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g*y
2
大家是怎么解决普通商用细胞系yeast污染问题的?
我每次都加fungizone,从100ul/10ml(DMEM, 10%FBS),到200ul/10ml。现在已经第三
代了(1:10 split),还是看得到yeast。
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T*s
3
开两周的会
厉害
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i*a
5
你也是业内人士?
十个字


: 开两周的会

: 厉害



【在 T*********s 的大作中提到】
: 开两周的会
: 厉害

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T*s
7
我是博士二年级

【在 i****a 的大作中提到】
: 你也是业内人士?
: 十个字
:
:
: 开两周的会
:
: 厉害
:

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s*y
8
不要和酵母斗争。直接把细胞都扔了, 消毒培养箱,重新买新的细胞系。

【在 g*********y 的大作中提到】
: 大家是怎么解决普通商用细胞系yeast污染问题的?
: 我每次都加fungizone,从100ul/10ml(DMEM, 10%FBS),到200ul/10ml。现在已经第三
: 代了(1:10 split),还是看得到yeast。

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n*g
9
发考题至高无上 你就忍了粑
[在 iMaJia (iMac,iPod,iPad,iMaJia) 的大作中提到:]
:整整兩周啊,人间地狱啊
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s*x
10
一招很的,limiting dilution后挑单克隆细胞。
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j*o
11
把卖掉的航空里程数和hotel点数请保姆
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s*2
12
most likely not gonna work. yeasts easily out-grow your mammalian cells.

【在 s********x 的大作中提到】
: 一招很的,limiting dilution后挑单克隆细胞。
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i*a
13
忍了这么多年,莫莫支持LD这么多年,又是PHD,又是破事多,又是发考,就是抱着有
一天你们科学家会解决脱发问题的希望。


: 发考题至高无上 你就忍了粑

: [在 iMaJia (iMac,iPod,iPad,iMaJia) 的大作中提到:]

: :整整兩周啊,人间地狱啊



【在 n******g 的大作中提到】
: 发考题至高无上 你就忍了粑
: [在 iMaJia (iMac,iPod,iPad,iMaJia) 的大作中提到:]
: :整整兩周啊,人间地狱啊

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s*2
14
2nd this

【在 s******y 的大作中提到】
: 不要和酵母斗争。直接把细胞都扔了, 消毒培养箱,重新买新的细胞系。
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i*a
15
有通勤保姆,下班回家和周未要自己带。


: 把卖掉的航空里程数和hotel点数请保姆



【在 j***o 的大作中提到】
: 把卖掉的航空里程数和hotel点数请保姆
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g*y
16
今天直接把培养皿扔了。液氮里冻着的那一大盒等老板自己扔。

【在 s******y 的大作中提到】
: 不要和酵母斗争。直接把细胞都扔了, 消毒培养箱,重新买新的细胞系。
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s*y
17
作的对。不要把有限的生命投入无限的和酵母的战斗。
不过,你确定肯定是酵母感染么?对于没有经验的人,有可能会把Mycoplasma感染造成
细胞死亡的碎片错看成酵母。
最简单的办法是把你们培养过细胞的培养液直接涂在YPD 板上,看看能长出什么样的东
西来。细菌,霉菌,酵母,都能在YPD 板上长,Mycoplasma不能。
如果是Mycoplasma,或者酵母,或者霉菌,这些东西绝对会没完没了,阴魂不
散。最简单的办法就是把感染了的细胞全部扔了买新的。
如果是霉菌或者酵母,你们的培养箱必须拆了把内壁全部高温消毒两次(一定要两次,
因为包子一次是蒸不熟的)。箱内循环风扇啥的全部扔了换新的。
如果嫌麻烦而且老板有钱的话,直接把培养箱扔了买个新的。
液氮罐最好把液氮都化掉,然后清洗晾干后再使用。因为酵母,霉菌,和Mycoplasma是
可以通过液氮从一个管传到另外一个管的。

【在 g*********y 的大作中提到】
: 今天直接把培养皿扔了。液氮里冻着的那一大盒等老板自己扔。
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s*s
18
就算能把酵母灭掉,用了这么多药处理,你的细胞也不知道变成什么不可逆的状态了

【在 s******y 的大作中提到】
: 作的对。不要把有限的生命投入无限的和酵母的战斗。
: 不过,你确定肯定是酵母感染么?对于没有经验的人,有可能会把Mycoplasma感染造成
: 细胞死亡的碎片错看成酵母。
: 最简单的办法是把你们培养过细胞的培养液直接涂在YPD 板上,看看能长出什么样的东
: 西来。细菌,霉菌,酵母,都能在YPD 板上长,Mycoplasma不能。
: 如果是Mycoplasma,或者酵母,或者霉菌,这些东西绝对会没完没了,阴魂不
: 散。最简单的办法就是把感染了的细胞全部扔了买新的。
: 如果是霉菌或者酵母,你们的培养箱必须拆了把内壁全部高温消毒两次(一定要两次,
: 因为包子一次是蒸不熟的)。箱内循环风扇啥的全部扔了换新的。
: 如果嫌麻烦而且老板有钱的话,直接把培养箱扔了买个新的。

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r*g
19
我们实验室之前出现过一次~ 把所用东西全部扔了,还是不管用! 最后过了一个月,
发现biosafety cabinet (hood)检查没通过,修好以后再没出现过了
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g*y
20
没想到sunnyday MM战斗经历这么丰富!学习了。我养细胞时间不长,很多都在慢慢摸
索。我在40X下可以看到一种椭圆形的生物,很薄,像一片树叶,或者鞋底,一边扭动
翻转,一边前进。

【在 s******y 的大作中提到】
: 作的对。不要把有限的生命投入无限的和酵母的战斗。
: 不过,你确定肯定是酵母感染么?对于没有经验的人,有可能会把Mycoplasma感染造成
: 细胞死亡的碎片错看成酵母。
: 最简单的办法是把你们培养过细胞的培养液直接涂在YPD 板上,看看能长出什么样的东
: 西来。细菌,霉菌,酵母,都能在YPD 板上长,Mycoplasma不能。
: 如果是Mycoplasma,或者酵母,或者霉菌,这些东西绝对会没完没了,阴魂不
: 散。最简单的办法就是把感染了的细胞全部扔了买新的。
: 如果是霉菌或者酵母,你们的培养箱必须拆了把内壁全部高温消毒两次(一定要两次,
: 因为包子一次是蒸不熟的)。箱内循环风扇啥的全部扔了换新的。
: 如果嫌麻烦而且老板有钱的话,直接把培养箱扔了买个新的。

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s*y
21
你看到的应该不是酵母。酵母是圆滚滚的圆球状的或者椭圆球状的,本身没有运动能力
。而且绝大部分种类的酵母小得很,在40倍镜头下不可能看到那么多的结构细节。
你看到的那个更象是什么细胞寄生虫,听你的描述中推测的大小和形状看来,弄不好是
toxoplasma gondii.
这个东西会感染人体的,注意处理细胞的时候一定要戴好眼镜保护眼睛(因为这东西会
穿透眼睛的黏膜)。我的建议是立刻把所有细胞都扔到消毒袋里高温处理再扔掉。
另外,不要乱叫MM, 我是个中年胖大叔。

【在 g*********y 的大作中提到】
: 没想到sunnyday MM战斗经历这么丰富!学习了。我养细胞时间不长,很多都在慢慢摸
: 索。我在40X下可以看到一种椭圆形的生物,很薄,像一片树叶,或者鞋底,一边扭动
: 翻转,一边前进。

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g*y
22
谢谢分享。有点像。
不好意思,原来此sunnyday非彼sunnyday(艳阳天)。

【在 s******y 的大作中提到】
: 你看到的应该不是酵母。酵母是圆滚滚的圆球状的或者椭圆球状的,本身没有运动能力
: 。而且绝大部分种类的酵母小得很,在40倍镜头下不可能看到那么多的结构细节。
: 你看到的那个更象是什么细胞寄生虫,听你的描述中推测的大小和形状看来,弄不好是
: toxoplasma gondii.
: 这个东西会感染人体的,注意处理细胞的时候一定要戴好眼镜保护眼睛(因为这东西会
: 穿透眼睛的黏膜)。我的建议是立刻把所有细胞都扔到消毒袋里高温处理再扔掉。
: 另外,不要乱叫MM, 我是个中年胖大叔。

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