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30kb的大质粒，应该如何转染？

30kb的大质粒，应该如何转染？# Biology - 生物学

v*a2016-03-04 08:03

1 楼

两个问题请教：
1、30kb的大质粒，应该如何转染，才能达到最高的转染效率？
2、这个质粒携带的是mouse gene，但是cmv启动子来自于pEGFP-N1质粒，可以转染人细
胞株么？
谢谢！

m*y2016-03-04 08:03

2 楼

1.可以电转吗？
2.没问题

j*92016-03-04 08:03

3 楼

应该取决于你用的是什么细胞，比如293， COS-7这样的很容易就转进去了

b*e2016-03-04 08:03

4 楼

1.对于30kb的质粒，不管是电转还是liposome效率都很难达到很高，即便是293这种好
转的细胞，虽然电转的效率高一点儿，但是这么大的size,在电转的时候会kill掉很大
比例的细胞。所以对于这么大的Size,要想高转染效率，估计只有包成Helper
Dependent Adenoviral Vector.
2.要看你转的是哪种细胞，mouse gene没有问题，但CMV在一些细胞里会表达很差，或
不表达。

v*a2016-03-04 08:03

5 楼

非常感谢各位答复。

v*a2016-03-04 08:03

6 楼

m*y2016-03-04 08:03

7 楼

1.可以电转吗？
2.没问题

j*92016-03-04 08:03

8 楼

应该取决于你用的是什么细胞，比如293， COS-7这样的很容易就转进去了

b*e2016-03-04 08:03