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cell surface marker staining 问题求助

cell surface marker staining 问题求助# Biology - 生物学

z*n2012-01-24 08:01

1 楼

一个人唱三个人的
https://www.youtube.com/watch?v=OKRU_NF1aCY
第一期古典交响乐般的史诗作品《我用所有报答爱》木有挑战。。。
第二期狂野动感的流行粤语紧曲《饿狼传说》挑战粤语快歌
第三期流畅悠扬的民谣另类改编，高亢空灵的藏音《生如夏花》挑战自己的面罩音区
第四期深情款款的走心流行大歌，女版《离歌》挑战自己的换声区，整首歌都不在自
己擅长的音区
第五期新潮时尚的欧美炸红嗨歌，《Bang Bang》挑战节奏高音和RAP
第六期不知道会给我们带来什么更新鲜的东西

h*G2012-01-24 08:01

2 楼

大家好。
做一个实验，需要co-stain cell surface marker 和intracellular protein,然后拍
照。细胞是adherent 的。
因为担心fixation和permeabilization会影响cell surface marker,所以准备先活细胞
染 cell surface marker，然后在fix，permeabilize染intracellular protein.
我的问题是可以活细胞染 cell surface marker，马上fix，然后再染 2nd antibody
anti-cell surface marker吗？
还是必须活细胞染 cell surface marker，再染2nd antibody anti-cell surface
marker，完了才能fix？
谢谢。

h*12012-01-24 08:01

3 楼

很黄很暴力啊

s*s2012-01-24 08:01

4 楼

没干过，不清楚。我用surface biotinylation 看蛋白是不是在surface，效果不错。

antibody

【在 h*****G 的大作中提到】

: 大家好。
: 做一个实验，需要co-stain cell surface marker 和intracellular protein,然后拍
: 照。细胞是adherent 的。
: 因为担心fixation和permeabilization会影响cell surface marker,所以准备先活细胞
: 染 cell surface marker，然后在fix，permeabilize染intracellular protein.
: 我的问题是可以活细胞染 cell surface marker，马上fix，然后再染 2nd antibody
: anti-cell surface marker吗？
: 还是必须活细胞染 cell surface marker，再染2nd antibody anti-cell surface
: marker，完了才能fix？
: 谢谢。

d*92012-01-24 08:01

5 楼

这歌不好听。

p*e2012-01-24 08:01

6 楼

刚染了小鼠血液白细胞，可能有点类似，先染surface marker，(有些surface marker
和fix不兼容）wash,然后fix and permeabilize cells, wash, 最后intracellular
staning. 强类推荐BD cytofix/cytoperm kit。their manual at: http://www.bdbiosciences.com/external_files/pm/doc/manuals/live/web_enabled/00-6088-559311-B.pdf
Good luck

antibody

【在 h*****G 的大作中提到】

s*y2012-01-24 08:01

7 楼

这个特么怎么唱？

h*G2012-01-24 08:01

8 楼

Thanks.
你染完cell surface marker以后马上fix，然后再染2nd anti-cell surface marker
还是染完cell surface marker，再染2nd anti-cell surface marker，fix，然后再
intracellular staining的？

marker

【在 p****e 的大作中提到】

: 刚染了小鼠血液白细胞，可能有点类似，先染surface marker，(有些surface marker
: 和fix不兼容）wash,然后fix and permeabilize cells, wash, 最后intracellular
: staning. 强类推荐BD cytofix/cytoperm kit。their manual at: http://www.bdbiosciences.com/external_files/pm/doc/manuals/live/web_enabled/00-6088-559311-B.pdf
: Good luck
:
: antibody

w*y2012-01-24 08:01

9 楼

这个歌不好听，可是为什么这么红？

p*e2012-01-24 08:01

10 楼

我只染了一次CD8，没有2nd anti-cell surface marker

【在 h*****G 的大作中提到】

: Thanks.
: 你染完cell surface marker以后马上fix，然后再染2nd anti-cell surface marker
: 还是染完cell surface marker，再染2nd anti-cell surface marker，fix，然后再
: intracellular staining的？
:
: marker

m*f2012-01-24 08:01

11 楼

是因为女人都喜欢棒棒？

【在 w*******y 的大作中提到】

: 这个歌不好听，可是为什么这么红？

h*G2012-01-24 08:01

12 楼

sorry. 我的意思是secondary antibody anti-CD8.
还是你的CD8本身是conjugate的？
Thanks。

【在 p****e 的大作中提到】

: 我只染了一次CD8，没有2nd anti-cell surface marker

h*12012-01-24 08:01

13 楼

挑战是好事，但不应该用大提琴去挑战唢呐的高音区（纯比喻，不要引申）。
Bang Bang还可以，离歌真不讨好，虽然我不认为差到了排第七的程度，但也就是第三
的水平。

p*e2012-01-24 08:01

14 楼

我用的dye labeled anti-CD8.

【在 h*****G 的大作中提到】

: sorry. 我的意思是secondary antibody anti-CD8.
: 还是你的CD8本身是conjugate的？
: Thanks。

n*22012-01-24 08:01

15 楼

我还挺喜欢这歌的

h*G2012-01-24 08:01

16 楼

OK. Thanks.

b*n2012-01-24 08:01

17 楼

烦四了，又来唱英语歌

【在 z****n 的大作中提到】

: 一个人唱三个人的
: https://www.youtube.com/watch?v=OKRU_NF1aCY
: 第一期古典交响乐般的史诗作品《我用所有报答爱》木有挑战。。。
: 第二期狂野动感的流行粤语紧曲《饿狼传说》挑战粤语快歌
: 第三期流畅悠扬的民谣另类改编，高亢空灵的藏音《生如夏花》挑战自己的面罩音区
: 第四期深情款款的走心流行大歌，女版《离歌》挑战自己的换声区，整首歌都不在自
: 己擅长的音区
: 第五期新潮时尚的欧美炸红嗨歌，《Bang Bang》挑战节奏高音和RAP
: 第六期不知道会给我们带来什么更新鲜的东西

h*12012-01-24 08:01

18 楼

我挺喜欢听她唱英文歌的，重要是她不会创作，别人创作的中文歌适合她的不多。

c*g2012-01-24 08:01

19 楼

预计降调唱，最后再嚎一嗓子算高音
大部分观众没听过，但会跟着瞎跳
成绩不会差
但后续评价不会高，因为大家反应过来了

c*g2012-01-24 08:01

20 楼

话说 Ariana Grande 声音还真好，vocal 系的，我倒感觉不到很性感，长得mini
了点

h*12012-01-24 08:01

21 楼

据说马达臀了，吼吼。

b*m2012-01-24 08:01

22 楼

马大屯顾名思义需要大屯，阿亮屯吨位不太够。你滴明白，视觉上要能看见那么一坨震
颤起来。。
我觉得bangbang打击乐是关键！噢耶！！

【在 h******1 的大作中提到】

: 据说马达臀了，吼吼。

s*y2012-01-24 08:01

23 楼

卤煮忒不厚道那么多HD的你不贴贴个240P的？
我来奉献个也是live呦

【在 z****n 的大作中提到】

s*y2012-01-24 08:01

24 楼

她的强项就是英文歌什么loving you, 什么don't cry for me Argentina

【在 b******n 的大作中提到】

: 烦四了，又来唱英语歌

b*m2012-01-24 08:01

25 楼

所以bangbang就是啪啪啪的意思？

【在 h******1 的大作中提到】

: 很黄很暴力啊

i*r2012-01-24 08:01

26 楼

估计要垫底出局了

【在 z****n 的大作中提到】

n*n2012-01-24 08:01

27 楼

唱的部分可能还行，nicki minaj那段rap华人不可能有人搞得定的

【在 z****n 的大作中提到】

c*g2012-01-24 08:01

28 楼

吴莫愁？
她这方面挺厉害的

【在 n*******n 的大作中提到】

: 唱的部分可能还行，nicki minaj那段rap华人不可能有人搞得定的

b*n2012-01-24 08:01

29 楼

同意。听这首，堪称中国版bangbang：

【在 c********g 的大作中提到】

: 吴莫愁？
: 她这方面挺厉害的

b*n2012-01-24 08:01

30 楼

现场版：

【在 b******n 的大作中提到】

: 同意。听这首，堪称中国版bangbang：

n*n2012-01-24 08:01

31 楼

rap能说下来不代表有那个味道，nicki minaj 哼哼两声都很有韵律

【在 c********g 的大作中提到】

: 吴莫愁？
: 她这方面挺厉害的