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要分离小鼠脾B细胞，求教

要分离小鼠脾B细胞，求教# Biology - 生物学

j*e2012-02-07 08:02

1 楼

【以下文字转载自 Piebridge 讨论区】
发信人: zairenjian (玻璃虫), 信区: Piebridge
标题: 男人吃木瓜会不会丰胸啊？
发信站: BBS 未名空间站 (Thu May 13 01:33:53 2010, 美东)
听说木瓜能美容，今天买了个回来。但是又听说木瓜丰胸，不知道对男人有没有啥不好
的影响啊？

W*C2012-02-07 08:02

2 楼

主要是怎么提高细胞的viability，分离过程（我用MACS去除其他细胞)有哪些trick？
激活的方法比较多， LPS, IgM, IL4, PMA...怎么激活最好？

s*e2012-02-07 08:02

3 楼

男人吃了长胸肌

s*92012-02-07 08:02

4 楼

Question is too broad. No one can answer your question.

？

【在 W****C 的大作中提到】

: 主要是怎么提高细胞的viability，分离过程（我用MACS去除其他细胞)有哪些trick？
: 激活的方法比较多， LPS, IgM, IL4, PMA...怎么激活最好？

i*a2012-02-07 08:02

5 楼

女瘋兇, 男撞羊

【在 j****e 的大作中提到】

: 【以下文字转载自 Piebridge 讨论区】
: 发信人: zairenjian (玻璃虫), 信区: Piebridge
: 标题: 男人吃木瓜会不会丰胸啊？
: 发信站: BBS 未名空间站 (Thu May 13 01:33:53 2010, 美东)
: 听说木瓜能美容，今天买了个回来。但是又听说木瓜丰胸，不知道对男人有没有啥不好
: 的影响啊？

o*d2012-02-07 08:02

6 楼

个人经验：B cell在体外没有刺激的情况下死的很快，即使有血清也是一样。所以想提
高细胞存活率，动作快／实验连续是一个关键。一般杀老鼠，取脾，纯化B细胞，计数
，加刺激物中间是不停。
至于要激活，看你的实验目的了。

W*C2012-02-07 08:02

7 楼

谢谢楼上的。肯定是加血清的啦，而且要加超低IGG的血清。
应该是连续完成的， FACS鉴定可以同时做（用CD45R).
收细胞后是用来测药效的（cytotoxicity， CTG ASSAY).
刺激Bcell增殖的时候最好专一性好，大概是因为LPS，PMA也刺激其他免疫细胞（eg.
T)，我看别人基本都是跟IL4, IGM同时用的。

【在 o**d 的大作中提到】

: 个人经验：B cell在体外没有刺激的情况下死的很快，即使有血清也是一样。所以想提
: 高细胞存活率，动作快／实验连续是一个关键。一般杀老鼠，取脾，纯化B细胞，计数
: ，加刺激物中间是不停。
: 至于要激活，看你的实验目的了。

s*92012-02-07 08:02

8 楼

用IgM 加anti-cd40刺激

eg.

【在 W****C 的大作中提到】

:
: 谢谢楼上的。肯定是加血清的啦，而且要加超低IGG的血清。
: 应该是连续完成的， FACS鉴定可以同时做（用CD45R).
: 收细胞后是用来测药效的（cytotoxicity， CTG ASSAY).
: 刺激Bcell增殖的时候最好专一性好，大概是因为LPS，PMA也刺激其他免疫细胞（eg.
: T)，我看别人基本都是跟IL4, IGM同时用的。

o*d2012-02-07 08:02

9 楼

我没有用过IL-4，但IgM是肯定可以的，如果能用cross－link的IgM效果会更好。
另外，CD40 or anti－CD ab 和BAFF（专一性很强）是常用的Bcell刺激物。

eg.

【在 W****C 的大作中提到】