l*e
2 楼
《我的前半生》里，最让人愤怒的不是凌玲，是罗子群。
她就是那种招渣男体质。
老公白光渣得连观众都看不下去了，好吃懒做，天天靠老婆养着，还动不动吵架打架。
老婆一说要离婚，马上跪下来痛哭流涕，要么就是旁若无人地大喊大叫。
好不容易找份工作吧，干了没几天，又给弄丢了。工作丢了不打紧，还跑去喝酒，喝到
胃出血，让老婆到处借医药费。
总之，这个男人不但不能给罗子群一丁点温暖和帮助，还天天给她捅娄子，给她找麻烦
，让她不得不一次又一次放下尊严出去借钱。甚至姐姐和姐夫都离婚了，还在伸手拿姐
夫的钱。
真的特别希望她离婚。
她妈妈也天天嚷着让她离婚，她自己一吵架也说了要离婚，可是每一次白光一求情，她
心软了，马上又回去了。
所谓恨铁不成钢，大概就是看到罗子群的样子。
后来她遇到一个叫什么阿辉的人。这个男人几句甜言蜜语，她就心甘情愿花两千块钱办
了卡，有事儿没事儿就往理发店跑。
姐姐提醒她，这个阿辉看上去根本不靠谱，一看就不是真心的，赶紧跟他了断。可是罗
子群就是不听。
白光知道后到店里打砸吵闹，阿辉躲在宿舍不出来。
罗子群还不死心，从上海跑到深圳去见阿辉，去了才知道，人家早已经结婚了。
事情到这里该结束了吧？不，阿辉依然发消息给罗子群，说爱的是她，自己跟老婆没感
情这类一听就很扯的鬼话。
又是一个大写的渣男。
刚开始用甜言蜜语哄罗子群消费，后面又想让她做情妇。这么渣的男人，不一脚踢开还
等着过年吗？
可是罗子群舍不得，还在筹划着怎么和阿辉见面，无论姐姐和妈妈怎么说，反正十头牛
也拉不回来。
真的要被她气死了！
遇到渣男不可怕，毕竟谁这一生，都有可能遇到几个渣男。
可怕的是，遇到渣男却不肯离开，明知道对方渣，却还要纠缠不清，试图白头偕老。
罗子群就是这样的人，白光渣成那样都死不离婚，遇到了同样渣的阿辉，还想着跟人私
奔。
唐晶说，这是暴力亲密关系，罗子君妈妈说，这个女儿太傻。
罗子群自己说了一句话，她说，我如果有钱，离开谁都行，可是我没钱，我身上只有不
到一千块，连房租都不够，我不靠男人我怎么办啊？
一语道破天机。
她并不傻，并不是不知道白光和阿辉都很渣。她也不是不想离开，只是，她怕离开男人
，自己的生活会陷入困境。
虽然这两个男人都很渣，但好歹是个依靠，哪怕根本帮不上忙，至少让她不那么怕。
她这话不是说着玩的，而是真的说出了内心的想法。
当罗子君说：我给你五万块，你不要再找阿辉了，你愿不愿意？
罗子群立即选择了要五万块，不再和阿辉联系。
有这五万块钱，她就有了安全感，就能够解决衣食住行，还能够租个门面做点小生意。
所以，即使很舍不得离开阿辉，也还是能够咬咬牙离开。
五万块钱，就可以让她离开渣男。
得知唐晶结婚要请朋友出去旅行，而且会花好几万，罗子群感慨了很久。
罗子君说：你和阿辉谈情说爱的时候，人家在拼命工作。
天长日久，层次渐分。只顾着谈情说爱的，只顾着和渣男分分合合的，穷得房租都付不
起，只能继续在渣男堆里碾转。而那些拼命工作的，变得有钱有能力，会遇到更好的人
，会办更好的婚礼。
一个人走过的路，就是一个人的命运。这条路你是怎么走的，就会有怎样的生活。
罗子群年轻的时候没有好好工作，只顾着和白光谈恋爱，哪怕母亲反对也坚决要嫁，唯
爱情至上，结果，钱没有，工作能力没有，只能在让人窒息的婚姻里煎熬着。
她走出婚姻的方法不是好好工作努力赚钱，然后和老公离婚，而是和另一个渣男滚到一
起，贪恋那点温暖和甜蜜。
有那五万块钱做基础，看样子罗子群想要好好做一点事情。如果她把时间精力花在做事
上，当她有钱了，并且有了赚钱的能力，那时候，白光阿辉之流她根本看不上，即使走
眼爱上了渣男，也会有离开的勇气。
想要改变命运，先让自己有钱。
她就是那种招渣男体质。
老公白光渣得连观众都看不下去了，好吃懒做，天天靠老婆养着，还动不动吵架打架。
老婆一说要离婚，马上跪下来痛哭流涕，要么就是旁若无人地大喊大叫。
好不容易找份工作吧，干了没几天，又给弄丢了。工作丢了不打紧，还跑去喝酒，喝到
胃出血，让老婆到处借医药费。
总之，这个男人不但不能给罗子群一丁点温暖和帮助，还天天给她捅娄子，给她找麻烦
，让她不得不一次又一次放下尊严出去借钱。甚至姐姐和姐夫都离婚了，还在伸手拿姐
夫的钱。
真的特别希望她离婚。
她妈妈也天天嚷着让她离婚，她自己一吵架也说了要离婚，可是每一次白光一求情，她
心软了，马上又回去了。
所谓恨铁不成钢，大概就是看到罗子群的样子。
后来她遇到一个叫什么阿辉的人。这个男人几句甜言蜜语，她就心甘情愿花两千块钱办
了卡，有事儿没事儿就往理发店跑。
姐姐提醒她，这个阿辉看上去根本不靠谱，一看就不是真心的，赶紧跟他了断。可是罗
子群就是不听。
白光知道后到店里打砸吵闹，阿辉躲在宿舍不出来。
罗子群还不死心，从上海跑到深圳去见阿辉，去了才知道，人家早已经结婚了。
事情到这里该结束了吧？不，阿辉依然发消息给罗子群，说爱的是她，自己跟老婆没感
情这类一听就很扯的鬼话。
又是一个大写的渣男。
刚开始用甜言蜜语哄罗子群消费，后面又想让她做情妇。这么渣的男人，不一脚踢开还
等着过年吗？
可是罗子群舍不得，还在筹划着怎么和阿辉见面，无论姐姐和妈妈怎么说，反正十头牛
也拉不回来。
真的要被她气死了！
遇到渣男不可怕，毕竟谁这一生，都有可能遇到几个渣男。
可怕的是，遇到渣男却不肯离开，明知道对方渣，却还要纠缠不清，试图白头偕老。
罗子群就是这样的人，白光渣成那样都死不离婚，遇到了同样渣的阿辉，还想着跟人私
奔。
唐晶说，这是暴力亲密关系，罗子君妈妈说，这个女儿太傻。
罗子群自己说了一句话，她说，我如果有钱，离开谁都行，可是我没钱，我身上只有不
到一千块，连房租都不够，我不靠男人我怎么办啊？
一语道破天机。
她并不傻，并不是不知道白光和阿辉都很渣。她也不是不想离开，只是，她怕离开男人
，自己的生活会陷入困境。
虽然这两个男人都很渣，但好歹是个依靠，哪怕根本帮不上忙，至少让她不那么怕。
她这话不是说着玩的，而是真的说出了内心的想法。
当罗子君说：我给你五万块，你不要再找阿辉了，你愿不愿意？
罗子群立即选择了要五万块，不再和阿辉联系。
有这五万块钱，她就有了安全感，就能够解决衣食住行，还能够租个门面做点小生意。
所以，即使很舍不得离开阿辉，也还是能够咬咬牙离开。
五万块钱，就可以让她离开渣男。
得知唐晶结婚要请朋友出去旅行，而且会花好几万，罗子群感慨了很久。
罗子君说：你和阿辉谈情说爱的时候，人家在拼命工作。
天长日久，层次渐分。只顾着谈情说爱的，只顾着和渣男分分合合的，穷得房租都付不
起，只能继续在渣男堆里碾转。而那些拼命工作的，变得有钱有能力，会遇到更好的人
，会办更好的婚礼。
一个人走过的路，就是一个人的命运。这条路你是怎么走的，就会有怎样的生活。
罗子群年轻的时候没有好好工作，只顾着和白光谈恋爱，哪怕母亲反对也坚决要嫁，唯
爱情至上，结果，钱没有，工作能力没有，只能在让人窒息的婚姻里煎熬着。
她走出婚姻的方法不是好好工作努力赚钱，然后和老公离婚，而是和另一个渣男滚到一
起，贪恋那点温暖和甜蜜。
有那五万块钱做基础，看样子罗子群想要好好做一点事情。如果她把时间精力花在做事
上，当她有钱了，并且有了赚钱的能力，那时候，白光阿辉之流她根本看不上，即使走
眼爱上了渣男，也会有离开的勇气。
想要改变命运，先让自己有钱。
c*e
3 楼
【 以下文字转载自 Complain 讨论区 】
发信人: qed (弦月弯刀), 信区: Complain
标 题: Re: 投诉Texas站站长churchance无理封人
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Dec 14 11:31:53 2010, 美东)
我们以前投诉大波的时候,
丫就不断的重复,大帅砍了你的脑袋也是为了大局,你要忍辱负重,
今天是天理昭彰,报应不爽,轮到他了.哈哈哈
以彼之道,还施彼身,是最好的教育方式.
我呼吁以前所有被丫行为艺术过的都来:
橙帅砍了你的脑袋也是为了大局,你要忍辱负重一把
who
and
发信人: qed (弦月弯刀), 信区: Complain
标 题: Re: 投诉Texas站站长churchance无理封人
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Dec 14 11:31:53 2010, 美东)
我们以前投诉大波的时候,
丫就不断的重复,大帅砍了你的脑袋也是为了大局,你要忍辱负重,
今天是天理昭彰,报应不爽,轮到他了.哈哈哈
以彼之道,还施彼身,是最好的教育方式.
我呼吁以前所有被丫行为艺术过的都来:
橙帅砍了你的脑袋也是为了大局,你要忍辱负重一把
who
and
a*s
4 楼
可行吗？
f*g
6 楼
四个字：器大活好
【在 l****e 的大作中提到】
: 《我的前半生》里，最让人愤怒的不是凌玲，是罗子群。
: 她就是那种招渣男体质。
: 老公白光渣得连观众都看不下去了，好吃懒做，天天靠老婆养着，还动不动吵架打架。
: 老婆一说要离婚，马上跪下来痛哭流涕，要么就是旁若无人地大喊大叫。
: 好不容易找份工作吧，干了没几天，又给弄丢了。工作丢了不打紧，还跑去喝酒，喝到
: 胃出血，让老婆到处借医药费。
: 总之，这个男人不但不能给罗子群一丁点温暖和帮助，还天天给她捅娄子，给她找麻烦
: ，让她不得不一次又一次放下尊严出去借钱。甚至姐姐和姐夫都离婚了，还在伸手拿姐
: 夫的钱。
: 真的特别希望她离婚。
【在 l****e 的大作中提到】
: 《我的前半生》里，最让人愤怒的不是凌玲，是罗子群。
: 她就是那种招渣男体质。
: 老公白光渣得连观众都看不下去了，好吃懒做，天天靠老婆养着，还动不动吵架打架。
: 老婆一说要离婚，马上跪下来痛哭流涕，要么就是旁若无人地大喊大叫。
: 好不容易找份工作吧，干了没几天，又给弄丢了。工作丢了不打紧，还跑去喝酒，喝到
: 胃出血，让老婆到处借医药费。
: 总之，这个男人不但不能给罗子群一丁点温暖和帮助，还天天给她捅娄子，给她找麻烦
: ，让她不得不一次又一次放下尊严出去借钱。甚至姐姐和姐夫都离婚了，还在伸手拿姐
: 夫的钱。
: 真的特别希望她离婚。
a*a
7 楼
我也想问同样的问题。
一个质粒，如何同时表达两个ORF？
【在 a******s 的大作中提到】
: 可行吗？
一个质粒，如何同时表达两个ORF？
【在 a******s 的大作中提到】
: 可行吗？
r*l
8 楼
re
a*8
9 楼
楼上以为叫鸭啊
H*i
10 楼
你问的是原核/真核？
【在 a*******a 的大作中提到】
: 我也想问同样的问题。
: 一个质粒，如何同时表达两个ORF？
【在 a*******a 的大作中提到】
: 我也想问同样的问题。
: 一个质粒，如何同时表达两个ORF？
f*l
11 楼
这个店可靠不？
s*y
12 楼
单亲家庭出来的女人都是奇葩中的战斗机，三观严重扭曲，看看这姐俩就知道了
【在 l****e 的大作中提到】
: 《我的前半生》里，最让人愤怒的不是凌玲，是罗子群。
: 她就是那种招渣男体质。
: 老公白光渣得连观众都看不下去了，好吃懒做，天天靠老婆养着，还动不动吵架打架。
: 老婆一说要离婚，马上跪下来痛哭流涕，要么就是旁若无人地大喊大叫。
: 好不容易找份工作吧，干了没几天，又给弄丢了。工作丢了不打紧，还跑去喝酒，喝到
: 胃出血，让老婆到处借医药费。
: 总之，这个男人不但不能给罗子群一丁点温暖和帮助，还天天给她捅娄子，给她找麻烦
: ，让她不得不一次又一次放下尊严出去借钱。甚至姐姐和姐夫都离婚了，还在伸手拿姐
: 夫的钱。
: 真的特别希望她离婚。
【在 l****e 的大作中提到】
: 《我的前半生》里，最让人愤怒的不是凌玲，是罗子群。
: 她就是那种招渣男体质。
: 老公白光渣得连观众都看不下去了，好吃懒做，天天靠老婆养着，还动不动吵架打架。
: 老婆一说要离婚，马上跪下来痛哭流涕，要么就是旁若无人地大喊大叫。
: 好不容易找份工作吧，干了没几天，又给弄丢了。工作丢了不打紧，还跑去喝酒，喝到
: 胃出血，让老婆到处借医药费。
: 总之，这个男人不但不能给罗子群一丁点温暖和帮助，还天天给她捅娄子，给她找麻烦
: ，让她不得不一次又一次放下尊严出去借钱。甚至姐姐和姐夫都离婚了，还在伸手拿姐
: 夫的钱。
: 真的特别希望她离婚。
a*a
13 楼
CHO细胞里。
同时还要建稳定表达细胞株。最终目的是构建高通量药物筛选的细胞模型。
【在 H*******i 的大作中提到】
: 你问的是原核/真核？
同时还要建稳定表达细胞株。最终目的是构建高通量药物筛选的细胞模型。
【在 H*******i 的大作中提到】
: 你问的是原核/真核？
r*l
14 楼
前几天谁提起过一个国内淘宝代购来者？找不到了
我也想和人团着，从国内淘宝，买些东西邮寄过来
谁有好的代沟推荐？
我也想和人团着，从国内淘宝，买些东西邮寄过来
谁有好的代沟推荐？
w*e
15 楼
表达4个都可以
用2A比IRES好
【在 a******s 的大作中提到】
: 可行吗？
用2A比IRES好
【在 a******s 的大作中提到】
: 可行吗？
a*s
17 楼
2A切的效率怎么样？
【在 w*e 的大作中提到】
: 表达4个都可以
: 用2A比IRES好
【在 w*e 的大作中提到】
: 表达4个都可以
: 用2A比IRES好
r*l
18 楼
re
w*e
19 楼
good
【在 a******s 的大作中提到】
: 2A切的效率怎么样？
【在 a******s 的大作中提到】
: 2A切的效率怎么样？
f*l
20 楼
这个店可靠不？
S*s
21 楼
Rudolf Jaenisch lab用T2A, P2A把四个ONSM是个factor放到了一个载体上同时表达四
个ORF.
Reprogramming of murine and human somatic cells using a single polycistronic
vector
Bryce W. Careya,b,
Styliani Markoulakia,
Jacob Hannaa,
Kris Sahaa,
Qing Gaoa,
Maisam Mitalipovaa,1, and
Rudolf Jaenischa,b,1
http://www.pnas.org/content/106/1/157.abstract
【在 a******s 的大作中提到】
: 可行吗？
个ORF.
Reprogramming of murine and human somatic cells using a single polycistronic
vector
Bryce W. Careya,b,
Styliani Markoulakia,
Jacob Hannaa,
Kris Sahaa,
Qing Gaoa,
Maisam Mitalipovaa,1, and
Rudolf Jaenischa,b,1
http://www.pnas.org/content/106/1/157.abstract
【在 a******s 的大作中提到】
: 可行吗？
g*5
22 楼
pVITRO
H*s
23 楼
很有意思。2A的自切割发生在细胞的什么地方？细胞质内？有没有可能在ER内，或者是
核内？如果使用在体外转录翻译系统，会在体外自切割吗？谢谢。
polycistronic
【在 S*********s 的大作中提到】
: Rudolf Jaenisch lab用T2A, P2A把四个ONSM是个factor放到了一个载体上同时表达四
: 个ORF.
: Reprogramming of murine and human somatic cells using a single polycistronic
: vector
: Bryce W. Careya,b,
: Styliani Markoulakia,
: Jacob Hannaa,
: Kris Sahaa,
: Qing Gaoa,
: Maisam Mitalipovaa,1, and
核内？如果使用在体外转录翻译系统，会在体外自切割吗？谢谢。
polycistronic
【在 S*********s 的大作中提到】
: Rudolf Jaenisch lab用T2A, P2A把四个ONSM是个factor放到了一个载体上同时表达四
: 个ORF.
: Reprogramming of murine and human somatic cells using a single polycistronic
: vector
: Bryce W. Careya,b,
: Styliani Markoulakia,
: Jacob Hannaa,
: Kris Sahaa,
: Qing Gaoa,
: Maisam Mitalipovaa,1, and
B*o
24 楼
以惨痛的经验告诉你用IRES不能保证两个ORF的同时表达，个人也觉得2A更靠谱，同时
转录再剪切的。
【在 w*e 的大作中提到】
: 表达4个都可以
: 用2A比IRES好
转录再剪切的。
【在 w*e 的大作中提到】
: 表达4个都可以
: 用2A比IRES好
j*n
25 楼
严格来说不是自切割 而是生成的氨基酸链在那个位置不能连起来而留下个nick 因此这
个分裂是在翻译延伸过程中产生的 所以是在细胞质中 体外翻译系统貌似是利用的网织
红细
胞完整的翻译组件 因此理论上2A也是可以工作的
【在 H****s 的大作中提到】
: 很有意思。2A的自切割发生在细胞的什么地方？细胞质内？有没有可能在ER内，或者是
: 核内？如果使用在体外转录翻译系统，会在体外自切割吗？谢谢。
:
: polycistronic
j*n
26 楼
我的经验是切割率大约80% 整体表达效率比IRES高 而且在某些情况下 IRES前后两个
ORF表达情况不成比例
【在 a******s 的大作中提到】
: 2A切的效率怎么样？
H*s
27 楼
赞。这个解释真是详细、简单明了。
【在 j******n 的大作中提到】
:
: 我的经验是切割率大约80% 整体表达效率比IRES高 而且在某些情况下 IRES前后两个
: ORF表达情况不成比例
【在 j******n 的大作中提到】
:
: 我的经验是切割率大约80% 整体表达效率比IRES高 而且在某些情况下 IRES前后两个
: ORF表达情况不成比例
l*a
28 楼
分泌型蛋白有办法搞2个ORF吗？ 如果用一个promoter的话。
【在 j******n 的大作中提到】
:
: 我的经验是切割率大约80% 整体表达效率比IRES高 而且在某些情况下 IRES前后两个
: ORF表达情况不成比例
【在 j******n 的大作中提到】
:
: 我的经验是切割率大约80% 整体表达效率比IRES高 而且在某些情况下 IRES前后两个
: ORF表达情况不成比例
相关阅读
关于 applied biosystems 7500 Real-time PCR ROI 校正U Louisville 的Biochemistry and Molecular Biology 怎么样本科的 Biometric System 这个专业怎么样啊?TREx pcDNA6/TR问个TOPO TA cloning的问题 诡异！著名医学院的研究助教前途如何？这样被据的是不是得罪人了？请教一个freezer的问题刚听说老板的funding被cut了30%有些人的素质。。。-80度冰箱坏了救命：古巴发布的一个抗肺癌疫苗，CIMAvax EGF靠谱不？问个免疫沉淀Immunoprecipitation的问题。一个新名词--"钓鱼待遇" (转载)NF-kB phos-NF-kB antibodyR21NIH Biosketch: D.Research Support现在美国经济有这么好吗？生物博士十万工作随便找？问一个改变酶的底物特异性问题请教质粒-20度冻存2年后不表达了