问个蛋白保存的问题# Biology - 生物学b*k2014-04-10 07:041 楼我想象挤酸汤子那么挤面条,刷刷刷地面条很方便地就下锅多好。可不知道,这个面得和得多干多稀才能既省事儿,掉沸水里又能成条(而不是化成浆糊),也许面里加点蛋液能有助于迅速成型
s*e2014-04-10 07:043 楼一直用VEGF作angiogenesis assay,每次我拿到厂家寄来的pwder,用PBS配成 20ng/uL的solution,aliquote, 冻在-20冰箱。每次最开始的动物或者细胞实验都很好,几个星期后用很多时候就没有效果。最近刚刚因为这损失大批老鼠。问朋友,朋友说是因为我配的溶液太稀,蛋白都负在了eppendorf tube的壁上面。问大家谁做过的怎么解决的?
m*D2014-04-10 07:045 楼类似的情况下,我们会加BSA(Roche的比较好,也比较贵)。另外,stock solution总是高浓度一些,要用的时候再dilute。有些protein,还用silanized tube来长齐-70度保存的。
b*d2014-04-10 07:046 楼如果是No cost的,能省到0.25%以上的就值。最近的利率还算稳定,应该涨不到哪里去。【在 m***o 的大作中提到】: 我目前的贷款利率是5%, 不知道值不值得refinance成4.75(no point). 利率还可能降: 吗?
D*s2014-04-10 07:047 楼要配成stock solution,最好存储在-80度,能加glycerol会更好,使用时再稀释低浓度的蛋白质很容易变性uL【在 s**********e 的大作中提到】: 一直用VEGF作angiogenesis assay,每次我拿到厂家寄来的pwder,用PBS配成 20ng/uL: 的solution,aliquote, 冻在-20冰箱。: 每次最开始的动物或者细胞实验都很好,几个星期后用很多时候就没有效果。最近刚刚: 因为这损失大批老鼠。: 问朋友,朋友说是因为我配的溶液太稀,蛋白都负在了eppendorf tube的壁上面。问大: 家谁做过的怎么解决的?
s*y2014-04-10 07:049 楼对,应该配在0.2% BSA/PBS里。而且楼主配的stock solution浓度也太低了,我们一般至少也要搞个5ug/ul stock.20ng/ul 太过分的低了【在 m*********D 的大作中提到】: 类似的情况下,我们会加BSA(Roche的比较好,也比较贵)。另外,stock solution总: 是高浓度一些,要用的时候再dilute。有些protein,还用silanized tube来长齐-70度: 保存的。
s*e2014-04-10 07:0410 楼买的蛋白每次只有5 ug,250美元左右【在 s******y 的大作中提到】: 对,应该配在0.2% BSA/PBS里。: 而且楼主配的stock solution浓度也太低了,我们一般至少也要搞个5ug/ul stock.: 20ng/ul 太过分的低了
s*e2014-04-10 07:0412 楼别的公司有便宜的,用过一次,动物实验完全没有效果,就一直在用R&D的。做薄厚的时候,动物实验砸了,就当没有发生过,反正实验室很大;自己独立半年到现在,动物实验砸一次,会压力很大,不仅是science也是money的大问题。【在 s******y 的大作中提到】: 哦,这么贵。。。: 相比之下我们用的HGF太便宜了。