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请教 small RNA lib prep for RNA seq

请教 small RNA lib prep for RNA seq# Biology - 生物学

c*02013-06-13 07:06

1 楼

我本月中旬交的EB1A的140和485,现在有急事要回国,还没有收到485收据,更没有AP,出
境后H1B也无效了(因为现在在H1B延期的PENDING中),这种情况,离境后,我的I-140申请
还有效嘛? 我的I-485还有没有效?
如果我取消I-485支票,会不会影响以后再再递交I-485?会不会留下不良记录?
由于H1B下个月到期,如果回国,可不可以在美国驻中国广州申请EB1A和NIW嘛? 有什么其他具体要求嘛?

u*12013-06-13 07:06

2 楼

准备做small RNA seq。
看了NEB的protocol，跟illumina的protocol，有些不一样。比如1.）连5‘adapter之
前，就先让RT primer 跟3’adapter hybrid。2.）推荐XPbeads 纯化而不是PAGE跑胶
纯化。
个人感觉NEB的方法更好一些，RT primer 跟3’adapter hybrid看起来更合理。
XPbeads 纯化操作起来也更容易一些。
现在手里有illumina的kit，不知道可不可以用NEB的方法做。
本人菜鸟，请班上有经验的大侠给的建议！
不甚感激！

b*h2013-06-13 07:06

3 楼

出境不影响你的140,如果你能重新申请H/L签证回来,也不影响你的485

其他具体要求嘛?

【在 c******0 的大作中提到】

: 我本月中旬交的EB1A的140和485,现在有急事要回国,还没有收到485收据,更没有AP,出
: 境后H1B也无效了(因为现在在H1B延期的PENDING中),这种情况,离境后,我的I-140申请
: 还有效嘛? 我的I-485还有没有效?
: 如果我取消I-485支票,会不会影响以后再再递交I-485?会不会留下不良记录?
: 由于H1B下个月到期,如果回国,可不可以在美国驻中国广州申请EB1A和NIW嘛? 有什么其他具体要求嘛?

c*b2013-06-13 07:06

4 楼

推荐这个方法，kit太贵，如果样品不多的话不值得。
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22995534

【在 u*******1 的大作中提到】

: 准备做small RNA seq。
: 看了NEB的protocol，跟illumina的protocol，有些不一样。比如1.）连5‘adapter之
: 前，就先让RT primer 跟3’adapter hybrid。2.）推荐XPbeads 纯化而不是PAGE跑胶
: 纯化。
: 个人感觉NEB的方法更好一些，RT primer 跟3’adapter hybrid看起来更合理。
: XPbeads 纯化操作起来也更容易一些。
: 现在手里有illumina的kit，不知道可不可以用NEB的方法做。
: 本人菜鸟，请班上有经验的大侠给的建议！
: 不甚感激！

b*r2013-06-13 07:06

5 楼

just curious how you can come back to USA?

u*12013-06-13 07:06

6 楼

多谢回复！
kit都已经买了，我估计不会用这个方法去搞。
就是想知道这两个kit里的RA3， RA5，RTprimer是不是完全一样的？NEB的会不会里面
多加了什么东西。

c*02013-06-13 07:06

7 楼

不有那们大侠知道嘛！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！

C*Y2013-06-13 07:06

8 楼

It is necessary to perform PAGE purification for small RNA sequencing
library construction. Based on my experience, Ampure XP beads purification
is not sufficient enough to separate 160 bp from 120 bp.

c*02013-06-13 07:06

9 楼

没人知道嘛???????????????????????