为什么IP下来的蛋白和input 里面分子量不一样呢?# Biology - 生物学n*p2011-03-16 07:031 楼我原本以为将旧衣服鞋子捐给Goodwill至少可以拿个估价的单子来抵税,结果就是直接往他们的仓库里一放就完了,只得到了一句Thank you.是不是我明年报税的时候自己随便写个捐献数额,比如$1000, 就行了?
w*s2011-03-16 07:032 楼【 以下文字转载自 Programming 讨论区 】发信人: wds (退市了退市了), 信区: Programming标 题: 从我们组看为什么华人对阿三节节败退发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jun 12 23:30:42 2014, 美东)我们组基本是中国人,从进组的先后,a,b,c,d,e,我是c。d跟a,c吵架不合作,还跟以前2个中国人吵过。e跟b吵。现在上班时组里一片静悄悄的,没人再愿意开口说话。a,b,c都在自责,为什么还要放中国人进来给自己添堵?
s*y2011-03-16 07:034 楼我做mouse NFAt c3的IP, 预测的分子量应该是115Kd, 我IP下来大概100Kd有带,但是input 里面分子量变大了快到150Kd,(略小于100也有浅带,但不是IP那条)为什么会这样呢?有人说可能是sumoylation, 可是为啥IP下来这修饰就没了呢?谢谢。
m*y2011-03-16 07:035 楼They give you a reciept for tax purpose.Many Charities provide pick up service, you leave your bags at door, theypick them up and leave the reciept at your porch, easier to handle.
z*i2011-03-16 07:038 楼首先,网上好好查一下,看跑出来的分子量到底是多大。其次,确认一下你的抗体有没有问题,是否能做IP.哪怕是公司说能做,如果是第一次用,最好还是确认一下。如果这些都没有问题,然后再来看看。【在 s******y 的大作中提到】: 我做mouse NFAt c3的IP, 预测的分子量应该是115Kd, 我IP下来大概100Kd有带,: 但是input 里面分子量变大了快到150Kd,(略小于100也有浅带,但不是IP那条): 为什么会这样呢?: 有人说可能是sumoylation, 可是为啥IP下来这修饰就没了呢?: 谢谢。
a*g2011-03-16 07:0310 楼可怜。【在 w*s 的大作中提到】: 【 以下文字转载自 Programming 讨论区 】: 发信人: wds (退市了退市了), 信区: Programming: 标 题: 从我们组看为什么华人对阿三节节败退: 发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jun 12 23:30:42 2014, 美东): 我们组基本是中国人,从进组的先后,a,b,c,d,e,我是c。: d跟a,c吵架不合作,还跟以前2个中国人吵过。: e跟b吵。: 现在上班时组里一片静悄悄的,没人再愿意开口说话。: a,b,c都在自责,为什么还要放中国人进来给自己添堵?
s*y2011-03-16 07:0311 楼有一个可能就是你那个全长的蛋白因为一些构象原因不能被pulldown,反而是被切过的(或者alternatively splice) 的可以被pulldown.如果你开始用的是native buffer pulldown 的话,不妨换成denaturing pulldowncondition比方说用 2 %SDS 把细胞给煮了,然后加缓冲液稀释到0.2% SDS再pulldown,这样一方面可以解决大部分构象原因,另外一方面也会减少背景当然,如果你比较倒霉的话,这样也有可能导致你什么都pulldown 不下来。这个你得试一试,就没有人敢给你保证了。【在 s******y 的大作中提到】: 我做mouse NFAt c3的IP, 预测的分子量应该是115Kd, 我IP下来大概100Kd有带,: 但是input 里面分子量变大了快到150Kd,(略小于100也有浅带,但不是IP那条): 为什么会这样呢?: 有人说可能是sumoylation, 可是为啥IP下来这修饰就没了呢?: 谢谢。
g*92011-03-16 07:0312 楼only itemized deduction could claim...you could ask for receipt for sure.【在 n***p 的大作中提到】: 我原本以为将旧衣服鞋子捐给Goodwill至少可以拿个估价的单子来抵税,结果就是直接: 往他们的: 仓库里一放就完了,只得到了一句Thank you.: 是不是我明年报税的时候自己随便写个捐献数额,比如$1000, 就行了?
j*f2011-03-16 07:0313 楼这种太少见了, 互相背后拆台的我见过, 但至少面上要过的去...【在 w*s 的大作中提到】: 【 以下文字转载自 Programming 讨论区 】: 发信人: wds (退市了退市了), 信区: Programming: 标 题: 从我们组看为什么华人对阿三节节败退: 发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jun 12 23:30:42 2014, 美东): 我们组基本是中国人,从进组的先后,a,b,c,d,e,我是c。: d跟a,c吵架不合作,还跟以前2个中国人吵过。: e跟b吵。: 现在上班时组里一片静悄悄的,没人再愿意开口说话。: a,b,c都在自责,为什么还要放中国人进来给自己添堵?
r*a2011-03-16 07:0314 楼我也碰到类似的情况我的是IP下来的,比input稍微高一点一个如果60,一个可能就60-65KD一开始以为是磷酸化,加了ppase,还在原来位置现在也不知道,那个到底是非特异性的还是什么修饰【在 s******y 的大作中提到】: 我做mouse NFAt c3的IP, 预测的分子量应该是115Kd, 我IP下来大概100Kd有带,: 但是input 里面分子量变大了快到150Kd,(略小于100也有浅带,但不是IP那条): 为什么会这样呢?: 有人说可能是sumoylation, 可是为啥IP下来这修饰就没了呢?: 谢谢。
n*p2011-03-16 07:0315 楼Hmm, most probably standard deduction works better for me. Thanks.Next time I will ask for a receipt when I donate something worth of $1000.【在 g*********9 的大作中提到】: only itemized deduction could claim...: you could ask for receipt for sure.
o*e2011-03-16 07:0316 楼interview还是要把关,给老中多问一些behavior的问题,顺便教育了。或者叫他们来bbs接受再教育吧。 哈哈。我比较重视的不是每个华裔从50分进步到100分的问题,而是怎样让3个50分华裔变成150分的问题, 或者10个50分华裔变成500分的问题。组织起来,reach out,少拆台,多褒奖。建立信用,互相帮助,否则跟1882年一样,被排挤无解。想要说服老美老中,需要举例子出来才能有说服力,这里有。 查置顶帖子:http://www.mitbbs.com/clubarticle_t2/ITRelief/31117093.html需要加入俱乐部:http://www.mitbbs.com/club_bbsdoc/ITRelief.html
s*y2011-03-16 07:0317 楼你们拖下来的带有没有WB confirm 并送去质谱证实一下?【在 r**a 的大作中提到】: 我也碰到类似的情况: 我的是IP下来的,比input稍微高一点: 一个如果60,一个可能就60-65KD: 一开始以为是磷酸化,加了ppase,还在原来位置: 现在也不知道,那个到底是非特异性的: 还是什么修饰
o*e2011-03-16 07:0319 楼LZ不错。 可以更上一层楼A。有的人下围棋是下的13x13,B。有的人下围棋是下的19x19,C。有的人下围棋是下的99x99,D。有的人下围棋是下的999x999,老中好像都是A),即使下得很好,也需要学习B),C),D)
m*g2011-03-16 07:0321 楼周围一大妈,把一认识的中国新人介绍进来,结果主管给新人定的工资比她差不少,结果丫破口大骂,嫉妒的发狂。华人大妈一过40岁就该劝退,哪里大妈多哪里是非多。【在 w*s 的大作中提到】: 【 以下文字转载自 Programming 讨论区 】: 发信人: wds (退市了退市了), 信区: Programming: 标 题: 从我们组看为什么华人对阿三节节败退: 发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jun 12 23:30:42 2014, 美东): 我们组基本是中国人,从进组的先后,a,b,c,d,e,我是c。: d跟a,c吵架不合作,还跟以前2个中国人吵过。: e跟b吵。: 现在上班时组里一片静悄悄的,没人再愿意开口说话。: a,b,c都在自责,为什么还要放中国人进来给自己添堵?