【问】Qiagen Gel extraction kit 以及Neb Q5/Phusion master# Biology - 生物学
n*h
1 楼
一会儿wifi连着没有internet，一会儿LAN连着没有internet。重启都能恢复，估计是
系统设计不行，郁闷。估计要rma或者退。
他家东西不靠谱。
系统设计不行，郁闷。估计要rma或者退。
他家东西不靠谱。
w*a
2 楼
一直以来的一个问题：
PCR产物如果用Qiagen kit切胶提纯后，再作为Template,用Neb的Q5或者Phusion继续做
PCR （尤其条带比较长的时候），经常做不出来。打电话问了一下Neb的technician。
他们说他们也发现了这个问题
。他们觉得可能是Qiagen kit提纯后，最后的elute里面有某种inhibitor影响了后续
PCR的反应。但是他们也没有想出有效的办法来解决这个问题。
不知道版上的牛牛们有没有遇到类似的问题？是怎么解决的？另外，有别的公司的Gel
extraction kit会避免这个问题吗？
多谢！
PCR产物如果用Qiagen kit切胶提纯后，再作为Template,用Neb的Q5或者Phusion继续做
PCR （尤其条带比较长的时候），经常做不出来。打电话问了一下Neb的technician。
他们说他们也发现了这个问题
。他们觉得可能是Qiagen kit提纯后，最后的elute里面有某种inhibitor影响了后续
PCR的反应。但是他们也没有想出有效的办法来解决这个问题。
不知道版上的牛牛们有没有遇到类似的问题？是怎么解决的？另外，有别的公司的Gel
extraction kit会避免这个问题吗？
多谢！
b*x
3 楼
用过它家的router，各种问题。换掉。 后来又用它家的 adapter,
又经常掉线。 thats it, 以后我都不用它家的东西。
免费都不用
【在 n******h 的大作中提到】
: 一会儿wifi连着没有internet，一会儿LAN连着没有internet。重启都能恢复，估计是
: 系统设计不行，郁闷。估计要rma或者退。
: 他家东西不靠谱。
又经常掉线。 thats it, 以后我都不用它家的东西。
免费都不用
【在 n******h 的大作中提到】
: 一会儿wifi连着没有internet，一会儿LAN连着没有internet。重启都能恢复，估计是
: 系统设计不行，郁闷。估计要rma或者退。
: 他家东西不靠谱。
x*e
4 楼
zymo 我再也不用QIAGEN的胶回收kit了，各种问题
Gel
【在 w********a 的大作中提到】
: 一直以来的一个问题：
: PCR产物如果用Qiagen kit切胶提纯后，再作为Template,用Neb的Q5或者Phusion继续做
: PCR （尤其条带比较长的时候），经常做不出来。打电话问了一下Neb的technician。
: 他们说他们也发现了这个问题
: 。他们觉得可能是Qiagen kit提纯后，最后的elute里面有某种inhibitor影响了后续
: PCR的反应。但是他们也没有想出有效的办法来解决这个问题。
: 不知道版上的牛牛们有没有遇到类似的问题？是怎么解决的？另外，有别的公司的Gel
: extraction kit会避免这个问题吗？
: 多谢！
Gel
【在 w********a 的大作中提到】
: 一直以来的一个问题：
: PCR产物如果用Qiagen kit切胶提纯后，再作为Template,用Neb的Q5或者Phusion继续做
: PCR （尤其条带比较长的时候），经常做不出来。打电话问了一下Neb的technician。
: 他们说他们也发现了这个问题
: 。他们觉得可能是Qiagen kit提纯后，最后的elute里面有某种inhibitor影响了后续
: PCR的反应。但是他们也没有想出有效的办法来解决这个问题。
: 不知道版上的牛牛们有没有遇到类似的问题？是怎么解决的？另外，有别的公司的Gel
: extraction kit会避免这个问题吗？
: 多谢！
t*t
5 楼
我的linksys的也是烂得一逼。
现在发现就netgear的还行。
现在发现就netgear的还行。
a*a
6 楼
最后一步你用水还是elution buffer?
我猜用水就好了
Gel
【在 w********a 的大作中提到】
: 一直以来的一个问题：
: PCR产物如果用Qiagen kit切胶提纯后，再作为Template,用Neb的Q5或者Phusion继续做
: PCR （尤其条带比较长的时候），经常做不出来。打电话问了一下Neb的technician。
: 他们说他们也发现了这个问题
: 。他们觉得可能是Qiagen kit提纯后，最后的elute里面有某种inhibitor影响了后续
: PCR的反应。但是他们也没有想出有效的办法来解决这个问题。
: 不知道版上的牛牛们有没有遇到类似的问题？是怎么解决的？另外，有别的公司的Gel
: extraction kit会避免这个问题吗？
: 多谢！
我猜用水就好了
Gel
【在 w********a 的大作中提到】
: 一直以来的一个问题：
: PCR产物如果用Qiagen kit切胶提纯后，再作为Template,用Neb的Q5或者Phusion继续做
: PCR （尤其条带比较长的时候），经常做不出来。打电话问了一下Neb的technician。
: 他们说他们也发现了这个问题
: 。他们觉得可能是Qiagen kit提纯后，最后的elute里面有某种inhibitor影响了后续
: PCR的反应。但是他们也没有想出有效的办法来解决这个问题。
: 不知道版上的牛牛们有没有遇到类似的问题？是怎么解决的？另外，有别的公司的Gel
: extraction kit会避免这个问题吗？
: 多谢！
X*l
7 楼
你可以试试clonetech的，我觉得比qiagen的好，至少我用从来没出过问题
s*s
8 楼
我说了有20遍了，qiagen gel extraction以后，通通过一遍minElute浓缩换buffer
Gel
【在 w********a 的大作中提到】
: 一直以来的一个问题：
: PCR产物如果用Qiagen kit切胶提纯后，再作为Template,用Neb的Q5或者Phusion继续做
: PCR （尤其条带比较长的时候），经常做不出来。打电话问了一下Neb的technician。
: 他们说他们也发现了这个问题
: 。他们觉得可能是Qiagen kit提纯后，最后的elute里面有某种inhibitor影响了后续
: PCR的反应。但是他们也没有想出有效的办法来解决这个问题。
: 不知道版上的牛牛们有没有遇到类似的问题？是怎么解决的？另外，有别的公司的Gel
: extraction kit会避免这个问题吗？
: 多谢！
Gel
【在 w********a 的大作中提到】
: 一直以来的一个问题：
: PCR产物如果用Qiagen kit切胶提纯后，再作为Template,用Neb的Q5或者Phusion继续做
: PCR （尤其条带比较长的时候），经常做不出来。打电话问了一下Neb的technician。
: 他们说他们也发现了这个问题
: 。他们觉得可能是Qiagen kit提纯后，最后的elute里面有某种inhibitor影响了后续
: PCR的反应。但是他们也没有想出有效的办法来解决这个问题。
: 不知道版上的牛牛们有没有遇到类似的问题？是怎么解决的？另外，有别的公司的Gel
: extraction kit会避免这个问题吗？
: 多谢！
w*a
9 楼
一直用水。但还是有这个问题。
【在 a*******a 的大作中提到】
: 最后一步你用水还是elution buffer?
: 我猜用水就好了
:
: Gel
【在 a*******a 的大作中提到】
: 最后一步你用水还是elution buffer?
: 我猜用水就好了
:
: Gel
w*a
10 楼
你是说搞两遍吗？一般的Qiagen gel kit搞一遍，再用MiniElute的column搞一遍？
钱啊！MiniElute kit好贵啊！
【在 s******s 的大作中提到】
: 我说了有20遍了，qiagen gel extraction以后，通通过一遍minElute浓缩换buffer
:
: Gel
钱啊！MiniElute kit好贵啊！
【在 s******s 的大作中提到】
: 我说了有20遍了，qiagen gel extraction以后，通通过一遍minElute浓缩换buffer
:
: Gel
a*a
11 楼
是么。，， 额
我以前在国内用天根的加q5一直挺好的，到了美国换了q家的就不行了。。
【在 w********a 的大作中提到】
: 一直用水。但还是有这个问题。
我以前在国内用天根的加q5一直挺好的，到了美国换了q家的就不行了。。
【在 w********a 的大作中提到】
: 一直用水。但还是有这个问题。
H*g
12 楼
PCR产物为什么要用切胶提纯，而不直接用Qiagen PCR Purification Kit提纯？
Gel
【在 w********a 的大作中提到】
: 一直以来的一个问题：
: PCR产物如果用Qiagen kit切胶提纯后，再作为Template,用Neb的Q5或者Phusion继续做
: PCR （尤其条带比较长的时候），经常做不出来。打电话问了一下Neb的technician。
: 他们说他们也发现了这个问题
: 。他们觉得可能是Qiagen kit提纯后，最后的elute里面有某种inhibitor影响了后续
: PCR的反应。但是他们也没有想出有效的办法来解决这个问题。
: 不知道版上的牛牛们有没有遇到类似的问题？是怎么解决的？另外，有别的公司的Gel
: extraction kit会避免这个问题吗？
: 多谢！
Gel
【在 w********a 的大作中提到】
: 一直以来的一个问题：
: PCR产物如果用Qiagen kit切胶提纯后，再作为Template,用Neb的Q5或者Phusion继续做
: PCR （尤其条带比较长的时候），经常做不出来。打电话问了一下Neb的technician。
: 他们说他们也发现了这个问题
: 。他们觉得可能是Qiagen kit提纯后，最后的elute里面有某种inhibitor影响了后续
: PCR的反应。但是他们也没有想出有效的办法来解决这个问题。
: 不知道版上的牛牛们有没有遇到类似的问题？是怎么解决的？另外，有别的公司的Gel
: extraction kit会避免这个问题吗？
: 多谢！
M*g
13 楼
Probably you got too much salt in your DNA after the qiagen gel kit.
Use PE washed twice and in each PE wash, after you add PE, let it stay for 2
-3 min before you spin.
Use PE washed twice and in each PE wash, after you add PE, let it stay for 2
-3 min before you spin.
x*e
14 楼
话说Tiagen是山寨版吗？我在国内用得也挺好，上QIAGEN死活有问题。
【在 a*******a 的大作中提到】
: 是么。，， 额
: 我以前在国内用天根的加q5一直挺好的，到了美国换了q家的就不行了。。
【在 a*******a 的大作中提到】
: 是么。，， 额
: 我以前在国内用天根的加q5一直挺好的，到了美国换了q家的就不行了。。
a*a
15 楼
很多年前被q家收购了，他们销售说用的柱子都是一样的。
【在 x********e 的大作中提到】
: 话说Tiagen是山寨版吗？我在国内用得也挺好，上QIAGEN死活有问题。
【在 x********e 的大作中提到】
: 话说Tiagen是山寨版吗？我在国内用得也挺好，上QIAGEN死活有问题。
H*g
16 楼
It may be due to the remaining agarose and its residues in the elution. Try
Qiagen PCR Purification Kit to purify your products. It may solve your
problem.
Gel
【在 w********a 的大作中提到】
: 一直以来的一个问题：
: PCR产物如果用Qiagen kit切胶提纯后，再作为Template,用Neb的Q5或者Phusion继续做
: PCR （尤其条带比较长的时候），经常做不出来。打电话问了一下Neb的technician。
: 他们说他们也发现了这个问题
: 。他们觉得可能是Qiagen kit提纯后，最后的elute里面有某种inhibitor影响了后续
: PCR的反应。但是他们也没有想出有效的办法来解决这个问题。
: 不知道版上的牛牛们有没有遇到类似的问题？是怎么解决的？另外，有别的公司的Gel
: extraction kit会避免这个问题吗？
: 多谢！
Qiagen PCR Purification Kit to purify your products. It may solve your
problem.
Gel
【在 w********a 的大作中提到】
: 一直以来的一个问题：
: PCR产物如果用Qiagen kit切胶提纯后，再作为Template,用Neb的Q5或者Phusion继续做
: PCR （尤其条带比较长的时候），经常做不出来。打电话问了一下Neb的technician。
: 他们说他们也发现了这个问题
: 。他们觉得可能是Qiagen kit提纯后，最后的elute里面有某种inhibitor影响了后续
: PCR的反应。但是他们也没有想出有效的办法来解决这个问题。
: 不知道版上的牛牛们有没有遇到类似的问题？是怎么解决的？另外，有别的公司的Gel
: extraction kit会避免这个问题吗？
: 多谢！
x*e
17 楼
lz既然说要胶回收做PCR，大概率是有non-specific bands。
Try
【在 H*g 的大作中提到】
: It may be due to the remaining agarose and its residues in the elution. Try
: Qiagen PCR Purification Kit to purify your products. It may solve your
: problem.
:
: Gel
Try
【在 H*g 的大作中提到】
: It may be due to the remaining agarose and its residues in the elution. Try
: Qiagen PCR Purification Kit to purify your products. It may solve your
: problem.
:
: Gel
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