d*u
2 楼
海底捞的底料，吃完才想起来应该有花椒，明天的drug test会有影响吗？有没有知道
的前辈？
谢谢
的前辈？
谢谢
r*5
3 楼
眼看就要下霜了，可我的茄子还大批的开花。想着他就要冻死，好伤心！
k*n
4 楼
从 clontech pIRES2-DsRed 里 扩增 Dsred 出来，粘端连接到pcdna4里目标基因后面
，目标基因和Dsred有3个氨基酸连接，inframe 没有问题，测序后序列也没有问题。
但是转染细胞后没有红色荧光，自己想到可能的问题是：dsRED 是一个四聚体蛋白，可
能由于目标基因和Dsred之间的linker只有3个氨基酸所以Dsred不能形成四聚体，因此
没有红色荧光。
请各位帮我看看，我的想法对不对，还有什么别的问题吗？ 非常感谢，有没有什么好
的单体的红色荧光蛋白推荐？
，目标基因和Dsred有3个氨基酸连接，inframe 没有问题，测序后序列也没有问题。
但是转染细胞后没有红色荧光，自己想到可能的问题是：dsRED 是一个四聚体蛋白，可
能由于目标基因和Dsred之间的linker只有3个氨基酸所以Dsred不能形成四聚体，因此
没有红色荧光。
请各位帮我看看，我的想法对不对，还有什么别的问题吗？ 非常感谢，有没有什么好
的单体的红色荧光蛋白推荐？
z*m
5 楼
我听说coworker就可以做reference。曾经的supervisor很变态，在他手下吃了不少苦
头，也不知道他会说什么。有什么办法变通一下吗？
【在 z***m 的大作中提到】
: 刚刚被雷了，找了一个学校的工作，HR说一定要曾经的supervisor做reference。
: 怎么办啊！
头，也不知道他会说什么。有什么办法变通一下吗？
【在 z***m 的大作中提到】
: 刚刚被雷了，找了一个学校的工作，HR说一定要曾经的supervisor做reference。
: 怎么办啊！
M*s
6 楼
会吗？你心里有鬼？
xt
7 楼
这种情况是不是应该提前打掉？
【在 r***5 的大作中提到】
: 眼看就要下霜了，可我的茄子还大批的开花。想着他就要冻死，好伤心！
【在 r***5 的大作中提到】
: 眼看就要下霜了，可我的茄子还大批的开花。想着他就要冻死，好伤心！
b*n
8 楼
DSRed好像经常有这种问题
空质粒可以有红色荧光
一旦跟别的蛋白做成融合蛋白就无法产生红色荧光了
【在 k****n 的大作中提到】
: 从 clontech pIRES2-DsRed 里 扩增 Dsred 出来，粘端连接到pcdna4里目标基因后面
: ，目标基因和Dsred有3个氨基酸连接，inframe 没有问题，测序后序列也没有问题。
: 但是转染细胞后没有红色荧光，自己想到可能的问题是：dsRED 是一个四聚体蛋白，可
: 能由于目标基因和Dsred之间的linker只有3个氨基酸所以Dsred不能形成四聚体，因此
: 没有红色荧光。
: 请各位帮我看看，我的想法对不对，还有什么别的问题吗？ 非常感谢，有没有什么好
: 的单体的红色荧光蛋白推荐？
空质粒可以有红色荧光
一旦跟别的蛋白做成融合蛋白就无法产生红色荧光了
【在 k****n 的大作中提到】
: 从 clontech pIRES2-DsRed 里 扩增 Dsred 出来，粘端连接到pcdna4里目标基因后面
: ，目标基因和Dsred有3个氨基酸连接，inframe 没有问题，测序后序列也没有问题。
: 但是转染细胞后没有红色荧光，自己想到可能的问题是：dsRED 是一个四聚体蛋白，可
: 能由于目标基因和Dsred之间的linker只有3个氨基酸所以Dsred不能形成四聚体，因此
: 没有红色荧光。
: 请各位帮我看看，我的想法对不对，还有什么别的问题吗？ 非常感谢，有没有什么好
: 的单体的红色荧光蛋白推荐？
j*s
9 楼
do you have any other supervisors at different timeslots?
d*g
10 楼
会。
【在 d******u 的大作中提到】
: 海底捞的底料，吃完才想起来应该有花椒，明天的drug test会有影响吗？有没有知道
: 的前辈？
: 谢谢
【在 d******u 的大作中提到】
: 海底捞的底料，吃完才想起来应该有花椒，明天的drug test会有影响吗？有没有知道
: 的前辈？
: 谢谢
r*5
11 楼
你是说把花打掉吗？
【在 xt 的大作中提到】
: 这种情况是不是应该提前打掉？
【在 xt 的大作中提到】
: 这种情况是不是应该提前打掉？
k*n
12 楼
谢谢，有什么好的解决办法没有，继续求助！！
d*a
13 楼
drug test都事先通知??
我们怎么都是突击抽查
我们怎么都是突击抽查
xt
14 楼
是啊，否则也是没有结果，还不如打掉让已经有点茄子长大
【在 r***5 的大作中提到】
: 你是说把花打掉吗？
【在 r***5 的大作中提到】
: 你是说把花打掉吗？
A*9
15 楼
我的质粒里面也有，但我用了IRES，所以没有影响，表达得很好。
b*c
16 楼
突击抽查...还以为大家都是新工作开始的时候安排日子查的呢，上一份工作是HR提前
一周就给的appointment时间。话说，才想起来现在这份工作居然根本就没做drug test
，我都干了小一年了...
【在 d*a 的大作中提到】
: drug test都事先通知??
: 我们怎么都是突击抽查
一周就给的appointment时间。话说，才想起来现在这份工作居然根本就没做drug test
，我都干了小一年了...
【在 d*a 的大作中提到】
: drug test都事先通知??
: 我们怎么都是突击抽查
r*5
17 楼
上边开花底下的茄子不耽误长，而且这是第二批了。
【在 xt 的大作中提到】
: 是啊，否则也是没有结果，还不如打掉让已经有点茄子长大
【在 xt 的大作中提到】
: 是啊，否则也是没有结果，还不如打掉让已经有点茄子长大
s*9
18 楼
我的DsRed fusion的maturation time也很长。mcherry要好很多。
l*u
19 楼
没事的 :)
【在 d******u 的大作中提到】
: 海底捞的底料，吃完才想起来应该有花椒，明天的drug test会有影响吗？有没有知道
: 的前辈？
: 谢谢
【在 d******u 的大作中提到】
: 海底捞的底料，吃完才想起来应该有花椒，明天的drug test会有影响吗？有没有知道
: 的前辈？
: 谢谢
L*1
20 楼
已经是第二批了，那你的茄子已经很尽力了
k*n
21 楼
谢谢！
r*5
22 楼
第一批结的可多了，刚把那批摘完他又开始开花结果了，可是老天不让他给卖力了。
【在 L***1 的大作中提到】
: 已经是第二批了，那你的茄子已经很尽力了
【在 L***1 的大作中提到】
: 已经是第二批了，那你的茄子已经很尽力了
g*e
23 楼
western 有条带吗？
【在 k****n 的大作中提到】
: 从 clontech pIRES2-DsRed 里 扩增 Dsred 出来，粘端连接到pcdna4里目标基因后面
: ，目标基因和Dsred有3个氨基酸连接，inframe 没有问题，测序后序列也没有问题。
: 但是转染细胞后没有红色荧光，自己想到可能的问题是：dsRED 是一个四聚体蛋白，可
: 能由于目标基因和Dsred之间的linker只有3个氨基酸所以Dsred不能形成四聚体，因此
: 没有红色荧光。
: 请各位帮我看看，我的想法对不对，还有什么别的问题吗？ 非常感谢，有没有什么好
: 的单体的红色荧光蛋白推荐？
【在 k****n 的大作中提到】
: 从 clontech pIRES2-DsRed 里 扩增 Dsred 出来，粘端连接到pcdna4里目标基因后面
: ，目标基因和Dsred有3个氨基酸连接，inframe 没有问题，测序后序列也没有问题。
: 但是转染细胞后没有红色荧光，自己想到可能的问题是：dsRED 是一个四聚体蛋白，可
: 能由于目标基因和Dsred之间的linker只有3个氨基酸所以Dsred不能形成四聚体，因此
: 没有红色荧光。
: 请各位帮我看看，我的想法对不对，还有什么别的问题吗？ 非常感谢，有没有什么好
: 的单体的红色荧光蛋白推荐？
y*8
24 楼
是可惜啊！搭个简易塑料棚行不行呢？
W*a
25 楼
换单体的, mCherry, orange, apple, banana, etc.
【在 k****n 的大作中提到】
: 谢谢，有什么好的解决办法没有，继续求助！！
【在 k****n 的大作中提到】
: 谢谢，有什么好的解决办法没有，继续求助！！
x*e
26 楼
那就当做赏花吧。
k*n
27 楼
没有做wb，准备先在目的基因和RFP 中间加一个linker试试看
j*s
28 楼
哈哈，我家好多果树都当作了观赏植物。
【在 x****e 的大作中提到】
: 那就当做赏花吧。
【在 x****e 的大作中提到】
: 那就当做赏花吧。
g*e
29 楼
这个花的时间更久吧
还不如western呢，找个dsred的antibody试试
【在 k****n 的大作中提到】
: 没有做wb，准备先在目的基因和RFP 中间加一个linker试试看
还不如western呢，找个dsred的antibody试试
【在 k****n 的大作中提到】
: 没有做wb，准备先在目的基因和RFP 中间加一个linker试试看
t*g
30 楼
排静静，做个圆筒式的灯笼罩样的一棵一棵罩上。我们菜地里的苗子刚长出来时来了寒
流，晚上有霜冻，我就用罐头瓶子把苗苗一棵一棵地罩上了。
【在 y*****8 的大作中提到】
: 是可惜啊！搭个简易塑料棚行不行呢？
流，晚上有霜冻，我就用罐头瓶子把苗苗一棵一棵地罩上了。
【在 y*****8 的大作中提到】
: 是可惜啊！搭个简易塑料棚行不行呢？
w*e
31 楼
不行就套些透明的整理箱当暖屋
r*5
32 楼
我想了，用装草的纸袋套也可以，那样方便，可能套几天还不是要下雪吗！
【在 w*****e 的大作中提到】
: 不行就套些透明的整理箱当暖屋
【在 w*****e 的大作中提到】
: 不行就套些透明的整理箱当暖屋
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