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Treat cell时候medium不一样结果不一样

Treat cell时候medium不一样结果不一样# Biology - 生物学

l*s2015-01-16 08:01

1 楼

有没有办法区分？

d*i2015-01-16 08:01

2 楼

要观察的分子是对营养丰富与否比较敏感，是个sensor蛋白。我用drug处理细胞做time
course发现，
1）用DMEM+10%FBS的时候，western信号是随着时间延长不断下降。
2）用serum free medium的时候，western信号并没有随着时间变化而变化。
请大牛指点，那个结果更可信？谢谢！

s*r2015-01-16 08:01

3 楼

这个太正常了，用不同的培养条件细胞本来状态就不一样

time

【在 d****i 的大作中提到】

: 要观察的分子是对营养丰富与否比较敏感，是个sensor蛋白。我用drug处理细胞做time
: course发现，
: 1）用DMEM+10%FBS的时候，western信号是随着时间延长不断下降。
: 2）用serum free medium的时候，western信号并没有随着时间变化而变化。
: 请大牛指点，那个结果更可信？谢谢！

F*p2015-01-16 08:01

4 楼

全是artificial的。

d*i2015-01-16 08:01

5 楼

如果这么说所有细胞实验都不能用。。。。。。。。

s*r2015-01-16 08:01

6 楼

挺正常的
不同vendor不同batch的FBS还会有差异呢
能编个说的过去的理由解释一下就行

time

【在 d****i 的大作中提到】

v*e2015-01-16 08:01

7 楼

一定要有对照组，否则肯定不行。

w*u2015-01-16 08:01

8 楼

血清对药物的稳定性影响太大了。很多药物在无血清的条件里降解的非常快

h*y2015-01-16 08:01

9 楼

一般情况下，尽量选择用同一种培养液。如楼上说的，FBS的影响很大。FBS中通常含有
很多生长因子，例如IGF，PDGF。还有微量的IL-1，IL-6，TGF-b等。
其次，培养液中的某些离子，尤其是Ca离子的浓度对细胞的影响通常被人忽视。如果你
的细胞是上皮细胞，serum free的medium中通常Ca离子的浓度很低（0.1-0.2mM），而
DMEM中的Ca离子浓度是1.8mM，这对很多细胞粘连蛋白和信号通路都有显著的影响。

time

【在 d****i 的大作中提到】

d*i2015-01-16 08:01

10 楼

感谢楼上几位！我再想想看。