的资料。本人对细胞大规模培养一窍不通,看了很多文献,发现太专业,太细致了,
: 很难理得出头绪。请问版上哪位大牛对此比较熟悉,能否提点一下?
: 主要问题是:
: 哪个公司的发酵罐性价比最好?至少能达到10L吧
: 扩培的时候使用几毫升细胞开始进入发酵罐?以CHO细胞为例。
: 培养基有没有特殊要求?还是用一般的培养基就行?
: 灭菌如何保证?
: 多谢多谢!!

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f*s
21
或者outsource出去
一堆公司做这个,lab不常做的话没必要整工业界这些东西

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 7.3

【在 j*******n 的大作中提到】
: 实验室想今后大规模的用哺乳动物细胞表达一些蛋白,因此让我寻找哺乳动物细胞发酵
: 罐的资料。本人对细胞大规模培养一窍不通,看了很多文献,发现太专业,太细致了,
: 很难理得出头绪。请问版上哪位大牛对此比较熟悉,能否提点一下?
: 主要问题是:
: 哪个公司的发酵罐性价比最好?至少能达到10L吧
: 扩培的时候使用几毫升细胞开始进入发酵罐?以CHO细胞为例。
: 培养基有没有特殊要求?还是用一般的培养基就行?
: 灭菌如何保证?
: 多谢多谢!!

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o*d
22
10L左右的话,GE wave system比较方便,主要是整个cellbag是disposible的
也可以用stirred bioreactor
你可以做10x的scale up。比如 1L 到10L
CHO-S(invitrogen)的话比较皮实,1E5/mL都没太大问题
293F (invitrogen)starting conc. 3-5E5/mL
media的话,如果你不要求高密度,DMEM/F12, rpmi都可以
如果加血清的话更好
很多公司都卖serum free medium
拿CHO-S 做例子,有invitrogen, hyclone, irvineSci等等
wave cellbag不用灭菌,传统的glass flask用蒸汽就可以了
inoculation的话 上youtube看看教程吧
你们表达啥蛋白啊? outsource是最好的选择了吧
又快又省心

【在 j*******n 的大作中提到】
: 实验室想今后大规模的用哺乳动物细胞表达一些蛋白,因此让我寻找哺乳动物细胞发酵
: 罐的资料。本人对细胞大规模培养一窍不通,看了很多文献,发现太专业,太细致了,
: 很难理得出头绪。请问版上哪位大牛对此比较熟悉,能否提点一下?
: 主要问题是:
: 哪个公司的发酵罐性价比最好?至少能达到10L吧
: 扩培的时候使用几毫升细胞开始进入发酵罐?以CHO细胞为例。
: 培养基有没有特殊要求?还是用一般的培养基就行?
: 灭菌如何保证?
: 多谢多谢!!

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l*g
23
你说的大规模是多大?如果是指体积,用10L的发酵罐还不如用shake flask, 几个3L的
shake flask就抵得上一个10L罐,用shake flask简单,便宜,同一个细胞株在shake
flask里面可能比发酵罐表达还高点。
如果你就是想玩点没玩过的,建议你买wavebag系统,袋子是disposable. 少了灭菌的
麻烦。
CHO细胞株接种生产罐一般用1E6 cell per ml, 几毫升细胞进不了发酵罐。

【在 j*******n 的大作中提到】
: 实验室想今后大规模的用哺乳动物细胞表达一些蛋白,因此让我寻找哺乳动物细胞发酵
: 罐的资料。本人对细胞大规模培养一窍不通,看了很多文献,发现太专业,太细致了,
: 很难理得出头绪。请问版上哪位大牛对此比较熟悉,能否提点一下?
: 主要问题是:
: 哪个公司的发酵罐性价比最好?至少能达到10L吧
: 扩培的时候使用几毫升细胞开始进入发酵罐?以CHO细胞为例。
: 培养基有没有特殊要求?还是用一般的培养基就行?
: 灭菌如何保证?
: 多谢多谢!!

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