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有没有人在做transporter的帮帮忙
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有没有人在做transporter的帮帮忙# Biology - 生物学
t*d
1
很多年前,在food版上发过自己做的东西,那个时候food版还没什么人,后来就不怎么
来了,最近偶然光顾,被这里的热闹吸引了回来,也跟着版上学过几样菜,一直说把自
己得意的菜拍照发上来的,但是从来没有来得及拍,很得意这次做的韭菜粉条猪肉馅包
子,让老公记得给拍照,最后包子吃完了,照也没拍,就先上方子吧,以后有机会再
show照片。补上张包子的老照片,嘿嘿。向版主索要包子!
材料:猪肉馅半磅,韭菜(2/3把),粉条(1/2把,韩国粉),虾皮,鸡蛋一个
调料:盐,白糖,生抽,白胡椒粉,蚝油,料酒,食用油,香油
这个分量的材料,我蒸了两大锅双层笼的包子。
1。把面发上,发面期间,准备饺子馅。(我是用面包机发的面,有加热功能,所以比
较快,一个半小时)
2。浆粉条,筷子能够夹断后关火,再焖个十多分钟。因为这个馅水少,所以粉条要浆
熟,不然蒸好的包子里的粉条会很硬,不好吃。
3。把韭菜以及浆好的粉条切碎,因为是包子馅,所以不用太碎,半厘米到一厘米都可
以。
4。把猪肉馅和切好的粉条都放在拌馅的不锈钢盆里,放入一小把虾皮,打入一个鸡蛋。
5。加入所有的调料。
6。用一个勺子使劲把所有材料调料拌匀,最重要的是要把肉馅打散至看不到肉团,这
样才能达到菜多肉少不油腻的包子馅的效果。
7。馅准备好了,面也发好了,开始包包子。
8。蒸包子,单层笼,我用了30分钟,双层笼40分钟。(太喜欢我的新炉子了,再也不
用愁火小馒头蒸不好的问题了!)
经验总结:以前的我做包子馅只加几样经典的调料,这次加入了蚝油和虾皮,使包子味
儿鲜了不少。这次的包子,我很赞,嘿嘿。
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S*g
2
当我们发起初禅一段时间,渐渐具足初禅的境界以后,接著我们努力修定,如果有正确
的知见,我们就知道定境中离开五尘境界才是正确的修证,就可以渐次练心,经由无觉
有观三昧进入无觉无观三昧,最后安住在无觉无观三昧中了。当我们娴熟了这个无觉无
观三昧的境界以后,从初禅等持位中想要进入二禅等持位时,就可以迅速地直接进入二
禅等持位中,在等持位中才可以修学神通等等;也就是说,修学神通是在等持位中,并
不是在等至位中。虽然从初禅等持位中要进入二禅的等持位时,可以迅速地直接进入二
禅等持位中;但是想要从初禅等持位重新再进入二禅的等至位中,仍然还要费一番功夫
的等引,才能够进入二禅的等至位中;不像进入二禅的等持位中,是随时随地都可以轻
易进入的。
可是刚证得无觉无观三昧的人,当他住在无觉无观三眛中,心中只要起了一个念;
那个妄念虽然并没有语言文字,只是起了一个念而觉知:“我终于进入无觉无观境界了
,进入了二禅了。”他只要起这么一个念,他立刻就会退回初禅等至位去了。所以,刚
开始是无法安住很久的,心中只要起了一个念,二禅等至境界马上又不见了,又退到初
禅地去了;得要经过很长时间,不断地熏习、不断地锻炼:不断地练习长时间安住的方
法,使自己的心能够在这种比较细的境界当中安住不动。这样长时间的练习,使安住的
时间渐渐地延长;最后很纯熟了以后,才可以藉二禅的定力转入等持位中,以等持位中
的觉知心来修习神通等法。如果还不很熟习等至,就为了住在等持位中办事,而常常提
前在等持位中安住,那么二禅等至的境界将会渐渐地退失,接著就会影响二禅等持位定
力也跟著退失;所以在等至境界还不娴熟时,不可提早运用等持位的功德,以免退失二
禅定力。
可是当我们娴熟二禅等至境界的时候,我们以后想要进入二禅时,都一定是先从初
禅转入二禅的等持位,再藉等引而进入等至位中,这和二禅的修证过程是颠倒过来的。
所以当我们的二禅等至境界练成以后,将来是要先从二禅等持位中修等引,然后才能进
入二禅等至位的;如果我们不是要进入二禅等至位,我们就不必像一般人想的,那么要
打坐很久,就可以很快地从初禅转入二禅的等持位中;如果以前有修习神通成功,就可
以在二禅的等持位中随意现起,并且比以前更胜妙。所以对于二禅等至已经修成的人来
讲,等持位是比等至位更容易进入的;而且证得二禅以后,想要进入二禅的等至位,一
定都要先从二禅等持位切入,然后才切进二禅等至,它的过程正是这样的。以上这些内
容,是唯证乃知的事;这些解说对已经证得初禅的人,想要修证二禅时将会有很大的帮
助。
接下来,让我们作个结论而回到论文。所以,凡是从欲界定、未到地定,进修初禅
、二禅、三禅、四禅,所修得的都是依于形色而修。欲界定是依欲界的肉身而修的,当
欲界定发起的时候,突然间身体被持住而不动摇了;很自然的不会动,让身体很轻松地
坐著,根本不必用力,它自然的就可以安住;身体就像被一层薄薄的膜裹住一样,这一
层薄薄的膜,就像荔枝、龙眼外面粗壳剥掉以后,里面的那一层薄皮一样,它让我们的
身体都不会动摇,把我们的身体很轻安地维持不动;但不是想动而动不了,而是我们想
要安坐不动时,可以非常安定地、轻松地坐著,可以靠著欲界定而使身体不会摇晃;这
就是欲界定的持身法——将我们的色身持住不动。
从欲界定到四禅为止,都是依于形色而修止观;为什么是依于形色呢?因为都是有
色身的法。欲界定依欲界色身而修证,所以欲界肉身坏了,欲界定就无法现起;初禅到
四禅也一样都有色界的天身,也都一样是依于色界天身而修的法;如果色界天身因为我
们不再保持定力而消失了,初禅到四禅的境界也就随著消失了,所以都是依于形色而修
止观。一般人都很宝爱这个身体,但是我们如果要修解脱道,就得要了解:色法越轻越
好,最好是都消失了,才能与无余涅槃相应;境界也是越少越好,境界全部消失了,才
容易与无余涅槃相应。境界越多是越不好的,身体与境界也是越粗重就越差的,越细是
越好的;到最后连形色都不执著,我们才能够进入四空定。
人体的肉身有五脏六腑、三十六物,像个活动的尿桶、屎桶;到了色界天,就全部
都没有五脏六腑,里面是如云如雾的,所以也不吃五谷杂粮,他们都是以禅悦来维持他
的色界天身,所以才叫作禅悦为食。色界天人都不以五谷杂粮为食,都离开团食;他们
的色身越往上进修,里面的如云如雾就越淡薄;越往上到四禅天就越淡薄,但身量却是
越往上一天,就越比下一天要高、要广;这就是说,越往上面对色身的执取性就越淡泊
。如果完全不执著色界身了,就可以转入四空定,那也是不依形色而修的。可是四空定
的修证者,虽然是不依形色,却是依觉知心而修的;因为四空定中,我们的觉知心还在
,了知性还在时,就表示依然是有依觉知心而修的,所以依然不是佛法出世间的真正止
观行门。
初学佛法时,对于六识心的见、闻、嗅、尝、觉、知的功能自性,是很执著的,希
望这六识的功能可以一直地存在。这就是说,我们如果想要修初禅,就得舍弃对鼻舌识
能嗅、能尝的自性的执著,也得舍弃对于男女二根自性的贪著;再往上修,还得要舍弃
对于眼识、耳识、身识的见性、闻性、觉性的执著,才能证得第二禅;再往上修,还得
要舍弃对于欲界身、色界身的执著,才能舍弃身受;必须要经过这些过程,才能进到四
空定的境界,最后才能进入到非想非非想定中。但是这样子,还没办法证得灭尽定,无
法进入无余涅槃;非想非非想定中的极细觉知心、极细意识,还得要再舍弃,才能够取
证灭尽定的,所以对意识觉知心自身的执著也得灭除。
另外值得一提的是:并不是没有语言文字的妄想,就可以叫作无想定。无想定是四
禅后的觉知心的境界,无想定的想字,说的是了知的知,得要把意识心灭了,才是无想
的境界;有些人以为处在欲界定中的觉知心离语言妄想的境界,就是无想,其实是不对
的。第四禅境界也被很多人误会了,总是把觉知心处于无念状态中,就误以为是证得舍
念清净的第四禅,误会真的很大!无想定是从初禅修到四禅之后,再作涅槃想而把第四
禅等至中的觉知心舍掉,却仍然留著色界身与意根,就误以为这是不落入灭尽境界的无
余涅槃,其实这只是无想定。因为觉知心不在了,“知”灭了,所以才叫作无想。这个
“想”是讲“想阴”的“想”,不是讲“打妄想”的想,想阴的想就是意识心的了知性。
无想定,如果要认真说起来,它的境界是比非想非非想定高的,因为它可以把众生
最难舍的觉知心舍弃。可是它的执著性却比非想非非想定的实证者重,因为他执著著四
禅天的天身不肯弃舍,所以无想定的实证者,其实也是依于形色而修止观;因为他不能
舍弃对色界身的执著,所以说他的执著重。非想非非想定的实证者,可以把色界的天身
丢弃,不依形色修止观,所以他的执著显得比较轻;但是他也有知见上的盲点,也就是
执著觉知心的自己,不肯让觉知心的自己灭掉,这就是未断我见的凡夫。当他把了知心
能返观的了知性消除,住在非想非非想定当中,这时候了知心其实仍然还在,只是不返
观自己而已,不知道自己住在非想非非想定当中了;这时候看来似乎是没有“知”存在
了,所以说是“非想”。
可是非想非非想定,为什么又叫作“非非想”呢?非想非非想定,既然没有想阴的
了知性存在,所以说是“非想”;为什么却又说它是“非非想”呢?因为在这个定境中
,他把“知”灭了,所以没有返观自己觉知性仍然存在,他自己以为觉知性确实灭了;
其实还没有灭尽,因为他的我见还在,对意识觉知心自我的执著还存在,还没有灭除,
所以他只是把粗意识灭了,使意识觉知心对自己不起返观觉照;因为想要灭掉觉知性,
所以不起返观自己的了知性,但是由于我见未断的缘故,所以觉知心毕竟还存在,还没
有灭除;所以其实还是有知,也就是还是有想阴,并不是真正的无想,只是不返观自己
而已,所以不是真的无知、无想,这个非想的定境必须加以“非非想”的名称,就合称
为“非想非非想定”。也就是说,他虽然不依形色而修了,但是却依然执著觉知心自己
,我见还没有断,是依觉知心而修。修成非想非非想定时,他只要遇到真善知识,教他
正确的知见与观行法门,把我见确实断了,当场就可以取证灭尽定,使他从外道身、凡
夫身而直接成为俱解脱的大阿罗汉。
所以一般人,都是依形色而修止观的,修成的止观境界当然就成为外道或凡夫境界
。所以不真正了解佛法而修止观的人,往往是依觉知心、想阴而修止观的;而真正修止
观的人,是不依形色、也不依觉知心而修止观的,是依法界实相本源的第八识如来藏而
修止观的。所以,必须依于法界实相如来藏来修止观,才是真正修止观的人。
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O*e
3
手头上一个比较有意思的基因,理论上来说是编码一个 transporter。但相关的功能研究
一个没有,所以根本不能确认它究竟是不是transporter;如果是,究竟转运什么分子,
也是一无所知。
做这方面的XDJM能不能给点建议。对这个领域一点不懂,google的结果还是一团糟。
其实我最想知道的如何鉴定它的作用分子,看是不是会真的跟癌症相关。
谢谢!
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l*z
4
咦,那两个是啥形状?有什么说头?
獭獭快发,啦啦啦,我坐沙发啦
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c*7
5
同学习。。。
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q*r
6
奔包子,不是都要先咬一口么?
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s*e
7
Blast出来最近接近的已知功能蛋白是啥?
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b*t
8
赞!(带包子)

【在 t*********d 的大作中提到】
: 很多年前,在food版上发过自己做的东西,那个时候food版还没什么人,后来就不怎么
: 来了,最近偶然光顾,被这里的热闹吸引了回来,也跟着版上学过几样菜,一直说把自
: 己得意的菜拍照发上来的,但是从来没有来得及拍,很得意这次做的韭菜粉条猪肉馅包
: 子,让老公记得给拍照,最后包子吃完了,照也没拍,就先上方子吧,以后有机会再
: show照片。补上张包子的老照片,嘿嘿。向版主索要包子!
: 材料:猪肉馅半磅,韭菜(2/3把),粉条(1/2把,韩国粉),虾皮,鸡蛋一个
: 调料:盐,白糖,生抽,白胡椒粉,蚝油,料酒,食用油,香油
: 这个分量的材料,我蒸了两大锅双层笼的包子。
: 1。把面发上,发面期间,准备饺子馅。(我是用面包机发的面,有加热功能,所以比
: 较快,一个半小时)

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m*5
9
弱弱地说以前做过importin,不过楼主这个transporter是什么?
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b*t
10
獭獭刚刚在刷牙。。。

【在 l*****z 的大作中提到】
: 咦,那两个是啥形状?有什么说头?
: 獭獭快发,啦啦啦,我坐沙发啦

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a*e
11
GFP fusion first
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L*4
12
这个陷,我喜欢。。。
嘿嘿,俺家乡就有这样陷的水煎包。。。
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O*e
13
中文应该是 “膜运输蛋白”。其实对这个蛋白的研究非常有限,只知道大体是定位在
膜上,有超过10个transmembrane domains。最近我们发现它的编码基因在很多肿瘤里
存在突变。在细胞里面knockdown后细胞增殖明显加快。
我就是想尽快知道它的分子功能,它到底“运输”什么分子。。。

【在 m******5 的大作中提到】
: 弱弱地说以前做过importin,不过楼主这个transporter是什么?
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t*d
14
那是我老公包的元宝包子,他当时第一次学包包子,那是他的自创,好像是他包馄饨的
方法,呵呵。

【在 l*****z 的大作中提到】
: 咦,那两个是啥形状?有什么说头?
: 獭獭快发,啦啦啦,我坐沙发啦

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m*5
15
什么膜,golgi?ER?如果是ER的话可做的东西就丰富了因为不光可以转移东西到核膜上
还可能relavent to ER stress
另外,楼主能看见明显的ER/Golgi/cell membrane定位么?

【在 O******e 的大作中提到】
: 中文应该是 “膜运输蛋白”。其实对这个蛋白的研究非常有限,只知道大体是定位在
: 膜上,有超过10个transmembrane domains。最近我们发现它的编码基因在很多肿瘤里
: 存在突变。在细胞里面knockdown后细胞增殖明显加快。
: 我就是想尽快知道它的分子功能,它到底“运输”什么分子。。。

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t*d
16
当时包子刚出锅,太烫了,先拍了照,然后才咬的 :)

【在 q****r 的大作中提到】
: 奔包子,不是都要先咬一口么?
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O*e
17
理论上来说应该是plasma membrane。但究竟是哪里,现在还不清楚。这个蛋白比较
讨厌的一点是没有能用的抗体。能有了我都试了,就是不行。

【在 m******5 的大作中提到】
: 什么膜,golgi?ER?如果是ER的话可做的东西就丰富了因为不光可以转移东西到核膜上
: 还可能relavent to ER stress
: 另外,楼主能看见明显的ER/Golgi/cell membrane定位么?

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t*d
18
哈哈,谢谢谢谢!

【在 b*******t 的大作中提到】
: 赞!(带包子)
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O*e
19
有一个报道把它算成一个solute carrier (SLC)

【在 s*******e 的大作中提到】
: Blast出来最近接近的已知功能蛋白是啥?
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l*z
20
刷完香香的让我亲一口!!mu-ah~~~~~

【在 b*******t 的大作中提到】
: 獭獭刚刚在刷牙。。。
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m*5
21
in-Vivo表达pattern?或许能有点clue
没有抗体这么说你一直是用overexpressiong +tag看的?

【在 O******e 的大作中提到】
: 理论上来说应该是plasma membrane。但究竟是哪里,现在还不清楚。这个蛋白比较
: 讨厌的一点是没有能用的抗体。能有了我都试了,就是不行。

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t*d
22
俺们也有呀,怀念水煎包呀!

【在 L******4 的大作中提到】
: 这个陷,我喜欢。。。
: 嘿嘿,俺家乡就有这样陷的水煎包。。。

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O*e
23
mRNA水平的检测是绝大多数组织都表达。其实我才刚开始关注它。很多都是未知。
我其实很想知道它到底运输些啥分子,看有没有挖下去的必要。

【在 m******5 的大作中提到】
: in-Vivo表达pattern?或许能有点clue
: 没有抗体这么说你一直是用overexpressiong +tag看的?

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b*t
24
不要。。。好多人。。。。

【在 l*****z 的大作中提到】
: 刷完香香的让我亲一口!!mu-ah~~~~~
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m*5
25
找做果蝇的人搞个epistatic interaction screen挖一下? ^皿^

【在 O******e 的大作中提到】
: mRNA水平的检测是绝大多数组织都表达。其实我才刚开始关注它。很多都是未知。
: 我其实很想知道它到底运输些啥分子,看有没有挖下去的必要。

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L*e
26
好吃。: )

【在 t*********d 的大作中提到】
: 很多年前,在food版上发过自己做的东西,那个时候food版还没什么人,后来就不怎么
: 来了,最近偶然光顾,被这里的热闹吸引了回来,也跟着版上学过几样菜,一直说把自
: 己得意的菜拍照发上来的,但是从来没有来得及拍,很得意这次做的韭菜粉条猪肉馅包
: 子,让老公记得给拍照,最后包子吃完了,照也没拍,就先上方子吧,以后有机会再
: show照片。补上张包子的老照片,嘿嘿。向版主索要包子!
: 材料:猪肉馅半磅,韭菜(2/3把),粉条(1/2把,韩国粉),虾皮,鸡蛋一个
: 调料:盐,白糖,生抽,白胡椒粉,蚝油,料酒,食用油,香油
: 这个分量的材料,我蒸了两大锅双层笼的包子。
: 1。把面发上,发面期间,准备饺子馅。(我是用面包机发的面,有加热功能,所以比
: 较快,一个半小时)

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O*e
27
你让我一做老鼠的去找做果蝇的帮忙。。。。

【在 m******5 的大作中提到】
: 找做果蝇的人搞个epistatic interaction screen挖一下? ^皿^
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s*7
28
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m*5
29
弱弱地补一句,手边有没有EMT的模型可以用呢?
膜蛋白说不定和EMT有关系,往往也是proliferation rate的upstream event

【在 O******e 的大作中提到】
: 你让我一做老鼠的去找做果蝇的帮忙。。。。
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a*a
30
30分钟?太长时间了吧
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O*e
31
这个是有可能,不过我没有实验数据支持啊。
看来我只有先去把它的细胞定位搞搞清楚先。。。

【在 m******5 的大作中提到】
: 弱弱地补一句,手边有没有EMT的模型可以用呢?
: 膜蛋白说不定和EMT有关系,往往也是proliferation rate的upstream event

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w*e
32
馋死我了,想起了家乡的味道。
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m*5
33
BTW,楼主能不能帮我看一下BAC 那个帖子……

【在 O******e 的大作中提到】
: 这个是有可能,不过我没有实验数据支持啊。
: 看来我只有先去把它的细胞定位搞搞清楚先。。。

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w*o
34
我最喜欢的馅了。馋阿
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a*x
35
审查过类似的项目。有很多TMEM都是很robust的oncogene,有些是离子通道,有些是
transporter。建议你还是把每个transmembrane的aa sequence 分别blast一下,看有
什么类似的。然后做些简单的flux assay就可以验证是不是transport类似的东西。以
前有个项目,就只有中间两个helix和N2 transporter比较接近,结果transporting的
物质和N2一样。
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O*e
36
多谢。曾有人推断说可能是某些糖类的转运蛋白。但没有直接证据。看来得找人合作
看看flux assay会是什么结果了。

【在 a*****x 的大作中提到】
: 审查过类似的项目。有很多TMEM都是很robust的oncogene,有些是离子通道,有些是
: transporter。建议你还是把每个transmembrane的aa sequence 分别blast一下,看有
: 什么类似的。然后做些简单的flux assay就可以验证是不是transport类似的东西。以
: 前有个项目,就只有中间两个helix和N2 transporter比较接近,结果transporting的
: 物质和N2一样。

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a*x
37
传统的flux assay用同位素,很容易做的,只需要能读放射性的仪器就行了
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s*e
38
对于癌症,营养物和药物的转运体可能性最大,不过这个筛起来不太容易。能够异源过
表达吗?

【在 O******e 的大作中提到】
: 多谢。曾有人推断说可能是某些糖类的转运蛋白。但没有直接证据。看来得找人合作
: 看看flux assay会是什么结果了。

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b*s
39
超过10个transmembrane domains? 我PhD做的就是个cationic amino acid
transporter, 14 transmembrane domains, 但和肿瘤没关系。

【在 O******e 的大作中提到】
: 中文应该是 “膜运输蛋白”。其实对这个蛋白的研究非常有限,只知道大体是定位在
: 膜上,有超过10个transmembrane domains。最近我们发现它的编码基因在很多肿瘤里
: 存在突变。在细胞里面knockdown后细胞增殖明显加快。
: 我就是想尽快知道它的分子功能,它到底“运输”什么分子。。。

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b*s
40
越说越象我做的那个,也是到现在都没有商用抗体,我们和其他实验室合成了好些都不
work,一定要用tag。有knockout mice 的信息吗?我做的那个,homologous knockout
,老鼠出生第一天就死掉,严重贫血还比wt小1/4;heterozygous knockout没事,被家
族里的其他蛋白代偿了

【在 O******e 的大作中提到】
: 理论上来说应该是plasma membrane。但究竟是哪里,现在还不清楚。这个蛋白比较
: 讨厌的一点是没有能用的抗体。能有了我都试了,就是不行。

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b*s
41
哈,果然是同个family的,不是同一个也相当接近了

【在 O******e 的大作中提到】
: 有一个报道把它算成一个solute carrier (SLC)
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O*e
42
过表达还没做呢。下一步要做。我现在就是先挑几个试试体外实验,然后看是不是需要
上老鼠。

【在 s*******e 的大作中提到】
: 对于癌症,营养物和药物的转运体可能性最大,不过这个筛起来不太容易。能够异源过
: 表达吗?

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O*e
43
如果有了knockout mouse我就不会感兴趣了。它的功能几乎是一无所知,我们手头上的
数据也只有筛选和RNAi的结果。我感觉它可能跟药物运输有关,所以对它的兴趣比其它
筛出的基因更感兴趣

knockout

【在 b******s 的大作中提到】
: 越说越象我做的那个,也是到现在都没有商用抗体,我们和其他实验室合成了好些都不
: work,一定要用tag。有knockout mice 的信息吗?我做的那个,homologous knockout
: ,老鼠出生第一天就死掉,严重贫血还比wt小1/4;heterozygous knockout没事,被家
: 族里的其他蛋白代偿了

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f*u
44
我觉得首先要看看这个蛋白的细胞定位到底是不是在膜上。
加个tag然后在细胞里表达看看应该就可以知道了,tag必须加在C端。
如果确定是在细胞膜上,可以考虑用爪蟾卵母细胞作为表达系统。
这东西非常大,而且背景膜蛋白表达很低,很适合精确测量你感兴趣的膜蛋白的功能。

【在 O******e 的大作中提到】
: 如果有了knockout mouse我就不会感兴趣了。它的功能几乎是一无所知,我们手头上的
: 数据也只有筛选和RNAi的结果。我感觉它可能跟药物运输有关,所以对它的兴趣比其它
: 筛出的基因更感兴趣
:
: knockout

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Z*o
45
这个需要用电生理的实验平台测定,专门有做离子通道鉴定的实验室,咱们私信联系吧
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i*l
46
agree this, partially, and zan the upstairs suggestion on frog oocytes
1. localization
2. in vitro function, and mutagenesis
xenopus oocyte is my #1 suggestion, HEK293 , ,,,,,
radio activity labeled substrate uptake should be easier if it's neutral
transporter
NOTE electrophysiology requires special training, but it works well ,as long
as target transports ionic stuffs or is ph dependent
3. in vivo funtion
btw it could be channel instead of transporter, who knows
btw, you'd better determine the # of transmembrane domains, which will be
very helpful info for your functional assays
i have been doing channels and transporters for many years,
pm if you have specific q

【在 Z****o 的大作中提到】
: 这个需要用电生理的实验平台测定,专门有做离子通道鉴定的实验室,咱们私信联系吧
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a*x
47
人家都没说是ion transporter。

【在 Z****o 的大作中提到】
: 这个需要用电生理的实验平台测定,专门有做离子通道鉴定的实验室,咱们私信联系吧
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l*1
48
人家得 patch clamp can record any item in and out of any transporter?

【在 a*****x 的大作中提到】
: 人家都没说是ion transporter。
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a*x
49
patch-clamp只能记录电压电流,如果不是离子transporter,或者至少是离子相关
transporter (比如有争议的NH3 transporter)怎么会有信号。

【在 l**********1 的大作中提到】
: 人家得 patch clamp can record any item in and out of any transporter?
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l*1
50
没看见 question mark ? 老大 反语 你没看出来

【在 a*****x 的大作中提到】
: patch-clamp只能记录电压电流,如果不是离子transporter,或者至少是离子相关
: transporter (比如有争议的NH3 transporter)怎么会有信号。

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t*1
51
Currently the transporters can be divided into two major classes: efflux (
ABC) transporter and uptake (SLC) transporter. The basic function of efflux
transporter is to expel the molecules out of cells, and that of uptake
transporter is to bring the molecules into the cells.
Based on your description, I have some thouhghts, and let us discuss them.
1. Find the cell line with the normal expression of this enzyme (wild-type);
establish or obtain the gene knock-down cell line of the wild type;
2. Incubate the two cell lines with number of anti-cancer drugs with certain
period of time.
3. Lyse the cells; analyze the amount of drugs in the cell lysate.
4. If the enzyme functions as an efflux transporter, pay attention to the
drug that is higher in the knock-down cell line than the wild-type
If the enzyme functions as an uptake transporter, pay attention to the drug
that is lower in the knock-down cell line than the wild-type.

研究
子,

【在 O******e 的大作中提到】
: 手头上一个比较有意思的基因,理论上来说是编码一个 transporter。但相关的功能研究
: 一个没有,所以根本不能确认它究竟是不是transporter;如果是,究竟转运什么分子,
: 也是一无所知。
: 做这方面的XDJM能不能给点建议。对这个领域一点不懂,google的结果还是一团糟。
: 其实我最想知道的如何鉴定它的作用分子,看是不是会真的跟癌症相关。
: 谢谢!

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O*e
52
抗癌药那么多,拿哪些来试是个头疼事啊。不过我现在倒有个药正在试,希望能得到点
结果。

efflux
);
certain

【在 t**********1 的大作中提到】
: Currently the transporters can be divided into two major classes: efflux (
: ABC) transporter and uptake (SLC) transporter. The basic function of efflux
: transporter is to expel the molecules out of cells, and that of uptake
: transporter is to bring the molecules into the cells.
: Based on your description, I have some thouhghts, and let us discuss them.
: 1. Find the cell line with the normal expression of this enzyme (wild-type);
: establish or obtain the gene knock-down cell line of the wild type;
: 2. Incubate the two cell lines with number of anti-cancer drugs with certain
: period of time.
: 3. Lyse the cells; analyze the amount of drugs in the cell lysate.

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l*1
53
sure
add one recent paper
Levy S at al. (2011)
The competitive advantage of a dual-transporter system.
Science. 334: 1408-12.
Abstract
Cells use transporters of different affinities to regulate nutrient influx.
When nutrients are depleted, low-affinity transporters are replaced by high-
affinity ones. High-affinity transporters are helpful when concentrations of
nutrients are low, but the advantage of reducing their abundance when
nutrients are abundant is less clear. When we eliminated such reduced
production of the Saccharomyces cerevisiae high-affinity transporters for
phosphate and zinc, the elapsed time from the initiation of the starvation
program until the lack of nutrients limited growth was shortened, and
recovery from starvation was delayed. The latter phenotype was rescued by
constitutive activation of the starvation program. Dual-transporter systems
appear to prolong preparation for starvation and to facilitate subsequent
recovery, which may optimize sensing of nutrient depletion by integrating
internal and external information about nutrient availability.
link:
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22158820

efflux
);
certain

【在 t**********1 的大作中提到】
: Currently the transporters can be divided into two major classes: efflux (
: ABC) transporter and uptake (SLC) transporter. The basic function of efflux
: transporter is to expel the molecules out of cells, and that of uptake
: transporter is to bring the molecules into the cells.
: Based on your description, I have some thouhghts, and let us discuss them.
: 1. Find the cell line with the normal expression of this enzyme (wild-type);
: establish or obtain the gene knock-down cell line of the wild type;
: 2. Incubate the two cell lines with number of anti-cancer drugs with certain
: period of time.
: 3. Lyse the cells; analyze the amount of drugs in the cell lysate.

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t*1
54
Some routinely-used drugs, such as cis-platin, daunorubicin, doxorubicin,
etoposide,
Since this will be a novel enzyme, trial and error are normal.

【在 O******e 的大作中提到】
: 抗癌药那么多,拿哪些来试是个头疼事啊。不过我现在倒有个药正在试,希望能得到点
: 结果。
:
: efflux
: );
: certain

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