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microarray 原始数据分析求助
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microarray 原始数据分析求助# Biology - 生物学
m*n
1
申请了一个社区大学的TT,要求做三十分钟的Teaching demonstration。可是给的题目
很大,如果是实际教学,我可能会花三个课时甚至更多,加入很多讨论和随堂练习。这
种情况如何处理?就干讲?谢谢!
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v*t
2
100年内有戏么?
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A*e
3
看一paper, 想重新分析里面的microarray data。在GEO down下原始的cel文件后,用
affy的expression console分析,过程看起来顺利。但是结果发现,一些control的三
个biologic repeat的值相差很大,包括house keeping基因, repeat之间差异也很大
。然后发现处理组和对照组之间这些control的差异也很大。按我的粗浅理解,这些
control之间的比值应该是以1
为中心的正态分布才对,如果不是这样,数据就有问题了。 请问这是为何? 是我分析
错了,没有做normolize吗?
请高手指点
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M*P
4
don't need to cover all topics. it's not about how much you know but about
how you teach students.

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 7.8

【在 m****n 的大作中提到】
: 申请了一个社区大学的TT,要求做三十分钟的Teaching demonstration。可是给的题目
: 很大,如果是实际教学,我可能会花三个课时甚至更多,加入很多讨论和随堂练习。这
: 种情况如何处理?就干讲?谢谢!

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S*l
5
得per sample log2之后normalize

【在 A*******e 的大作中提到】
: 看一paper, 想重新分析里面的microarray data。在GEO down下原始的cel文件后,用
: affy的expression console分析,过程看起来顺利。但是结果发现,一些control的三
: 个biologic repeat的值相差很大,包括house keeping基因, repeat之间差异也很大
: 。然后发现处理组和对照组之间这些control的差异也很大。按我的粗浅理解,这些
: control之间的比值应该是以1
: 为中心的正态分布才对,如果不是这样,数据就有问题了。 请问这是为何? 是我分析
: 错了,没有做normolize吗?
: 请高手指点

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A*e
6
多谢了,请问如何做normalize? 我现在得到了6个chp file和一个rma.summary的txt
file。 请问接下来在expression console里面怎么做normalize?

【在 S**********l 的大作中提到】
: 得per sample log2之后normalize
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j*p
7
just use "rma.summary.txt", from this file name, it seems data been RMA
normalized.

txt

【在 A*******e 的大作中提到】
: 多谢了,请问如何做normalize? 我现在得到了6个chp file和一个rma.summary的txt
: file。 请问接下来在expression console里面怎么做normalize?

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t*s
8
你这样问问题没人能回答你
至少给点有用的信息
比如说用的什么方法(expression console里有mas5,rma etc),什么参数,而不是
用什么软件(expression console里至少有三种normalized的方法)
你有多少个sample,(大于8或者少于8)
少于8基本只能用mas5,大于8可以用rma。
基本流程
1. QC
probe level: 3'/5'
DNA degradation
background intensity
precent present
probe set level:
NUSE/RLE
2. Prepossessing.
Normalization
non-specific filtering
3. post-analysis
do whatever you want
you can try MA plot to compare two arrays.

【在 A*******e 的大作中提到】
: 看一paper, 想重新分析里面的microarray data。在GEO down下原始的cel文件后,用
: affy的expression console分析,过程看起来顺利。但是结果发现,一些control的三
: 个biologic repeat的值相差很大,包括house keeping基因, repeat之间差异也很大
: 。然后发现处理组和对照组之间这些control的差异也很大。按我的粗浅理解,这些
: control之间的比值应该是以1
: 为中心的正态分布才对,如果不是这样,数据就有问题了。 请问这是为何? 是我分析
: 错了,没有做normolize吗?
: 请高手指点

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t*d
9
"少于8基本只能用mas5,大于8可以用rma。"
有这么一说?

【在 t******s 的大作中提到】
: 你这样问问题没人能回答你
: 至少给点有用的信息
: 比如说用的什么方法(expression console里有mas5,rma etc),什么参数,而不是
: 用什么软件(expression console里至少有三种normalized的方法)
: 你有多少个sample,(大于8或者少于8)
: 少于8基本只能用mas5,大于8可以用rma。
: 基本流程
: 1. QC
: probe level: 3'/5'
: DNA degradation

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f*9
10
借地一问,有没有什么初级的教程,各位推荐下。
多谢先。
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t*s
12
算probe effect,要simple size的
当然cutoff的标准不那么好定,一般觉得是8-10左右
如果小于8,也有一些其他更好办法,相对比较复杂,一般就用mas5了

【在 t*d 的大作中提到】
: "少于8基本只能用mas5,大于8可以用rma。"
: 有这么一说?

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t*d
13
谢谢!
有相关文献么?

【在 t******s 的大作中提到】
: 算probe effect,要simple size的
: 当然cutoff的标准不那么好定,一般觉得是8-10左右
: 如果小于8,也有一些其他更好办法,相对比较复杂,一般就用mas5了

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A*e
14
看来我犯了很多错误啊,
只有6个sample,对照组和处理组 每个三个重复,一共6个。我却用了RMA。 我用的是3
' expression analysis。 我知道的太少了,还是求推荐文献读
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t*s
15
如果是预处理的话,Bolstad 的毕业论文不错(老板是 TP speed),通俗易懂,一天
入门哈
Low-level Analysis of High-density Oligonucleotide Array Data: Background,
Normalization and Summarization
by Benjamin Milo Bolstad

是3

【在 A*******e 的大作中提到】
: 看来我犯了很多错误啊,
: 只有6个sample,对照组和处理组 每个三个重复,一共6个。我却用了RMA。 我用的是3
: ' expression analysis。 我知道的太少了,还是求推荐文献读

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t*s
16
如果就6个sample,简单的办法用mas5,复杂的办法用一个预定义的reference set算
probe effect。

是3

【在 A*******e 的大作中提到】
: 看来我犯了很多错误啊,
: 只有6个sample,对照组和处理组 每个三个重复,一共6个。我却用了RMA。 我用的是3
: ' expression analysis。 我知道的太少了,还是求推荐文献读

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l*1
17
EN T. P. Speed is Godfather in this field:
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11842121
or
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12925520
and
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20193046
cited his lab paper.

【在 t******s 的大作中提到】
: 如果是预处理的话,Bolstad 的毕业论文不错(老板是 TP speed),通俗易懂,一天
: 入门哈
: Low-level Analysis of High-density Oligonucleotide Array Data: Background,
: Normalization and Summarization
: by Benjamin Milo Bolstad
:
: 是3

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