这篇23分的免疫治疗研究,高光时刻有点多!
免疫治疗目前最有希望照亮SCLC治疗道路上的黑暗,成为SCLC治疗中最闪亮的希望之星。
近日,纽约大学朗格尼医学中心劳拉与艾萨克-帕尔穆特癌症中心Zhang Hua教授课题组发现细胞周期蛋白依赖性激酶7(CDK7)抑制剂YKL-5-124增加了小细胞肺癌对抗PD-1的敏感性,并在多种小鼠小细胞肺癌模型中具有更好的存活率,这种肿瘤细胞的内在效应增强了浸润性免疫细胞的激活作用,从而支持了CDK7在抗肿瘤免疫中的调节作用,提示在ICB和化疗的基础上加用YKL-5-124可以提高小细胞肺癌患者的治疗效果和生存效益。
相关论文发表在Cancer Cell上,题目为“CDK7 Inhibition Potentiates Genome Instability Triggering Anti-tumor Immunity in Small Cell Lung Cancer ”。
①YKL-5-124特异性靶向针对CDK7并通过抑制CDK7 CAK活性干扰细胞周期进程
为了证实在SCLC细胞中YKL-5-124会选择性地与CDK7而非CDK12/13结合,团队进行了竞争性下拉实验(competitive pull-down assay),并检测了YKL-5-124阻断CDK7-Cyclin H复合物下拉或Cyclin K的能力。结果发现:YKL-5-124有效地阻止了Cyclin H的下拉,但未能阻止Cyclin K的下拉。这样证实了YKL-5-124可能对CDK7的具有靶向选择性。
②研究CDK7、CDK1和CDK2的直接靶标
结果发现YKL-5-124处理对RNA Pol II的C末端结构域(CTD)磷酸化没有影响,表明选择性抑制CDK7不会抑制转录的其他进程。
③小鼠动物实验
进一步研究证实,YKL-5-124与CDK12/13的抑制剂THZ531共同处理细胞后抑制RNA PolII CTD的磷酸化,才能实现CDK7和CDK12/13的双重抑制。而双重抑制后Pol II Ser2和Ser5磷酸化水平降低到与CDK7/12/13抑制剂THZ1处理相似的水平。
④研究了YKL-5-124处理是否影响细胞活力和细胞周期进程。
团队测量了随着YKL-5-124浓度干预后不同时间点的细胞存活率。与对照组相比,不同浓度YKL-5-124干预下细胞生长速率均显著降低,并在第7天有细胞毒作用的趋势。
细胞周期分析进一步表明,YKL5-124诱导干预下G1期细胞明显增多,而S期细胞严重减少。说明任何浓度水平YKL-5-124均有可能会抑制SCLC的生长。
⑤抑制CDK7损害DNA复制,导致DNA损伤和微核形成
通过测定溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)的干预来检测YKL-5-124对DNA复制进程的影响。结果发现:掺入BrdU的S期细胞明显减少,表明DNA复制受损。
⑥YKL-5-124触发免疫应答信号诱导促炎细胞因子/趋化因子产生
团队接下来进行转录水平分析,用YKL-5-124处理RPP631细胞48h,收集细胞进行RNA测序,探索CDK7抑制是否会在体外影响免疫反应信号。
结果不出所料:显著调控基因的表达分析显示,YKL-5-124在基因集富集分析(GSEA)中下调了与细胞周期、有丝分裂和E2F靶标相关的基因。而前五个下调最显著的标记信号物中有三个是肿瘤免疫应答相关的,分别是“干扰素反应”、“肿瘤坏死因子信号传递”和“炎症反应”。
⑦在RPP原位模型中测试YKL-5-124是否影响肿瘤生长。用磁共振成像(MRI)跟踪病情发展。经MRI证实肿瘤负荷后,随机分为对照组和YKL-5-124治疗组。
结果发现:对照组的所有小鼠体内都出现肿瘤,肿瘤体积在3周后翻了一番。YKL-5-124组显示出明显的肿瘤生长延迟现象。同时,YKL-5-124显著延长了该组小鼠的生存期中位数。
到现在为止,研究表明无论是体外还是小鼠模型中,YKL-5-124的抗癌作用是确定的。
一篇真正的高分文章是经得起推敲的,低分文章思路基本雷同,而高分文章各有各的亮点,总结下本研究亮点所在:
1、CDK7抑制破坏细胞周期和DNA复制,诱导基因组不稳定
2、CDK7抑制剂YKL-5-124激活IFN-g信号并诱导TNF-a和CXCL9/10
3、YKL-5-124的免疫功能较强,抗PD-1可进一步改善免疫功能
4、YKL-5-124联合抗PD-1及化疗可改善肿瘤反应。
近几年,免疫治疗研究飞速发展,给患者带来了前所未有的希望。各大顶级期刊上不断发表的新研究成果一方面解答了这一领域目前存在的部分问题,另一方面也为拓宽免疫疗法的应用范围提供了依据。
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