细胞系里沉默的基因，启动子在该细胞系里也是沉默的吗？# Biology - 生物学
s*1
1 楼
这星期一连几个phone screen，感觉有好的坏的，但完了后都没消息了，发的感谢信也
没回，好像都一个模式，好坏也该说声吧，yes,no,maybe..
大家都有什么经历呀，等多久有回音？
没回，好像都一个模式，好坏也该说声吧，yes,no,maybe..
大家都有什么经历呀，等多久有回音？
j*2
2 楼
不需要direct deposit的那种。
多谢了。
多谢了。
d*o
3 楼
从昨天发帖以后收到很多邮件,大家都问了很多自己关心的问题,我也不一个一个回信了
,就都写在这
里了.希望对大家有所帮助.
首先俺家LD是材料学背景（找工作难呀，尤其没有身份，所以引用率不高）
09年博士毕业后在一个startup从事研究工作
工作一年后公司给办绿卡，期间先是和公司律师联系，但是无奈公司律师没有什么经验
，LD就和公司
谈可以不可以自己找律师，几经周折，最后公司答应他们出钱，我们自己找律师，也是
在版上看了很
久，得到很多人的帮助，才发信问了3个口碑比较好的律师评估EB1b，最后都说可以，
我们就选定了
口碑最好的，也是最保守的刘宗坤律师，但实际上干活的是pai
在和律师签订完合同（因为签了保密合同，所以无法把一些东西和大家分享），付了一
半钱以后，LD
才开始要review ，找过自己博士期间的老板，但是帮助不大，LD就把所有和他专业相
关的杂志搜索
出来，一个一个的发信，就这样发了很多轮，从杂志的主编到副主编，一般一轮下来就
会有几篇，就
这样从5月底到9月底，有了20+的review ，要review的时候最好找主编，而且干活要快
，要好，
这个对我们来说真的帮了很大的忙，在我们要推荐信快绝望的时候，一个很牛的杂志的
主编帮助了我
们，我们不报希望的问问是否可以做我们的推荐人，结果人家爽快的答应了，而且我们
给他推荐信，
当天就给了我们回复。
其实整个绿卡申请过程中，最难的就是review 和要推荐信。
我们的推荐信也是pai写的，还不错，只有一个推荐人说太长了。要推荐信的整个过程
持续了3个月，
因为时间不好，赶上了暑假，一些教授就不太好找了，我们的推荐信只有一个是中国的
，其它都是美
国当地的，其它国家的太难找了，好不容易找了一个韩国教授，一开始答应了，后来又
反悔了，因为
专业不是很好，所以引用率不高，引用的国家也很少，最后我们放弃了多国选择，就主
攻当地了。感
觉推荐信就是耗时间，不过好像EB1b对推荐信的要求不是特别的高。
祝福大家都一切顺利！
,就都写在这
里了.希望对大家有所帮助.
首先俺家LD是材料学背景（找工作难呀，尤其没有身份，所以引用率不高）
09年博士毕业后在一个startup从事研究工作
工作一年后公司给办绿卡，期间先是和公司律师联系，但是无奈公司律师没有什么经验
，LD就和公司
谈可以不可以自己找律师，几经周折，最后公司答应他们出钱，我们自己找律师，也是
在版上看了很
久，得到很多人的帮助，才发信问了3个口碑比较好的律师评估EB1b，最后都说可以，
我们就选定了
口碑最好的，也是最保守的刘宗坤律师，但实际上干活的是pai
在和律师签订完合同（因为签了保密合同，所以无法把一些东西和大家分享），付了一
半钱以后，LD
才开始要review ，找过自己博士期间的老板，但是帮助不大，LD就把所有和他专业相
关的杂志搜索
出来，一个一个的发信，就这样发了很多轮，从杂志的主编到副主编，一般一轮下来就
会有几篇，就
这样从5月底到9月底，有了20+的review ，要review的时候最好找主编，而且干活要快
，要好，
这个对我们来说真的帮了很大的忙，在我们要推荐信快绝望的时候，一个很牛的杂志的
主编帮助了我
们，我们不报希望的问问是否可以做我们的推荐人，结果人家爽快的答应了，而且我们
给他推荐信，
当天就给了我们回复。
其实整个绿卡申请过程中，最难的就是review 和要推荐信。
我们的推荐信也是pai写的，还不错，只有一个推荐人说太长了。要推荐信的整个过程
持续了3个月，
因为时间不好，赶上了暑假，一些教授就不太好找了，我们的推荐信只有一个是中国的
，其它都是美
国当地的，其它国家的太难找了，好不容易找了一个韩国教授，一开始答应了，后来又
反悔了，因为
专业不是很好，所以引用率不高，引用的国家也很少，最后我们放弃了多国选择，就主
攻当地了。感
觉推荐信就是耗时间，不过好像EB1b对推荐信的要求不是特别的高。
祝福大家都一切顺利！
s*s
4 楼
【 以下文字转载自 Dreamer 讨论区 】
发信人: ivydream031 ( 春暖花开), 信区: Dreamer
标 题: 剩女玩的是坚守，剩男玩的是放任
关键字: 剩女 剩男
发信站: BBS 未名空间站 (Tue May 10 12:00:15 2011, 美东)
不知道我写下这个标题可能又会引来多少男同胞的质问和愤慨了，但说实在的，我真的
是认为剩男们
不如剩女们优秀，这种优秀并不是以财富的多少和地位的高低及稀缺程度来区分，而是
看他们是否真
的对生活有一种主动积极的心态，有一个豁达从容的步伐，有一方真实融洽的净土?
当然，你可以举出很多例子来证明剩男的优秀，更可以列出太多剩在家中丑陋和庸俗不
堪的女人。但
以蔚蓝的职业视野来判断，这些都是没有普遍性的，可惜的是 我并没有就此问题作过
调查，所以可能
还是缺少一定的权威性。但这种调查我一直都想进行，希望有兴趣的朋友可以在本文后
面参与下。也
算是我在为我的观点寻找 一个论据。
下面蔚蓝浅浅地谈下剩女优于剩男的三个理由，欢迎每一个人善意哪怕是拍砖地批评，
只为本人己家
之言，切莫上升到男女之战。从我个人来说，其真正目的还是希望能够提醒下相当一部
分尚在睡眠中
的剩男：多向人家女孩子学习没有什么不好的!
理由一：剩女玩的是坚守，剩男玩的是放任;
我曾经专门试着走进过一些剩男和剩女的生活，表面上看来他们都是时髦和判逆的一代
，并且都不愿
意因为婚姻而去放弃自由和快乐。但若是细细分析起来，男人 和女人的出发点却有着
相当大的差别。
剩女们剩下来心中仍有着一份梦想，一份对爱情和幸福的希冀，她们宁缺勿滥，她们在
内心深处一直
在坚守，坚守至那个让自 己心动可以给自己快乐和幸福的白马王子出现。然而，剩男
们却不一样，他
们更多的是因为一种对婚姻的畏惧，他们憎恨婚姻的约束，内心缺乏自信，害怕自己担
不 起婚姻的那
份责任，他们希望人生就可以这样不需承担任何责任，在充分享受自由的无拘中度过…
…说到底玩的还
是一种对自己的放任。
理由二：剩女越剩越优雅，剩男越剩越庸俗;
我曾经写过一篇《爱上剩女的五个理由》，在文中我就提到“‘剩女’其实是离‘圣女
’最近的一个群
体”，之所以这样说，那是因为她们经受住了男人的诱惑， 纵使她们是丑女没有男人
诱惑过她们，她
们也至少经历过“渴望却不能得到”的忍受和蜕变的过程。其中无论是男人看不上她，
还是她没有看上
男人，她始终都是朝 着婚姻和幸福的方向前进，这个前进的过程是一个成熟、进步和
心灵优雅的过
程。然而，剩男们出于面子问题或者本身对于婚姻的意识不同，总爱以“大丈夫何愁无
妻”和“大男儿
志在四方”自居，从而难于意识到自己的弱点。更有甚者，他们会因为年轻的时候没有
钱，创造不了结
婚的条件，从而彻底放弃结婚的想法，最终变 得自暴自弃和破罐子破摔……这在许多
人眼里都会成为
庸俗。
理由三：剩女因才财而剩，剩男因色而剩;
尽管女人都感性，但终归还是讲究实惠的动物，所以大多数女人都会把选择男人的标准
定为有财和有
才，或者是财和才都具备。相信这一点会是很多女人剩下来的 主要原因，特别是在现
代社会里很多高
知女性，她们看男人的眼光是挑剔的，表面上会因为很多具体的原因看不上别人，其实
归根结底还是
因为男人，没有才能让她 觉的没有共同语言，没有经济能力让她觉的给不起她所要的
浪漫和幸福，问
题最终还是回到了才和财两个字上来了。由此看来，其实这样剩下来的女人都是有着发
展 眼光的，她
们认为男人若是给不了他才和财，倒不如不结婚一个人过来得更洒脱，俨然不是那种很
多人所想的那
种“胸大无脑”和没有主见的女人，这种女人倒是处 处都透着一种精明。
可是，大多数剩男们却不 一样。他们剩下来，并不是因为找不着可以适合自己居家过
日子当老婆的女
人，而是他们自始至终都把找老婆的标准给弄错了。他们会把女人的长相和身材放在首
位，对于人家
身上再多的优点和贤良都可以视而不见，孰不知他们到底找的是老婆还是情人，是要花
瓶还是过日子?
表面上从他们嘴里吐出的是“找不到能看上眼 的，我这辈子决不结婚”，其实还是奈
何不了自己心中
那份卑微的对色相的追求。其实，若是挑明来说，谁都能懂其中的道理，女人的色相是
当不了饭吃
的，那纯粹 是一种奢侈品和高消耗品，这一辈子如果硬是要把它当作生活的必需品的
话，显然是愚蠢
之举……由此也自然可以看出剩男们在这份坚守中的盲目了。
发信人: ivydream031 ( 春暖花开), 信区: Dreamer
标 题: 剩女玩的是坚守，剩男玩的是放任
关键字: 剩女 剩男
发信站: BBS 未名空间站 (Tue May 10 12:00:15 2011, 美东)
不知道我写下这个标题可能又会引来多少男同胞的质问和愤慨了，但说实在的，我真的
是认为剩男们
不如剩女们优秀，这种优秀并不是以财富的多少和地位的高低及稀缺程度来区分，而是
看他们是否真
的对生活有一种主动积极的心态，有一个豁达从容的步伐，有一方真实融洽的净土?
当然，你可以举出很多例子来证明剩男的优秀，更可以列出太多剩在家中丑陋和庸俗不
堪的女人。但
以蔚蓝的职业视野来判断，这些都是没有普遍性的，可惜的是 我并没有就此问题作过
调查，所以可能
还是缺少一定的权威性。但这种调查我一直都想进行，希望有兴趣的朋友可以在本文后
面参与下。也
算是我在为我的观点寻找 一个论据。
下面蔚蓝浅浅地谈下剩女优于剩男的三个理由，欢迎每一个人善意哪怕是拍砖地批评，
只为本人己家
之言，切莫上升到男女之战。从我个人来说，其真正目的还是希望能够提醒下相当一部
分尚在睡眠中
的剩男：多向人家女孩子学习没有什么不好的!
理由一：剩女玩的是坚守，剩男玩的是放任;
我曾经专门试着走进过一些剩男和剩女的生活，表面上看来他们都是时髦和判逆的一代
，并且都不愿
意因为婚姻而去放弃自由和快乐。但若是细细分析起来，男人 和女人的出发点却有着
相当大的差别。
剩女们剩下来心中仍有着一份梦想，一份对爱情和幸福的希冀，她们宁缺勿滥，她们在
内心深处一直
在坚守，坚守至那个让自 己心动可以给自己快乐和幸福的白马王子出现。然而，剩男
们却不一样，他
们更多的是因为一种对婚姻的畏惧，他们憎恨婚姻的约束，内心缺乏自信，害怕自己担
不 起婚姻的那
份责任，他们希望人生就可以这样不需承担任何责任，在充分享受自由的无拘中度过…
…说到底玩的还
是一种对自己的放任。
理由二：剩女越剩越优雅，剩男越剩越庸俗;
我曾经写过一篇《爱上剩女的五个理由》，在文中我就提到“‘剩女’其实是离‘圣女
’最近的一个群
体”，之所以这样说，那是因为她们经受住了男人的诱惑， 纵使她们是丑女没有男人
诱惑过她们，她
们也至少经历过“渴望却不能得到”的忍受和蜕变的过程。其中无论是男人看不上她，
还是她没有看上
男人，她始终都是朝 着婚姻和幸福的方向前进，这个前进的过程是一个成熟、进步和
心灵优雅的过
程。然而，剩男们出于面子问题或者本身对于婚姻的意识不同，总爱以“大丈夫何愁无
妻”和“大男儿
志在四方”自居，从而难于意识到自己的弱点。更有甚者，他们会因为年轻的时候没有
钱，创造不了结
婚的条件，从而彻底放弃结婚的想法，最终变 得自暴自弃和破罐子破摔……这在许多
人眼里都会成为
庸俗。
理由三：剩女因才财而剩，剩男因色而剩;
尽管女人都感性，但终归还是讲究实惠的动物，所以大多数女人都会把选择男人的标准
定为有财和有
才，或者是财和才都具备。相信这一点会是很多女人剩下来的 主要原因，特别是在现
代社会里很多高
知女性，她们看男人的眼光是挑剔的，表面上会因为很多具体的原因看不上别人，其实
归根结底还是
因为男人，没有才能让她 觉的没有共同语言，没有经济能力让她觉的给不起她所要的
浪漫和幸福，问
题最终还是回到了才和财两个字上来了。由此看来，其实这样剩下来的女人都是有着发
展 眼光的，她
们认为男人若是给不了他才和财，倒不如不结婚一个人过来得更洒脱，俨然不是那种很
多人所想的那
种“胸大无脑”和没有主见的女人，这种女人倒是处 处都透着一种精明。
可是，大多数剩男们却不 一样。他们剩下来，并不是因为找不着可以适合自己居家过
日子当老婆的女
人，而是他们自始至终都把找老婆的标准给弄错了。他们会把女人的长相和身材放在首
位，对于人家
身上再多的优点和贤良都可以视而不见，孰不知他们到底找的是老婆还是情人，是要花
瓶还是过日子?
表面上从他们嘴里吐出的是“找不到能看上眼 的，我这辈子决不结婚”，其实还是奈
何不了自己心中
那份卑微的对色相的追求。其实，若是挑明来说，谁都能懂其中的道理，女人的色相是
当不了饭吃
的，那纯粹 是一种奢侈品和高消耗品，这一辈子如果硬是要把它当作生活的必需品的
话，显然是愚蠢
之举……由此也自然可以看出剩男们在这份坚守中的盲目了。
k*0
5 楼
MS非要给Surface RT上一块不伦不类的1366x768屏幕。如果MS把屏幕升级成1440x800，
然后允许WP7/8的应用运行于分屏幕模式，就NB了。
WP应用基准分辨率是800x480，作为surface的副应用，主应用还有960x800的空间，相
当充裕。
反正现在800x480应用对wp8完全是中低端待遇，完全不用担心抢了wp旗舰机的风头。反
而一举解决RT上来缺应用的窘境，再结合RT本身的传统优势功能(扩展双显示器，samba
映射，多账号，原生usb，开放文件系统)，平板市场必然大卖啊。
然后允许WP7/8的应用运行于分屏幕模式，就NB了。
WP应用基准分辨率是800x480，作为surface的副应用，主应用还有960x800的空间，相
当充裕。
反正现在800x480应用对wp8完全是中低端待遇，完全不用担心抢了wp旗舰机的风头。反
而一举解决RT上来缺应用的窘境，再结合RT本身的传统优势功能(扩展双显示器，samba
映射，多账号，原生usb，开放文件系统)，平板市场必然大卖啊。
D*F
6 楼
如果某个基因在某个细胞系里是不表达的
那么如果用该基因的启动子drive一个报告基因整合到染色体，
在这个细胞系里会表达吗？
那么如果用该基因的启动子drive一个报告基因整合到染色体，
在这个细胞系里会表达吗？
j*2
7 楼
up
p*i
8 楼
Thanks for sharing!
w*o
9 楼
SB如果有腦子就不是SB了
g*r
10 楼
只有试过才能确定。
基因不表达可以有很多原因，启动子是之一。比如:不同组织的表达谱不同，但基因组
是一样的。
【在 D**F 的大作中提到】
: 如果某个基因在某个细胞系里是不表达的
: 那么如果用该基因的启动子drive一个报告基因整合到染色体，
: 在这个细胞系里会表达吗？
基因不表达可以有很多原因，启动子是之一。比如:不同组织的表达谱不同，但基因组
是一样的。
【在 D**F 的大作中提到】
: 如果某个基因在某个细胞系里是不表达的
: 那么如果用该基因的启动子drive一个报告基因整合到染色体，
: 在这个细胞系里会表达吗？
e*n
11 楼
我也想要啊
l*9
12 楼
恭喜恭喜！
跟你们一样选了Liu，做事的是Pai。不过没有你们结果好，跟他们搞了半年，最后中途
不得不割肉放血中止合同，幸亏跟他们及时中止了合同，否则估计现在还在那里折腾来
折腾去的，不知道希望在哪里的。楼主rp好，一切如意！
【在 d****o 的大作中提到】
: 从昨天发帖以后收到很多邮件,大家都问了很多自己关心的问题,我也不一个一个回信了
: ,就都写在这
: 里了.希望对大家有所帮助.
: 首先俺家LD是材料学背景（找工作难呀，尤其没有身份，所以引用率不高）
: 09年博士毕业后在一个startup从事研究工作
: 工作一年后公司给办绿卡，期间先是和公司律师联系，但是无奈公司律师没有什么经验
: ，LD就和公司
: 谈可以不可以自己找律师，几经周折，最后公司答应他们出钱，我们自己找律师，也是
: 在版上看了很
: 久，得到很多人的帮助，才发信问了3个口碑比较好的律师评估EB1b，最后都说可以，
跟你们一样选了Liu，做事的是Pai。不过没有你们结果好，跟他们搞了半年，最后中途
不得不割肉放血中止合同，幸亏跟他们及时中止了合同，否则估计现在还在那里折腾来
折腾去的，不知道希望在哪里的。楼主rp好，一切如意！
【在 d****o 的大作中提到】
: 从昨天发帖以后收到很多邮件,大家都问了很多自己关心的问题,我也不一个一个回信了
: ,就都写在这
: 里了.希望对大家有所帮助.
: 首先俺家LD是材料学背景（找工作难呀，尤其没有身份，所以引用率不高）
: 09年博士毕业后在一个startup从事研究工作
: 工作一年后公司给办绿卡，期间先是和公司律师联系，但是无奈公司律师没有什么经验
: ，LD就和公司
: 谈可以不可以自己找律师，几经周折，最后公司答应他们出钱，我们自己找律师，也是
: 在版上看了很
: 久，得到很多人的帮助，才发信问了3个口碑比较好的律师评估EB1b，最后都说可以，
k*0
13 楼
我觉得最大障碍可能是传说中的企业文化，wp rt 两个组尿不到一壶里去
：SB如果有腦子就不是SB了
……
【在 w******o 的大作中提到】
: SB如果有腦子就不是SB了
：SB如果有腦子就不是SB了
……
【在 w******o 的大作中提到】
: SB如果有腦子就不是SB了
s*s
14 楼
不表达的可能性太多，比如缺乏专门的转录因子，或者是Promotor被抑制了，
还有就是enhancer不work，不是完全不表达，而是表达量很低而已。
实际上，你这个reporter如果用带原基因的BAC来做(BAC大一点，上下游的
调控序列多半都包括了），成功的几率大一点。
【在 D**F 的大作中提到】
: 如果某个基因在某个细胞系里是不表达的
: 那么如果用该基因的启动子drive一个报告基因整合到染色体，
: 在这个细胞系里会表达吗？
还有就是enhancer不work，不是完全不表达，而是表达量很低而已。
实际上，你这个reporter如果用带原基因的BAC来做(BAC大一点，上下游的
调控序列多半都包括了），成功的几率大一点。
【在 D**F 的大作中提到】
: 如果某个基因在某个细胞系里是不表达的
: 那么如果用该基因的启动子drive一个报告基因整合到染色体，
: 在这个细胞系里会表达吗？
c*l
15 楼
貌似125的chase网站上就能找到
R*d
16 楼
ding
k*0
17 楼
MS非要给Surface RT上一块不伦不类的1366x768屏幕。如果MS把屏幕升级成1440x800，
然后允许WP7/8的应用运行于分屏幕模式，就NB了。
WP应用基准分辨率是800x480，作为surface的副应用，主应用还有960x800的空间，相
当充裕。
反正现在800x480应用对wp8完全是中低端待遇，完全不用担心抢了wp旗舰机的风头。反
而一举解决RT上来缺应用的窘境，再结合RT本身的传统优势功能(扩展双显示器，samba
映射，多账号，原生usb，开放文件系统)，平板市场必然大卖啊。
然后允许WP7/8的应用运行于分屏幕模式，就NB了。
WP应用基准分辨率是800x480，作为surface的副应用，主应用还有960x800的空间，相
当充裕。
反正现在800x480应用对wp8完全是中低端待遇，完全不用担心抢了wp旗舰机的风头。反
而一举解决RT上来缺应用的窘境，再结合RT本身的传统优势功能(扩展双显示器，samba
映射，多账号，原生usb，开放文件系统)，平板市场必然大卖啊。
l*e
18 楼
实验目的是什么？
如果仅仅为了表达，随便弄个minimal promoter就好了，不要用endogenous的
【在 D**F 的大作中提到】
: 如果某个基因在某个细胞系里是不表达的
: 那么如果用该基因的启动子drive一个报告基因整合到染色体，
: 在这个细胞系里会表达吗？
如果仅仅为了表达，随便弄个minimal promoter就好了，不要用endogenous的
【在 D**F 的大作中提到】
: 如果某个基因在某个细胞系里是不表达的
: 那么如果用该基因的启动子drive一个报告基因整合到染色体，
: 在这个细胞系里会表达吗？
j*2
19 楼
那种需要DD的。我不想DD。
【在 c******l 的大作中提到】
: 貌似125的chase网站上就能找到
【在 c******l 的大作中提到】
: 貌似125的chase网站上就能找到
d*o
20 楼
一切都会好的，就像版上很多人说的，自己是最了解自己的，如果有时间可以diy
【在 l****9 的大作中提到】
: 恭喜恭喜！
: 跟你们一样选了Liu，做事的是Pai。不过没有你们结果好，跟他们搞了半年，最后中途
: 不得不割肉放血中止合同，幸亏跟他们及时中止了合同，否则估计现在还在那里折腾来
: 折腾去的，不知道希望在哪里的。楼主rp好，一切如意！
【在 l****9 的大作中提到】
: 恭喜恭喜！
: 跟你们一样选了Liu，做事的是Pai。不过没有你们结果好，跟他们搞了半年，最后中途
: 不得不割肉放血中止合同，幸亏跟他们及时中止了合同，否则估计现在还在那里折腾来
: 折腾去的，不知道希望在哪里的。楼主rp好，一切如意！
w*o
21 楼
SB如果有腦子就不是SB了
s*r
22 楼
得看怎么做了，can go either way
【在 D**F 的大作中提到】
: 如果某个基因在某个细胞系里是不表达的
: 那么如果用该基因的启动子drive一个报告基因整合到染色体，
: 在这个细胞系里会表达吗？
【在 D**F 的大作中提到】
: 如果某个基因在某个细胞系里是不表达的
: 那么如果用该基因的启动子drive一个报告基因整合到染色体，
: 在这个细胞系里会表达吗？
k*0
23 楼
我觉得最大障碍可能是传说中的企业文化，wp rt 两个组尿不到一壶里去
：SB如果有腦子就不是SB了
……
【在 w******o 的大作中提到】
: SB如果有腦子就不是SB了
：SB如果有腦子就不是SB了
……
【在 w******o 的大作中提到】
: SB如果有腦子就不是SB了
k*0
24 楼
现在SS被开了，微软做点啥吧。
【在 w******o 的大作中提到】
: SB如果有腦子就不是SB了
【在 w******o 的大作中提到】
: SB如果有腦子就不是SB了
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